公开(公告)号：CN119574863A

公开(公告)日：2025-03-07

申请号：CN202411562087.1

申请日：2024-11-04

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 刘伟 ,  彭德财 ,  邵军军 ,  高闪电 ,  常惠芸

IPC: G01N33/569 ,  G01N21/76 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  C07K19/00 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开一种用于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)p30抗体检测的竞争化学发光检测试剂盒及其应用。本发明利用LgBiT与HiBiT互补结合形成荧光素酶催化底物furimazine产生化学发光的原理，将ASFVp30单抗16‑5E7E8与HiBiT进行融合表达后，利用竞争化学发光法检测血清中ASFVp30抗体。本发明的试剂盒用于检测ASFVp30抗体不仅灵敏度高、特异性好，而且操作简单、反应时间短，仅需20min就能快速有效地检测出待检血清中是否含有ASFVp30抗体，在ASFV抗体检测中具有很好的应用前景，为ASF的综合防治提供了技术手段。

公开(公告)号：CN119574864A

公开(公告)日：2025-03-07

申请号：CN202411562498.0

申请日：2024-11-04

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 刘伟 ,  邵军军 ,  高闪电 ,  温升辉 ,  彭德财 ,  常惠芸

IPC: G01N33/569 ,  G01N21/76 ,  G01N33/577 ,  C07K19/00 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了一种基于化学发光法定量检测非洲猪瘟病毒的试剂盒及其应用。本发明属于病毒检测技术领域。所述的试剂盒包括包被抗非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体2‑1B3G3的化学发光板、融合蛋白16‑5E7E8‑HiBiT、LgBiT和furimazine化合物；其中，所述的融合蛋白16‑5E7E8‑HiBiT是将抗非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体16‑5E7E8的轻链、linker、HiBiT、P2A和16‑5E7E8的重链依次连接后得到，所述的融合蛋白16‑5E7E8‑HiBiT的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明所述的试剂盒具有高灵敏度和宽的线性范围，p30蛋白的检测限为15pg/mL，ASFV的检测限为12.2HAD50。此外，该试剂盒能够定量检测ASFV感染猪的组织、血液以及鼻拭子中ASFVp30含量，在ASFV病原检测中具有很好的应用前景。

公开(公告)号：CN119320436A

公开(公告)日：2025-01-17

申请号：CN202411474710.8

申请日：2024-10-22

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 高闪电 ,  邵军军 ,  刘伟 ,  周广青 ,  常惠芸 ,  郭慧琛

IPC: C07K14/18 ,  C07K19/00 ,  C12N15/40 ,  C12N15/62 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种牛病毒性腹泻病毒NS2截短蛋白及在BVDV抗体检测中的应用。本发明首先提供了一种BVDV NS2蛋白的截短蛋白，所述截短蛋白分别与谷胱甘肽S移换酶(GST)和辣根过氧化物酶(HRP)融合后可溶性表达，且与BVDV抗体阳性血清具有较好的反应原性，与BVDV抗体阴性血清不发生反应，可用于BVDV抗体检测；其次，本发明以GST与所述截短蛋白的融合蛋白为包被抗原，以HRP与所述截短蛋白的融合蛋白为检测抗原，构建了BVDV抗体检测的双抗原夹心ELISA方法，所述方法具有敏感性高、特异性好、操作简便、易于推广、成本低等技术优点，可适用用于牛群中BVDV抗体的筛查。

公开(公告)号：CN118147026A

公开(公告)日：2024-06-07

申请号：CN202410171537.8

申请日：2024-02-06

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 邵军军 ,  侯茁 ,  刘伟 ,  高闪电 ,  常惠芸 ,  郭慧琛

IPC: C12N1/21 ,  C12N1/38 ,  C12P21/02 ,  C07K14/09 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种用于原核表达系统的自诱导培养基及其应用。所述的自诱导培养基中含有胰蛋白胨5g～20g，酵母粉5g～20g，甘油3g～9g，葡萄糖0.3g～0.9g，乳糖1～4g，KH2PO43.4g/L，Na2HPO4‑7H2O 3.35g/L，NH4Cl 2.68g/L，Na2SO40.71g/L，MgSO40.493g/L以及微量元素，所述的微量元素含有50mM FeCl3，20mM CaCl2，10mM MnCl2，10mM ZnSO4，2mM CoCl2，2mM CuCl2，2mM NiCl2，2mM Na2MoO4，2mM Na2SeO3以及2mM H3BO3。研究结果显示，所述的自诱导培养基，通过阶梯温度调控策略，能够显著提高抗原的可溶性量，同等条件下抗原产量是普通LB培养基的6倍多，生产每毫克抗原所需成本仅为普通LB培养基的20％左右，大大实现了降本增效的目的。