检测猪传染性胃肠炎病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN103627821B

    公开(公告)日:2015-04-29

    申请号:CN201310632188.7

    申请日:2013-11-29

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明公开一种检测猪传染性胃肠炎病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,易于大范围推广应用。

    检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN103602761A

    公开(公告)日:2014-02-26

    申请号:CN201310629121.8

    申请日:2013-11-29

    CPC classification number: C12Q1/70 C12Q1/6844 C12Q2531/119

    Abstract: 本发明公开一种检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、Probe杂交探针、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,易于大范围推广应用。

    一种检测布鲁菌的LAMP核酸试纸条试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN103276061A

    公开(公告)日:2013-09-04

    申请号:CN201310156085.8

    申请日:2013-04-28

    Abstract: 本发明公开一种检测布鲁菌的LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制LAMP反应体系,包含1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品DNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。

    抗口蹄疫病毒复制与感染的重组腺病毒及制备与应用

    公开(公告)号:CN102586198A

    公开(公告)日:2012-07-18

    申请号:CN201210016518.5

    申请日:2012-01-17

    Abstract: 本发明公开一种抗口蹄疫病毒复制与感染的重组腺病毒及其制备与应用。本发明通过将siRNA-3D的转录模板、siRNA-L的转录模板、siRNA-2B的转录模板与siRNA-VP1的转录模板分别与U6启动子连接,克隆入载体pAdeno-X,得到能分别转录、串联结构的质粒,再将该质粒线性化后通过包装细胞包装,得到重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1。该重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1的防治效果优于重组腺病毒rAdeno-2B-VP1应用的效果。可见,本发明提供的重组质粒能有效抑制口蹄疫病毒复制和抗口蹄疫病感染。

    一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法

    公开(公告)号:CN102399910A

    公开(公告)日:2012-04-04

    申请号:CN201110417367.X

    申请日:2011-12-13

    Abstract: 本发明公开一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法。引物如下:5’-AGTAGGACCC TATTGTAGATAA-3’和5’-AGTGCTGTT AAAAATGAGTG-3’。该引物特异性强,可在猪瘟病毒检测中进行应用。使用该引物的检测方法包含如下步骤:模板为猪样本的cDNA,利用前述引物,进行PCR反应,得到扩增产物;通过电泳检测扩增产物,做出如下判断:没有扩增产物,证明所检测的猪样本没有猪瘟病毒感染;扩增产物长度为154bp,证明所检测的猪样本为猪瘟病毒疫苗免疫猪;扩增产物长度不是154bp,初步证明所检测的猪样本为猪瘟病毒野毒感染猪。该方法特异性强、灵敏度高、样品预处理简单、重复性好、易于分析,且实用价值高,能有效将猪瘟病毒疫苗免疫猪与猪瘟病毒野毒感染猪进行区别。

    一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN102399909A

    公开(公告)日:2012-04-04

    申请号:CN201110416855.9

    申请日:2011-12-13

    Abstract: 本发明公开了一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用。该可视化试剂盒包含引物组和显色物质;引物为如SEQ ID NO:1~4所示的序列,显色物质为钙黄绿素和氯化锰。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、钙黄绿素、氯化锰、MgSO4、FIP引物、BIP引物组、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;接着将反应体系于61~65℃恒温反应,灭活;通过自然光照下或紫外光下判读结果或是二者结合判读:在自然光下反应产物为绿色,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒;在紫外光下反应产物呈现明显的绿色荧光,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒。

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