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公开(公告)号：CN103849602A
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201310285025.6
申请日：2013-07-08
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明提供了一种牛睾丸细胞系。本发明还提供了该细胞系的建立方法，主要步骤为：(1)原代培养：无菌获取初生犊牛睾丸，清除粘附组织，采用胰酶消化法分离获得高活力的牛睾丸细胞；将分离得到的高活力的牛睾丸细胞培养于DMEM培养基中，置于37℃，5％CO2条件下培养，得原代牛睾丸细胞；(2)转染和筛选：提取纯化含有hTERT基因的真核表达质粒pCI-neo-hTERT，采用脂质体转染法，将提取纯化的的真核表达质粒pCI-neo-hTERT导入步骤(1)原代培养的牛睾丸细胞进行转染；(3)筛选和扩大培养。本发明牛睾丸细胞易于培养，生长速度较快，能稳定传代，细胞活率高、纯度高且能很好保藏；本发明方法操作简便，便于推广应用。本细胞系可应用于生产猪瘟疫苗、羊痘、羊口疮疫苗等。
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公开(公告)号：CN114878809B
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202210663214.1
申请日：2022-06-13
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/558 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/577 , C12N15/70 , C12N15/31 , C07K14/33 , C07K16/12
Abstract: 本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种产气荚膜梭菌α毒素抗体荧光微球免疫层析检测试剂盒及其制备方法。试剂盒至少包括试纸条，试纸条由加样端开始依次设有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫；结合垫上喷涂有偶联产气荚膜梭菌α毒素截短蛋白的荧光微球；硝酸纤维素膜靠近吸水垫一侧设有质控线，质控线喷涂有鼠源产气荚膜梭菌α毒素截短蛋白的单克隆抗体，靠近加样端一侧设有检测线，检测线喷涂有截短表达的产气荚膜梭菌α毒素蛋白，截短表达的产气荚膜梭菌α毒素蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明实现了对多种动物血清中α毒素抗体检定性与定量的检测，具有广泛实用性。
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公开(公告)号：CN114934020B
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202210113778.8
申请日：2022-01-30
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/34 , C12N7/00 , C12Q1/02 , A61K39/12 , A61K39/245 , A61K39/215 , A61P31/20 , A61P31/22 , A61P31/14 , A01N1/02 , C12R1/91 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了猪视网膜上皮细胞系(WWX04‑PR)及其建立方法和应用，本发明猪视网膜上皮细胞易于培养，生长速度较快，能稳定传代，细胞活率高、纯度高且能很好保藏；通过无菌获取猪眼球组织分离获得高活力的原代猪视网膜细胞，然后导入含有猪腺病毒E1基因的真核表达质粒pCI‑neo‑E1，筛选和扩大培养，获得一株可稳定传代猪视网膜上皮细胞系；得到的细胞系能够用于生产猪圆环病毒、猪伪狂犬病毒、猪流行性腹泻病毒等疫苗抗原，还可用于临床野毒分离鉴定。该细胞系可作为人类视网膜相关疾病研究的细胞模型，也是研究中枢神经系统发育和功能的经典模型。
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公开(公告)号：CN116239656A
公开(公告)日：2023-06-09
申请号：CN202310091251.4
申请日：2023-02-09
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及发酵工程技术领域，具体涉及一种高效表达禽法氏囊病毒VP2蛋白的方法。方法为将表达菌株的种子液接种至发酵罐中，于32‑37℃下开始发酵，待发酵液OD600值≥3时，加入培养保护液，提高发酵温度至40‑42℃，开始升温诱导，直至发酵结束；培养保护液包括100g/L海藻糖和100g/L谷氨酸钠。本发明在升温诱导时添加培养保护液，可高效表达可溶性VP2蛋白，蛋白效价可得到3‑4倍的提高，且培养基成本低廉，发酵工艺简单易行，为工业化生产VP2疫苗奠定了坚实的基础。
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公开(公告)号：CN114031426B
公开(公告)日：2023-04-11
申请号：CN202111341355.3
申请日：2021-11-12
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明适用于无害化处理技术领域，提供了一种畜禽粪便无害化自动处理设备，包括箱体，所述箱体上分别安装有进料件和出料件，还包括：过滤打捞组件，设置在箱体内，用于对滤渣进行至少一次过滤打捞；驱动组件，用于驱动过滤打捞组件从箱体底部滑动到顶部实现打捞以及打捞后进行翻转卸料，本发明畜禽粪便无害化自动处理设备，能够有针对性的针对含有纤维的滤渣完成对滤渣的自动化处理，自动化程度高，有利于将滤渣从待处理物的分离，能够实现畜禽排泄物蕴含能量的较大化利用，同时，可以实现节约式自动化投药。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115932255A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211235776.2
申请日：2022-10-10
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/569 , G01N33/533 , G01N33/535 , G01N33/543 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及生物技术和动物疫病诊断技术领域，具体涉及一种山羊痘病毒抗体荧光微球免疫层析检测试剂盒及其制备方法。试剂盒至少包括试纸条，试纸条自加样端开始依次为样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；结合垫上喷涂有山羊痘截短蛋白标记羧基修饰的时间分辨荧光微球，山羊痘截短蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，山羊痘截短蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，靠近加样端的检测线包被有山羊痘截短蛋白；靠近吸水垫端的质控线包被有鼠原山羊痘截短蛋白的单克隆抗体。本发明试剂盒具有快速、灵敏、准确、稳定等优点，适用于临床大规模样本的检测。
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公开(公告)号：CN113444841B
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202110970275.8
申请日：2021-08-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q1/6806 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种狐狸逆转录病毒SYBR GreenⅠ荧光RT‑PCR试剂盒及使用方法，试剂盒包括核酸释放剂、2×One step TB Green RT‑PCR BufferⅢ、酶混合液、阴性对照、阳性对照和引物组；该引物组核苷酸序列为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示的特定碱基序列；使用方法包括准备待测样本模板、荧光RT‑PCR扩增和结果分析。将该检测引物用于SYBR GreenⅠ荧光RT‑PCR试剂盒中，使该试剂盒既具有适用性广、适用性强的优点，又具有检测的准确度高、特异性强的优点；另外，使用该试剂盒，一次加样可完成狐狸逆转录病毒检测，检测过程简单、易于操作。
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公开(公告)号：CN111218528B
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202010167385.6
申请日：2020-03-11
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及病毒检测技术领域，具体涉及基于双基因检测非洲猪瘟病毒的PCR引物组、试剂盒及应用。本发明中的引物组及方法的检测特异性高、重复性好、灵敏度高，同时具有操作简便，检测时间短等优势，可有效地降低假阳性结果的出现，降低阳性对照对检测环境的影响，在非洲猪瘟病毒的快速检测中具有较高的应用价值。
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公开(公告)号：CN109337995B
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN201811279119.1
申请日：2018-10-30
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 中国农业大学
Abstract: 本发明提供土拉杆菌及其亚种的PCR检测方法和试剂盒。所述试剂盒中至少含有检测土拉杆菌的通用引物(SEQ ID NO：1‑2)以及检测土拉杆菌亚种F.m、F.n、F.tu和F.h的特异性PCR引物(SEQ ID NO：3‑10)。本发明的PCR检测方法能够快速确定土拉杆菌，并对土拉杆菌进行亚种的确定，可直接对病料检测，避免了常规的细菌分离、培养和生化鉴定的复杂过程，缩短了检测时间，且操作方便，简单培训即能熟练使用，同时避免了操作人员直接接触病原，提高了检验过程的安全性。本方法敏感性高、特异性强，能将土拉杆菌亚种与其他亚种区分开来，且无任何交叉反应。本发明为基层分析单位检测提供有力的技术支持。
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公开(公告)号：CN113699150B
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202110966613.0
申请日：2021-08-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明属于分子生物学和细胞生物学领域，具体涉及一种PKR基因敲减Marc‑145细胞系。本发明提供了一种利用RNAi敲减PKR基因的siRNA的正向和反向序列如SEQ ID NO:1‑2所示；shRNA的序列如SEQ ID NO:3所示。将含如SEQ ID NO:3所示目的基因序列的表达载体转染Marc‑145细胞系，筛选后可获得能够稳定遗传的PKR蛋白表达量降低的细胞系：Marc‑145∧143，该细胞系中PKR蛋白表达量降低不低于90%。该siRNA、shRNA或Marc‑145∧143细胞系可用于生产预防或治疗NDV、PRRSV或PRV的药剂或疫苗。
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