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公开(公告)号:CN113588946A
公开(公告)日:2021-11-02
申请号:CN202110844473.X
申请日:2021-07-26
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种猪肺炎支原体抗体间接ELISA检测用的重组蛋白,所述重组蛋白的氨基酸序列包括依次连接的标签载体氨基酸、猪肺炎支原体P46蛋白氨基酸、间隔蛋白氨基酸和猪肺炎支原体P36蛋白氨基酸。利用本发明所提供的重组蛋白能够作为包被抗原,进而建立一种操作简单、成本低、能有效鉴别阴阳性血清的间接ELISA检测方法,经检测该方法符合率高,且具有良好的特异性和重复性,为猪肺炎支原体的综合防治提供新思路和新方法。
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公开(公告)号:CN112877246A
公开(公告)日:2021-06-01
申请号:CN202110200360.6
申请日:2021-02-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种高效制备霍乱弧菌菌影的方法,包括:在霍乱弧菌工程菌的培养过程中加入阿拉伯糖进行诱导,诱导培养1~3h后,再次加入阿拉伯糖进行二次诱导:在诱导阶段,当检测到溶氧值突然下降时,添加卡那霉素,继续培养0.5~1.5h后活菌数目为0;诱导培养4~6h后,菌影形成率达到99%以上。本发明利用二次诱导策略,缩短诱导时间,收获菌影量提高了16%以上,且内毒素含量降低至初始工艺的1/5以下,显著提高了生产效率,降低生产成本;本发明制备的霍乱弧菌菌影形态均匀、完整,活菌数目为0,无需再进行灭活处理,安全性更高。
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公开(公告)号:CN111647055A
公开(公告)日:2020-09-11
申请号:CN202010602999.2
申请日:2020-06-29
Applicant: 清源生物(深圳)有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 中山大学附属第七医院(深圳) , 滨州医学院附属医院
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于免疫技术领域,具体涉及一种用于新型冠状病毒COVID-19检测的重组抗原及其制备与应用。用于检测COVID-19的重组抗原具体为一种截短的N蛋白,其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明提供的用于检测COVID-19的重组N蛋白为血清学检测COVID-19提供了一种新的选择,采用SEQ ID NO.1所示的截短N蛋白检测COVID-19具有敏感性高、特异性好,假阳性率明显降低等优点,其中,敏感性较全长N蛋白高出约60~100%,特异性达到98.57%,应用前景广泛。
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公开(公告)号:CN109355221B
公开(公告)日:2020-09-08
申请号:CN201811313599.9
申请日:2018-11-06
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种用于高密度发酵制备霍乱弧菌菌影的培养基及方法。其培养基组分包括:葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、柠檬酸、KCl、MgSO4·7H2O、(NH4)2SO4、甜菜碱、VB1、VH、氨苄霉素和氯化胆碱,其pH值为7.30~7.50。其方法是在培养过程中,加入国产阿拉伯糖进行诱导;诱导阶段,以一定的补加速率补加一定营养物质与抗生素进行诱导,菌影形成率达到99%以上。本发明可以实现大量生产霍乱弧菌菌影,能满足大规模生产霍乱弧菌菌影佐剂的需求。
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公开(公告)号:CN117965354B
公开(公告)日:2024-10-11
申请号:CN202410023192.1
申请日:2024-01-04
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 河南科技学院
IPC: C12N1/20 , A61K39/102 , A61P31/04 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供一种禽多杀性巴氏杆菌高密度发酵培养方法及培养基,通过在线活细胞检测系统实时监测禽多杀性巴氏杆菌生长情况,基于活细菌所带电荷,根据在线检测活细胞电容值准确掌握活菌浓度变化,精准确定葡萄糖及其他营养组分的补加时机和补加方式,并结合溶氧反馈,理性调控发酵过程,实现禽多杀性巴氏杆菌高密度发酵。本发明完成禽多杀性巴氏杆菌高密度发酵及产业化应用,细菌浓度及活菌数目分别是现用生产工艺的5.21倍、5.26倍。
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公开(公告)号:CN116239656B
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202310091251.4
申请日:2023-02-09
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院
Abstract: 本发明涉及发酵工程技术领域,具体涉及一种高效表达禽法氏囊病毒VP2蛋白的方法。方法为将表达菌株的种子液接种至发酵罐中,于32‑37℃下开始发酵,待发酵液OD600值≥3时,加入培养保护液,提高发酵温度至40‑42℃,开始升温诱导,直至发酵结束;培养保护液包括100g/L海藻糖和100g/L谷氨酸钠。本发明在升温诱导时添加培养保护液,可高效表达可溶性VP2蛋白,蛋白效价可得到3‑4倍的提高,且培养基成本低廉,发酵工艺简单易行,为工业化生产VP2疫苗奠定了坚实的基础。
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公开(公告)号:CN118006443A
公开(公告)日:2024-05-10
申请号:CN202410209083.9
申请日:2024-02-26
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 河南科技学院
Abstract: 本发明公开了一种生物疫苗生产发酵装置,具体涉及疫苗生产设备技术领域,包括罐体、旋转轴、安装部、旋转杆、转动柱、消泡针、平移单元,平移单元设于罐体内,且用于在旋转轴旋转时,驱动旋转杆在安装部上水平滑动。消泡针旋转半径尺寸为相邻两个转动柱间距尺寸的一半,使得平移单元在驱动旋转杆在安装部上水平运动,进而使得消泡针的消泡区域能够覆盖罐体蛋白原液的液面各处,减少消泡针的消泡盲区;驱动结构驱动驱动盘进行旋转,使得驱动盘上的偏心孔能够产生绕旋转轴轴向的旋转,进而使得旋转杆能够绕旋转轴进行旋转,同时也能产生水平运动,进而使得消泡针的消泡盲区较小,结构简单且无需设置电气控制设备,减少了制造成本。
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公开(公告)号:CN112877246B
公开(公告)日:2022-01-18
申请号:CN202110200360.6
申请日:2021-02-23
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 山东绿都生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种高效制备霍乱弧菌菌影的方法,包括:在霍乱弧菌工程菌的培养过程中加入阿拉伯糖进行诱导,诱导培养1~3h后,再次加入阿拉伯糖进行二次诱导:在诱导阶段,当检测到溶氧值突然下降时,添加卡那霉素,继续培养0.5~1.5h后活菌数目为0;诱导培养4~6h后,菌影形成率达到99%以上。本发明利用二次诱导策略,缩短诱导时间,收获菌影量提高了16%以上,且内毒素含量降低至初始工艺的1/5以下,显著提高了生产效率,降低生产成本;本发明制备的霍乱弧菌菌影形态均匀、完整,活菌数目为0,无需再进行灭活处理,安全性更高。
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公开(公告)号:CN111647055B
公开(公告)日:2021-07-06
申请号:CN202010602999.2
申请日:2020-06-29
Applicant: 清源生物(深圳)有限公司 , 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 中山大学附属第七医院(深圳) , 滨州医学院附属医院 , 深圳明德生物技术有限公司
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于免疫技术领域,具体涉及一种用于新型冠状病毒COVID‑19检测的重组抗原及其制备与应用。用于检测COVID‑19的重组抗原具体为一种截短的N蛋白,其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明提供的用于检测COVID‑19的重组N蛋白为血清学检测COVID‑19提供了一种新的选择,采用SEQ ID NO.1所示的截短N蛋白检测COVID‑19具有敏感性高、特异性好,假阳性率明显降低等优点,其中,敏感性较全长N蛋白高出约60~100%,特异性达到98.57%,应用前景广泛。
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公开(公告)号:CN120005927A
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202510151084.7
申请日:2025-02-11
Applicant: 山东省滨州畜牧兽医研究院 , 河南科技学院
Abstract: 本发明提供了一种高效表达猪链球菌广谱抗原GDH的方法,属于生物技术领域。本发明结合代谢工程原理与蛋白高效表达理论,通过宿主菌理性改造、培养基组分筛选、以及发酵过程调控,实现了具有免疫原性GDH蛋白的高效表达;在500 L发酵罐上,应用pH值及溶氧分阶段控制策略,结合溶氧反馈控制补料策略,乙酸积累量降低至2.48 g/L,细胞浓度为48.47(OD600),GDH蛋白表达水平为4.13 g/L,实现了GDH蛋白高效表达的工业化生产。本发明高效表达GDH蛋白以可溶性表达为主,且具有良好的免疫原性,以采用蜂胶作为佐剂,免疫保护率达到70%,可作为猪链球菌亚单位疫苗的有效抗原成分。
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