公开(公告)号：CN119574863A

公开(公告)日：2025-03-07

申请号：CN202411562087.1

申请日：2024-11-04

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 刘伟 ,  彭德财 ,  邵军军 ,  高闪电 ,  常惠芸

IPC: G01N33/569 ,  G01N21/76 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577 ,  C07K19/00 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开一种用于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)p30抗体检测的竞争化学发光检测试剂盒及其应用。本发明利用LgBiT与HiBiT互补结合形成荧光素酶催化底物furimazine产生化学发光的原理，将ASFVp30单抗16‑5E7E8与HiBiT进行融合表达后，利用竞争化学发光法检测血清中ASFVp30抗体。本发明的试剂盒用于检测ASFVp30抗体不仅灵敏度高、特异性好，而且操作简单、反应时间短，仅需20min就能快速有效地检测出待检血清中是否含有ASFVp30抗体，在ASFV抗体检测中具有很好的应用前景，为ASF的综合防治提供了技术手段。

公开(公告)号：CN119574864A

公开(公告)日：2025-03-07

申请号：CN202411562498.0

申请日：2024-11-04

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 刘伟 ,  邵军军 ,  高闪电 ,  温升辉 ,  彭德财 ,  常惠芸

IPC: G01N33/569 ,  G01N21/76 ,  G01N33/577 ,  C07K19/00 ,  C12N15/85

Abstract: 本发明公开了一种基于化学发光法定量检测非洲猪瘟病毒的试剂盒及其应用。本发明属于病毒检测技术领域。所述的试剂盒包括包被抗非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体2‑1B3G3的化学发光板、融合蛋白16‑5E7E8‑HiBiT、LgBiT和furimazine化合物；其中，所述的融合蛋白16‑5E7E8‑HiBiT是将抗非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体16‑5E7E8的轻链、linker、HiBiT、P2A和16‑5E7E8的重链依次连接后得到，所述的融合蛋白16‑5E7E8‑HiBiT的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明所述的试剂盒具有高灵敏度和宽的线性范围，p30蛋白的检测限为15pg/mL，ASFV的检测限为12.2HAD50。此外，该试剂盒能够定量检测ASFV感染猪的组织、血液以及鼻拭子中ASFVp30含量，在ASFV病原检测中具有很好的应用前景。