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公开(公告)号:CN119432770A
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202510003341.2
申请日:2025-01-02
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种特异性结合产气荚膜梭菌(C.p)β2毒素重组蛋白的单克隆抗体、杂交瘤细胞株及应用。本发明提供了特异性结合β2毒素蛋白的单克隆抗体和分泌这种单克隆抗体的保藏编号为CCTCC NO:C2024312的杂交瘤细胞株CPB2‑2A4,单克隆抗体仅与C.p β2毒素蛋白发生反应,而不与其他感染牛羊的病原体发生交叉反应,具有极高的特异性;试剂盒利用竞争ELISA技术,以与C.p β2毒素重组蛋白特异性结合的鼠单克隆抗体作为竞争抗体,可检测多种动物来源血清中C.p β2毒素抗体,避免了样本来源的种属限制。另外,试剂盒重复性良好。试剂盒操作时技术要求比较宽松,可在生产中广泛推广使用,应用于C.p流行病学调查和疫苗免疫水平监测。
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公开(公告)号:CN119876040A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202510065662.5
申请日:2025-01-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , C07K14/23 , C07K1/22 , C12N15/70 , C12N15/31 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于细胞工程技术领域,公开了一种新的特异性结合Bp26重组蛋白的优势单克隆抗体及应用,表位的序列为ASPDMAILNL,为布鲁氏菌Bp26蛋白的最优势表位,针对其分泌特异性结合Bp26重组蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株6E8于2025年1月7日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:C202543。针对布鲁氏菌Bp26重组蛋白的单克隆抗体能与Bp26蛋白特异性结合,具有较好的阻断效果。检测布鲁氏菌血清抗体的阻断ELISA方法以Bp26重组蛋白为抗原、特异性结合布鲁氏菌重组蛋白的单克隆抗体为检测抗体建立而成。本发明的阻断ELISA抗体检测方法比用于检测布鲁氏菌血清抗体的间接血凝试剂盒具有更高的特异性和敏感性。
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公开(公告)号:CN119552903A
公开(公告)日:2025-03-04
申请号:CN202411487655.6
申请日:2024-10-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于但不限于基因工程技术技术领域,公开了一种布鲁氏菌效应蛋白BspE基因缺失株的构建方法及应用,利用同源重组及SacB反向筛选技术构建BspE基因缺失株,以牛种布鲁氏菌A19疫苗株菌液为模板,PCR扩增得到BspE基因上、下游同源臂,将胶回收的BspE基因上、下游同源臂进行融合PCR扩增,将获得的融合片段与pUC19‑SacB质粒进行连接、转化,获得重组质粒pUC19‑ΔBspE。将该质粒电转化至牛种布鲁氏菌A19感受态细胞,经卡那抗性及蔗糖压力筛选,PCR鉴定及测序,所得阳性转化子即为牛种布鲁氏菌BspE缺失株,该缺失疫苗毒株提高了抗菌细胞因子及特异性布鲁氏菌抗体IgG的水平,是一种新型的布鲁氏菌候选减毒疫苗毒株,具有较好的市场前景。
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公开(公告)号:CN120005012A
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202510108031.7
申请日:2025-01-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/12 , C12N15/13 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供特异性结合布鲁氏菌LPS的单克隆抗体,所述单克隆抗体具有3个轻链互补决定区以及3个重链互补决定区;所述轻链互补决定区的氨基酸序列分别为:序列表SEQ ID NO.1中第24位至40位氨基酸,序列表SEQ ID NO.1中第56位至62位氨基酸,序列表SEQ ID NO.1中第95位至102位氨基酸;所述重链互补决定区的氨基酸序列分别为:序列表SEQ ID NO.3中第31位至37位氨基酸,序列表SEQ ID NO.3中第52位至67位氨基酸,序列表SEQ ID NO.3中第100位至113位氨基酸。本发明还公开了其制备方法及其在定量检测布鲁氏菌LPS抗体水平中的应用。
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公开(公告)号:CN119824112A
公开(公告)日:2025-04-15
申请号:CN202411795266.X
申请日:2024-12-09
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种羊支原体Mo、Mccp、Mmc三重PCR检测方法的建立及应用,通过采用高通量Mauve基因组共线性分析三种羊支原体基因组相互之间的特异性差异区段,设计并筛选出能够鉴别诊断三种羊支原体特异性引物,通过引物序列扩增、测序,鉴定出三种新的羊支原体鉴别诊断靶标分子,分别为Mo鉴别诊断的靶标分子DprA,Mccp鉴别诊断的靶标分子MCCPF38_00240,Mmc鉴别诊断的靶标分子restriction endonuclease subunit S。利用新靶标特异性区段,建立了能够同步鉴别诊断三种羊支原体(Mo、Mccp、Mmc)的三重PCR方法。本发明的PCR方法具有临床便捷、快速诊断的特点,能够在羊支原体诊断的临床中广泛使用,具有较好的市场前景和经济价值。
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