公开(公告)号：CN119899821A

公开(公告)日：2025-04-29

申请号：CN202510043319.0

申请日：2024-07-01

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 潘力 ,  刘钊远 ,  王斌

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12N15/75 ,  C12P7/6481 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开一种紫红链霉菌磷脂酶A2突变体及其应用，属于生物技术领域。本发明共获得了6个单位点突变的突变体及5个组合突变体；相较于野生型，突变体N21E，Q47K，F53H，Y68H，I84L，Q116M，N21E/I84L，Q47K/I84L，I84L/Q116M，N21E/I84L/Q116M和Q47K/I84L/Q116M的酶活力均有所提高，分别提升了32.3％，20.2％，27.9％，20.5％，69.7％，60.5％，106.6％，92.9％，213.2％，406.5％，304.3％。本发明获得的磷脂酶A2突变体酶活力得到显著提高，具有较大的工业应用潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN118726306A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410871496.3

申请日：2024-07-01

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 潘力 ,  刘钊远 ,  王斌

IPC: C12N9/18 ,  C12N15/55 ,  C12N15/75 ,  C12P7/6481

Abstract: 本发明公开一种紫红链霉菌磷脂酶A2突变体及其制备方法，属于生物技术领域。本发明共获得了6个单位点突变的突变体及5个组合突变体；相较于野生型，突变体N21E，Q47K，F53H，Y68H，I84L，Q116M，N21E/I84L，Q47K/I84L，I84L/Q116M，N21E/I84L/Q116M和Q47K/I84L/Q116M的酶活力均有所提高，分别提升了32.3％，20.2％，27.9％，20.5％，69.7％，60.5％，106.6％，92.9％，213.2％，406.5％，304.3％。本发明获得的磷脂酶A2突变体酶活力得到显著提高，具有较大的工业应用潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN117965416A

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202410143241.5

申请日：2024-02-01

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 潘力 ,  毕付提

IPC: C12N1/38 ,  C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/66 ,  C12R1/685 ,  C12R1/69 ,  C12R1/68 ,  C12R1/885

Abstract: 本发明公开一种适合重组丝状真菌高通量筛选的培养方法，涉及生物工程技术领域。本发明将带有自主复制序列的外源蛋白表达载体转化到丝状真菌新鲜原生质体中。在液体培养基中培养转化的原生质体，在抑制原生质体萌发的同时使外源蛋白基因瞬时表达，之后可以借助流式细胞仪等仪器高通量筛选转化子。本发明的方法可以明显缩短丝状真菌原生质体转化周期，简化操作流程，提高丝状真菌转化成功率和筛选效率，为构建工业丝状真菌微生物细胞工厂拓展了思路，并对其他丝状真菌理性高通量筛选具有重要参考价值。

公开(公告)号：CN117965327A

公开(公告)日：2024-05-03

申请号：CN202410150683.2

申请日：2024-02-02

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 王斌 ,  丁源 ,  潘力

IPC: C12N1/15 ,  C12N15/80 ,  C12N15/113 ,  C12N15/31 ,  C12N3/00 ,  C12R1/69

Abstract: 本发明公开一种液态产孢的米曲霉工程菌及其构建方法和应用，涉及基因工程技术领域。本发明主要包括通过木糖启动子、tet‑on启动子替换孢子发育转录因子BrlA启动子，改变其固体专一性表达为液体培养条件下表达，获得液体培养条件下产孢的米曲霉菌株；本发明构建的BrlA‑xyl菌株在木糖诱导下能够在液体培养基中产生大量分生孢子，可解决米曲霉在种曲培养阶段占地面积大，生产成本高，孢子乱飞容易污染的缺点，可用于发酵生产中；并发现在添加各种营养物质可直接影响孢子的萌发，相比在固体培养条件下对孢子发育机制研究方法更准确、快速。

公开(公告)号：CN113957071B

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202111161871.8

申请日：2021-09-30

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 潘力 ,  陈倩琳 ,  王斌 ,  辛青龙

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开一种具有双重启动子和双重分泌信号功能的组合DNA片段及其应用，属于基因工程技术领域。本发明采用双启动子双信号肽Pcd‑P43‑SamyQ‑SBsGGT表达系统在枯草芽孢杆菌中合成γ‑谷氨酰胺转肽酶，其效果显著较双启动子单信号肽Pcd‑P43‑SamyQ表达系统的单位酶活力提高至161.45％，而Pcd‑P43‑SBsGGT‑SamyQ表达效果微弱。不需要添加诱导剂进行蛋白的诱导表达，为枯草芽孢杆菌表达外源基因提供了有效的元件；不仅能够简化生产工艺流程，降低生产成本，同时能使制备的蛋白酶产品达到符合食品安全级别酶制剂的要求。

公开(公告)号：CN110184260B

公开(公告)日：2021-08-10

申请号：CN201910582254.1

申请日：2019-06-30

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 潘力 ,  林晓彤 ,  王斌

IPC: C12N9/48 ,  C12N15/57 ,  C12N15/80 ,  C12N1/15 ,  C12P21/06 ,  C12R1/685

Abstract: 本发明公开了一种经优化的耐热亮氨酸氨肽酶Thelap及其编码基因与应用。所述经优化的耐热亮氨酸氨肽酶Thelap氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述经优化的耐热亮氨酸氨肽酶Thelap的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明构建的耐热亮氨酸氨肽酶Thelap重组菌株可以高产目的耐热亮氨酸氨肽酶。本发明提供的亮氨酸氨肽酶稳定性好，在高温碱性条件下也能从多肽链的N端顺序水解氨基酸，使氨基酸游离出来，对蛋白水解液具有很好的脱苦作用。因此本发明对实现氨肽酶的高效表达甚至工业化生产和食品加工业具有一定的现实意义和应用价值。

公开(公告)号：CN112730388A

公开(公告)日：2021-04-30

申请号：CN202011533189.2

申请日：2020-12-22

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 王斌 ,  陈书容 ,  潘力

IPC: G01N21/76 ,  G01N1/38

Abstract: 本发明公开一种基于明亮发光杆菌快速检测玉米赤霉烯酮生物毒性的方法，涉及玉米赤霉烯酮生物毒性检测领域。该方法使用明亮发光杆菌冻干粉作为检验玉米赤霉烯酮生物毒性的受试生物。本方法中，在室温下，不同浓度玉米赤霉烯酮与明亮发光杆菌接触后，随着玉米赤霉烯酮浓度升高，明亮发光杆菌相对发光强度减弱。表明玉米赤霉烯酮浓度越高，对明亮发光杆菌发光抑制性越强，即玉米赤霉烯酮浓度越高对明亮发光杆菌的生物毒性作用越强。本发明的检测结果完全能够满足对玉米赤霉烯酮残留检测，该方法前处理简单、反应快、检测灵敏、操作简便、成本低，可对玉米赤霉烯酮生物毒性实现快速检测。因此，本发明提供的方法适于规模化工业生产及应用。

公开(公告)号：CN109957576A

公开(公告)日：2019-07-02

申请号：CN201910225983.1

申请日：2019-03-25

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 潘力 ,  黄良刚 ,  董宏智 ,  郑俊威 ,  王斌

IPC: C12N15/80 ,  C12N1/15 ,  C12R1/685

Abstract: 本发明公开了一种能实现碱基精确点突变的pFC330‑BEC质粒及其应用。所述pFC330‑BEC质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，其包含能够在黑曲霉中表达的rAPOBEC1‑XTEN‑nCas9‑UGI融合基因片段、大肠杆菌抗性基因片段AmpR、pyrG筛选标记、丝状真菌自主复制序列AMA1、启动子Ptef以及质粒复制原点ori。所述质粒能够高效并且快速地将丝状真菌基因组上的任意位点的胞嘧啶突变成胸腺嘧啶，能够实现氨基酸的突变或基因的失活。所述质粒在丝状真菌的分子育种、生理特性、代谢产物、宿主改造、工业生产等方面具有广阔的应用前景，能为丝状真菌基因工程改造提供了新的技术平台。

公开(公告)号：CN103361339B

公开(公告)日：2015-07-01

申请号：CN201310326924.6

申请日：2013-07-30

Applicant: 华南理工大学

Inventor： 潘力 ,  周斌 ,  何攀 ,  吕扬勇

IPC: C12N15/10 ,  C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/69

Abstract: 本发明公开了一种提取丝状真菌基因组DNA的方法及试剂盒和遗传转化子的快速筛选方法，该试剂盒包括电动研磨器、溶液A(裂解液)、溶液B（DNA结合液）、溶液C（DNA洗涤液）、溶液D（DNA洗脱液）和DNA吸附柱。该发明的丝状真菌基因组DNA提取方法，耗时短（30min以内），提取的基因组质量高，不会用到有毒的试剂苯酚、氯仿，能很好的满足后续的实验。本发明快速筛选丝状真菌遗传转化子的方法克服了传统转化子筛选方法耗时、耗力、筛选效率低等缺点，特别适合大规模筛选遗传转化子。

公开(公告)号：CN104232674A

公开(公告)日：2014-12-24

申请号：CN201410336004.7

申请日：2014-07-15

Applicant: 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司 ,  华南理工大学

Inventor： 廖瑜玲 ,  谢畅丰 ,  李红 ,  潘力 ,  谢清华

IPC: C12N15/75 ,  C12N1/21 ,  C12P19/40 ,  C12R1/07

Abstract: 本发明公开了一种提高解淀粉芽孢杆菌生产鸟苷产量的方法，该方法以温敏型质粒pKS2为载体，通过同源重组的方法去除嘌呤操纵子(purEKBCSQLFMNHD)的启动子部分片段，其优选序列片段是缺失purE基因前-193～-29bp片段，缺失该片段后的菌株解除了purR(嘌呤操纵子的阻遏蛋白)的阻遏效应和该段片段的回文结构带来的转录衰减作用。purF编码磷酸核糖焦磷酸(PRRR)转酰胺酶基因通过点突变脱敏，其优选是217亮氨酸突变为异亮氨酸(L217I)，其所受产物腺苷酸，鸟苷酸的反馈抑制被解除。经过改造后的基因工程菌鸟苷生产能力明显提高。