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公开(公告)号:CN109265522B
公开(公告)日:2022-03-04
申请号:CN201811145516.X
申请日:2018-09-29
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测犬瘟热病毒血凝蛋白H抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用。所述的致敏聚苯乙烯纳米微球的表面偶联有犬瘟热病毒重组血凝蛋白H,所述的重组血凝蛋白H为犬瘟热病毒血凝蛋白H的截短蛋白,位于犬瘟热病毒血凝蛋白H基因的第550nt~1002nt位,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。利用该重组蛋白作为抗原制备了致敏彩色聚苯乙烯纳米微球,用于检测犬瘟热病毒血清抗体。实验证明,制备的致敏微球无自凝现象,重复性好,性质稳定。本发明建立的CDV抗体间接凝集试验具有良好的特异性,操作简单,眼观判定结果,适合临床上对单个血清样品的检测,成本低,便于推广等优点。
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公开(公告)号:CN109212230A
公开(公告)日:2019-01-15
申请号:CN201811064305.3
申请日:2018-09-12
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种用于检测犬细小病毒结构蛋白VP2抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用。所述的致敏聚苯乙烯纳米微球的表面偶联有犬细小病毒重组VP2蛋白,所述的重组VP2蛋白为犬细小病毒VP2蛋白的截短蛋白,位于犬细小病毒VP2蛋白的第365~486位,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。该蛋白含有VP2蛋白的主要抗原表位区、抗原性强、亲水性好,具有较强的特异性和免疫原性。利用该重组蛋白作为抗原制备了致敏彩色聚苯乙烯纳米微球,用于检测犬细小病毒血清抗体。实验证明,制备的致敏微球无自凝现象,重复性好,性质稳定。本发明的方法适用于宠物临床对单份或多份犬血清的快速检测,与商品化检测试剂盒比较,操作简便,检测结果有较高的确准性和符合率。
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公开(公告)号:CN104031152A
公开(公告)日:2014-09-10
申请号:CN201410325521.4
申请日:2014-07-09
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K19/00 , C07K16/18 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N15/66 , C12N1/21 , C12N5/20 , G01N33/577 , A61K39/395 , A61P31/04 , C12R1/19 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种重组猪/牛源大肠杆菌耐热肠毒素(STp)融合蛋白STp5-His、抗该蛋白的单克隆抗体及其应用,本发明中所述的融合蛋白STp5-His的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示,编码所述融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明中猪/牛源大肠杆菌耐热肠毒素STp成熟肽基因(estp)经过4次串联后表达出融合蛋白STp5-His,使原本不具有免疫原性的天然STp蛋白具有了良好的免疫原性。本发明采用细胞融合技术制备出针对该融合蛋白STp5-His和天然STp的特异性单克隆抗体,解决了生产实践中无法对STp进行检测的难题,且该特异性单克隆抗体能够在体外中和天然STp,具有临床应用的前景。
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公开(公告)号:CN109212230B
公开(公告)日:2021-11-30
申请号:CN201811064305.3
申请日:2018-09-12
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K14/015
Abstract: 本发明公开了一种用于检测犬细小病毒结构蛋白VP2抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用。所述的致敏聚苯乙烯纳米微球的表面偶联有犬细小病毒重组VP2蛋白,所述的重组VP2蛋白为犬细小病毒VP2蛋白的截短蛋白,位于犬细小病毒VP2蛋白的第365~486位,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。该蛋白含有VP2蛋白的主要抗原表位区、抗原性强、亲水性好,具有较强的特异性和免疫原性。利用该重组蛋白作为抗原制备了致敏彩色聚苯乙烯纳米微球,用于检测犬细小病毒血清抗体。实验证明,制备的致敏微球无自凝现象,重复性好,性质稳定。本发明的方法适用于宠物临床对单份或多份犬血清的快速检测,与商品化检测试剂盒比较,操作简便,检测结果有较高的确准性和符合率。
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公开(公告)号:CN104031152B
公开(公告)日:2017-01-18
申请号:CN201410325521.4
申请日:2014-07-09
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K19/00 , C07K16/18 , C12N15/62 , C12N15/63 , C12N15/66 , C12N1/21 , C12N5/20 , G01N33/577 , A61K39/395 , A61P31/04 , C12R1/19 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种重组猪/牛源大肠杆菌耐热肠毒素(STp)融合蛋白STp5-His、抗该蛋白的单克隆抗体及其应用,本发明中所述的融合蛋白STp5-His的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示,编码所述融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明中猪/牛源大肠杆菌耐热肠毒素STp成熟肽基因(estp)经过4次串联后表达出融合蛋白STp5-His,使原本不具有免疫原性的天然STp蛋白具有了良好的免疫原性。本发明采用细胞融合技术制备出针对该融合蛋白STp5-His和天然STp的特异性单克隆抗体,解决了生产实践中无法对STp进行检测的难题,且该特异性单克隆抗体能够在体外中和天然STp,具有临床应用的前景。
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公开(公告)号:CN105219888A
公开(公告)日:2016-01-06
申请号:CN201510771244.4
申请日:2015-11-12
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种西江病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,它涉及一种西江病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法。本发明的目的是要解决现有技术中没有西江病毒荧光定量PCR检测方法。本发明方法为:一、设计引物;二、标准曲线构建;三、进行阴阳性判断。本发明的方法检测的敏感性可达到100个拷贝的病毒RNA分子,对于单个样本检测小于2个小时,操作简易,可以进行高通量的样品检测。
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公开(公告)号:CN108588248B
公开(公告)日:2021-08-27
申请号:CN201810428161.9
申请日:2018-05-07
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了用于检测产肠毒素大肠杆菌5种菌毛基因的多重PCR引物组、试剂盒及检测方法。引起幼畜腹泻的产肠毒素大肠杆菌常带有F4、F5、F6、F18和F41菌毛及其编码基因,本发明通过对5种菌毛基因序列的比对分析,设计并合成了一套特异性检测引物组,并建立了一种用于检测产肠毒素大肠杆菌5种菌毛基因的多重PCR检测方法,组装了一个含有特异性引物组的试剂盒。使用本发明的试剂盒检测产肠毒素大肠杆菌5种菌毛基因具有特异性强,快速简单,灵敏度好等优点,适用于快速检测从病畜腹泻样品中分离的大肠杆菌的菌毛基因,是筛选和鉴定产肠毒素大肠杆菌菌毛血清型的有效技术手段。
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公开(公告)号:CN112899390A
公开(公告)日:2021-06-04
申请号:CN202110137268.X
申请日:2021-02-01
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于植物分子标记技术领域,特别是涉及一种番茄节间长短早期鉴定的SCAR标记及鉴定方法。本发明公开了番茄节间长短早期鉴定的SCAR标记TTHH‑F0R0,其核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。本发明还进一步提供了所述SCAR标记的扩增引物对以及番茄节间长短早期鉴定的方法。本发明鉴定得到一个与番茄节间长短紧密连锁的SCAR标记。采用该标记进行鉴定不需要经番茄株型稳定时期,在苗期就可以准确快速的鉴定出番茄节间长短的株型情况,可大大加快番茄优异株型品种的选育进程。本发明SCAR标记引物不需要酶切,只需要PCR一步法检测,检测成本低、准确率较高等优点,可较好的用于番茄节间株型分子标记辅助选择育种。
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公开(公告)号:CN105219888B
公开(公告)日:2019-09-06
申请号:CN201510771244.4
申请日:2015-11-12
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851
Abstract: 一种西江病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,它涉及一种西江病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法。本发明的目的是要解决现有技术中没有西江病毒荧光定量PCR检测方法。本发明方法为:一、设计引物;二、标准曲线构建;三、进行阴阳性判断。本发明的方法检测的敏感性可达到100个拷贝的病毒RNA分子,对于单个样本检测小于2个小时,操作简易,可以进行高通量的样品检测。
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公开(公告)号:CN109265522A
公开(公告)日:2019-01-25
申请号:CN201811145516.X
申请日:2018-09-29
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测犬瘟热病毒血凝蛋白H抗体的致敏聚苯乙烯纳米微球及其制备方法和应用。所述的致敏聚苯乙烯纳米微球的表面偶联有犬瘟热病毒重组血凝蛋白H,所述的重组血凝蛋白H为犬瘟热病毒血凝蛋白H的截短蛋白,位于犬瘟热病毒血凝蛋白H基因的第550nt~1002nt位,其氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。利用该重组蛋白作为抗原制备了致敏彩色聚苯乙烯纳米微球,用于检测犬瘟热病毒血清抗体。实验证明,制备的致敏微球无自凝现象,重复性好,性质稳定。本发明建立的CDV抗体间接凝集试验具有良好的特异性,操作简单,眼观判定结果,适合临床上对单个血清样品的检测,成本低,便于推广等优点。
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