一种巨大芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段及其应用

    公开(公告)号:CN107119051A

    公开(公告)日:2017-09-01

    申请号:CN201710235664.X

    申请日:2017-04-12

    Abstract: 本发明公开了一种巨大芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段及其应用。该DNA片段为如下任一序列:(a)如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或者其互补序列;(b)对SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列进行一个或多个核苷酸取代、缺失或添加所获得的,具有与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列相同的作为启动子功能的核苷酸序列或者其互补序列;(c)对SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列添加一个或多个核糖体结合位点的序列。本发明的DNA片段具有启动子的功能,同时具有很强的表达活性,在不需要添加诱导物的条件下即能实现外源基因的高表达,可将其运用于耐热β‑半乳糖苷酶和转谷氨酰胺酶的表达,特别是为枯草芽孢杆菌表达分泌系统提供了有效的元件。

    一种枯草芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段及其应用

    公开(公告)号:CN106947766A

    公开(公告)日:2017-07-14

    申请号:CN201710235662.0

    申请日:2017-04-12

    Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌具有启动子功能的DNA片段及其应用。该DNA片段为如下任一序列:(a)如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列或者其互补序列;(b)对SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列进行一个或多个核苷酸取代、缺失或添加所获得的,具有与SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列相同的作为启动子功能的核苷酸序列或者其互补序列;(c)对SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列添加一个或多个核糖体结合位点的序列。本发明的DNA片段具有启动子的功能,同时具有很强的表达活性,在不需要添加诱导物的条件下即能实现外源基因的高表达,可将其运用于耐热β‑半乳糖苷酶和转谷氨酰胺酶的表达,特别是为枯草芽孢杆菌表达分泌系统提供了有效的元件。

    一种毕赤酵母高分泌菌株筛选系统及其使用方法

    公开(公告)号:CN119979363A

    公开(公告)日:2025-05-13

    申请号:CN202510452137.9

    申请日:2025-04-11

    Abstract: 本发明公开一种毕赤酵母高分泌菌株筛选系统及其使用方法。所述系统使用毕赤酵母作为宿主,系统核心结构为:AOX1启动子‑α‑factor信号肽‑目标蛋白‑P2A肽‑α‑factor信号肽‑Gamillus荧光蛋白‑G4S连接肽‑Gcw21锚定序列‑AOX1终止子。使用方法包括载体构建、酶切回收产物的转化、挑取克隆菌株与活化、发酵、诱导表达与筛选、产物收集步骤最终得到高产目标蛋白的菌株。本发明通过双顺反子设计、P2A肽自切割及细胞表面展示技术的整合,实现目标蛋白高分泌型菌株的高效筛选。

    一种基于特异性基因靶标lmo1341的单增李斯特菌的PCR检测方法

    公开(公告)号:CN110511987B

    公开(公告)日:2023-07-18

    申请号:CN201910804302.7

    申请日:2019-08-28

    Abstract: 本发明公开了一种基于特异性基因靶标lmo1341的单增李斯特菌的PCR检测方法。该方法包括:将待检测的样品进行增菌培养,得到增菌培养液;使用试剂盒法提取增菌培养液的基因组DNA,得到待检测的DNA提取液;将待检测的DNA提取液、所述检测单增李斯特菌的PCR引物与PCR反应物混合均匀,进行PCR反应,得到PCR反应产物;将PCR反应产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据电泳结果来判断样品是否含有单增李斯特菌。本发明基于以上引物建立了一种单增李斯特菌的PCR检测方法。本发明的检测方法具有特异性好、灵敏性高、检测速度快、成本低廉、操作简单的特点。

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