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公开(公告)号：CN111454986A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010287373.7
申请日：2020-04-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种梨遗传转化方法，该方法包括以下步骤：(1)播种与育苗；(2)挑取含有目的基因的发根农杆菌菌株在液体培养基中振荡培养得到侵染液，将侵染液注射至梨苗距根部1～3cm的位置，然后将梨苗用脱脂棉沾取侵染液包裹伤口继续培养；(3)经过筛选及鉴定获得转化成功的阳性植株。本发明通过直接侵染实生梨苗的方法，成功实现了外源基因在梨中的表达，该方法克服了梨遗传背景复杂、童期长、缺乏高效稳定的遗传转化方法等困难，操作简便，转化率高，周期较短，为梨树基因功能研究和遗传改良提供了新型工具，为提高梨树遗传转化成功率奠定了基础。
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公开(公告)号：CN109797157A
公开(公告)日：2019-05-24
申请号：CN201811174607.6
申请日：2018-10-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种抗非生物逆境转录因子PbrbHLH92，属于植物基因工程技术领域，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明从杜梨中筛选到一种能够提高植物抗非生物逆境能力的转录因子PbrbHLH92，其编码的蛋白质属于核蛋白。试验表明，本发明提供的抗非生物逆境转录因子PbrbHLH92在植物抗旱、抗盐胁迫能力中起到重要作用，并且能够提高植物对于脱落酸的敏感性，在多种非生物逆境对抗中具有重要作用。本发明将所述抗非生物逆境转录因子PbrbHLH92转入到烟草或杜梨中，所得的转基因植物与野生株相比能够有效增强转基因植株的活性氧清除能力，有效提高了转基因烟草的抗旱性能。
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公开(公告)号：CN108165539A
公开(公告)日：2018-06-15
申请号：CN201711323194.9
申请日：2017-12-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公布了一种梨S7‑RNase蛋白的体外表达及其多克隆抗体的制备方法。通过设计引物克隆梨S7‑RNase基因；构建大肠杆菌重组表达载体S7‑cutSignalP‑pCold‑TF；将构建的重组表达载体S7‑cutSignalP‑pCold‑TF转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中，构建表达梨S7‑RNase蛋白的重组菌株；对重组菌株进行表达，并用镍柱亲和层析发纯化重组梨S7‑RNase蛋白；以纯化的重组梨S7‑RNase蛋白为抗原，采用常规多克隆抗体制备方法制备梨S7‑RNase多克隆抗体。通过本发明的方法，实现了梨S7‑RNase蛋白的体外表达并制备出了效价高、特异性好的梨S7‑RNase多克隆抗体，完全可以满足相关实验的需求。
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公开(公告)号：CN104351004A
公开(公告)日：2015-02-18
申请号：CN201410688028.9
申请日：2014-11-25
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: A01G17/005 , A01C21/00 , A01G7/06
Abstract: 本发明属于果树栽培技术领域，公开了一种同时提高梨果实中锌和硒含量的方法。本发明是用细铁丝将棉球绑到果柄处，将含50mg/L亚硒酸钠和0.6％(W/V)七水硫酸锌的溶液喷施到棉球上，直至滴溶液为止，连续处理三次，分别于幼果膨大期、果实膨大期和果实采收前一个月左右处理，成熟期常规采收。用本发明所述的方法处理后的梨果实中锌和硒含量显著增加，果实商品性显著提高。该方法具有实用、简单操作等特点。
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公开(公告)号：CN102660141B
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201210161699.0
申请日：2012-05-22
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物有效成分提取领域，公开了一种从果实表皮中提取花色素苷的方法。本发明利用超声波具有助溶的作用，取果实表皮，液氮研磨至粉末，加入1%盐酸甲醇提取液匀浆，低温避光浸提，再放入超声仪器中超声辅助提取。本发明简单、方便、快速，能够有效提取果实中花色素苷，并且该过程一直在低温下进行，有利于保持花色素苷的稳定性。因此，利用超声波助溶，可以快速、高效提取果实中花色素苷。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102676474A
公开(公告)日：2012-09-19
申请号：CN201210178966.5
申请日：2012-06-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物生理学领域，涉及一种提取梨果实蔗糖转化酶及其活性测定方法。本发明通过在蔗糖转化酶提取过程中增加盐析和透析步骤，常能够将初提取酶液中的糖分和离子等小分子物质除去，从而更能够精确地测定果实中转化酶的活性，为揭示果实内糖分的积累差异提供生理基础，进一步为果实甜度风味品质的改良提供理论依据。
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公开(公告)号：CN115615785A
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202211079148.X
申请日：2022-09-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用预换液技术提高梨花粉管细胞壁甲酯化果胶染色效果的方法，该方法包括采集花粉、花粉的体外培养、使用预换液技术对花粉进行固定和封闭、抗体孵育、观察及测定等步骤。该方法不涉及传统的染料与多糖共价结合的技术，而是使用预换液技术及抗体——抗原特异结合的原理对梨花粉管细胞壁甲酯化果胶进行染色，具有安全高效、特异性强、破损率低、易于观察等优点。该方法对梨花粉管的甲酯化果胶的检测，有助于梨花粉生活力的测定以及对花粉管生长代谢等生殖生理过程的研究，同时也为其他植物组织或花粉管甲酯化果胶染色提供方法参考。
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公开(公告)号：CN115428730A
公开(公告)日：2022-12-06
申请号：CN202211207419.5
申请日：2022-09-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H1/02
Abstract: 本发明公开了一种利用山奈酚提高果树自花结实率的方法，该方法为在进行梨属等蔷薇科植物果树自交授粉前先采用含有山奈酚的花粉培养基溶液处理花蕾的柱头。果树自交不亲和植株花蕾进入始花期，在柱头上喷洒山奈酚溶液，能不同程度地提高自交亲和性。田间实验结果表明，喷施山奈酚之后，梨自交不亲和系的坐果率由原来的4％提高到18％，花粉管的长度是原来的2倍。本发明的方法适用于梨属等蔷薇科植物自交不亲和系，能有效地提高梨属等蔷薇科植物自交亲和性。
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公开(公告)号：CN112461632B
公开(公告)日：2022-05-27
申请号：CN202011370534.5
申请日：2020-11-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种从梨花粉管中提取纤维素的方法。该方法通过体外培养花粉，对花粉管纤维素的粗提取、有机试剂对纤维素的纯化、蒽酮比色法测定纤维素含量定。通过本发明的方法，对于研究花粉管的生长、花粉管细胞壁组成成分含量、细胞骨架、纤维素合成酶的翻译后修饰、转录因子调控、外界环境因素及激素等方面的因素影响下花粉管细胞壁纤维素对应含量变化具有重要意义。同时本发明中所涉及到的花粉管提取纤维素的方法可用于其他蔷薇科植物，其他不同品种可以借鉴使用。
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公开(公告)号：CN111996197B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202010783793.4
申请日：2020-08-06
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种杜梨耐盐基因、蛋白及重组载体和应用，涉及基因工程技术领域。本发明所述耐盐基因PbbHLH67的序列如SEQ ID NO.1所示。本发明将该基因构建超表达载体和沉默载体，通过农杆菌介导的遗传转化分别使其在拟南芥中稳定遗传和在杜梨中瞬时转化表达，对获得的阳性植株苗进行耐盐功能验证。结果显示，PbbHLH67基因能够有效的增加植株的耐盐性。该基因的发现，为植物抗逆分子育种提供了新的基因资源，为我国乃至世界盐碱地植物培育提供参考，有利于提高我国盐碱地利用率。
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