一种金属结合多肽标签的溶血素作为生物信号标记物超灵敏诊断病原微生物

    公开(公告)号:CN108562742A

    公开(公告)日:2018-09-21

    申请号:CN201810313597.3

    申请日:2018-04-10

    Applicant: 海南大学

    Inventor: 万逸 宋凤阁 黄帅

    Abstract: 海洋病害微生物是影响国民经济建设的重要因素之一,开展病害微生物检测和控制研究对国民经济建设有重大意义。本工作拟研发了一种基于金属结合多肽标签的溶血素组装纳米孔的纳米传感器超灵敏诊断病原微生物。项目主要内容为:重点设计金属结合多肽标签的溶血素与检测探针分子在纳米金表面识别机制和反应动力学,考察pA电流计在微生物快速检测和微生物即时表达分析中作用规律。本工作创新性体现在:利用金属结合多肽标签的溶血素组装纳米孔作为信号发生器在分子水平上检测微生物,特别为解决涉及微生物检测方法中“便携式”和“全自动”问题提供参考和借鉴。

    一种分子探针功能化丙酮酸激酶的纳米传感器快速检测微生物

    公开(公告)号:CN108195811A

    公开(公告)日:2018-06-22

    申请号:CN201810032114.2

    申请日:2018-01-12

    Applicant: 海南大学

    Inventor: 万逸 宋凤阁 刘红

    Abstract: 海洋病害微生物是影响国民经济建设的重要因素之一,开展病害微生物检测和控制研究对国民经济建设有重大意义。本工作拟研发了一种基于分子探针功能化丙酮酸激酶的纳米传感器结合ATP荧光仪快速超灵敏诊断病原微生物。项目主要内容为:重点设计分子探针功能化丙酮酸激酶与微生物靶点识别机制和反应动力学,考察ATP荧光仪在微生物快速检测和微生物即时表达分析中作用规律。本工作创新性体现在:利用分子探针功能化丙酮酸激酶在分子水平上检测微生物,特别为解决涉及微生物检测方法中“便携式”和“全自动”问题提供参考和借鉴。

    一种高效稳定的细菌总RNA提取方法

    公开(公告)号:CN108034653A

    公开(公告)日:2018-05-15

    申请号:CN201810028845.X

    申请日:2018-04-07

    Applicant: 海南大学

    Inventor: 万逸 刘红 黄帅

    Abstract: RNA是生物体内重要的遗传物质,RNA的提取是分子生物学研究的基础,在进行对于cDNA文库构建、体外反转录、实时荧光定量PCR,Nothem杂交分析等下游分子生物学实验时都需要质量好的,完整性高的RNA。项目主要内容为:提供了一种高效的细菌细胞壁破碎方法,细胞破碎更加完全,更利于RNA溶出而得到较高质量的可直接用于下游分子生物学实验的总RNA。此方具有广泛的适用性,由其是对于革兰氏阳性菌,与其他方法相比,此方法能使提取的RNA浓度提高4~5倍。工作创新体现在:处理细菌时将Tissue Cell‑Destroyer DS1000、溶菌酶和玻璃珠结合在一起,使细菌细胞壁能够得到良好的破碎效果,Tissue Cell‑Destroyer DS1000的使用使RNA的提取效果大大提高。

    一种用于CRISPR试纸条的拱桥型探针制备方法

    公开(公告)号:CN119913236A

    公开(公告)日:2025-05-02

    申请号:CN202510013452.1

    申请日:2025-01-06

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于CRISPR试纸条的拱桥型探针制备方法,涉及免疫检测分析技术领域,拱桥型核酸探针可广泛应用于CRISPR驱动的试纸中,相较于传统试纸,具有核酸序列易于合成、化学及储存稳定性更高、检测特异性强、避免抗原抗体修饰成本低廉等优点,同时为CRISPR驱动的试纸信号释放提供新的设计思路,对免疫检测分析技术领域具有重要意义。

    一种基于荧光纳米金刚石的沙门氏菌高灵敏传感检测方法

    公开(公告)号:CN119246475A

    公开(公告)日:2025-01-03

    申请号:CN202411378220.8

    申请日:2024-09-30

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明提供了一种沙门氏菌检测的侧向层析试纸条及其检测方法,属于食品安全诊断领域。本发明所述荧光纳米金刚石为含氮空位色心的纳米金刚石,在540nm激发光下,可激发670nm附近红色荧光,同时,荧光纳米金刚石通过微波调控可以改变内部的量子自旋,滤除背景荧光,从而提高检测限;本发明所述试纸条可以在较低浓度的实际样本中,通过Cas12特异性靶向激活机制获得第一次信号放大,接着通过荧光纳米金刚石的荧光信号进行第二次放大,实现对沙门氏菌的快速高灵敏检测。本发明的意义在于通过更换标记材料改变信号输出方式,提升试纸条灵敏度,Cas12酶具有精确的核酸靶向和切割功能,能对非靶标核酸进行切割,将检测信号进一步放大,提高检测特异性、灵敏度,而且荧光信号的快速、直观读取使其可用于现场检测,满足及时快速的诊断需求,在食品安全诊断领域具有重要的应用潜力与经济价值。

    一种用于多种微生物相互作用的实时分析系统

    公开(公告)号:CN119198651A

    公开(公告)日:2024-12-27

    申请号:CN202410034295.8

    申请日:2024-01-10

    Abstract: 本发明公开了一种用于多种微生物相互作用的实时分析系统,包括包括壳体,以及设置在壳体内的连接板,上盖,控制主板,样本移动装置,载样装置,温控装置,荧光检测装置与型固定架,属于微生物检测领域。连接板,荧光检测装置,温控装置均与控制主板相连。外部计算机可通过有线连接到连接板访问系统获取检测数据;荧光检测装置用于在控制主板的控制下进行微生物样本的荧光检测;样本移动装置用于在控制主板的控制下实现微生物样本荧光检测的精确定位;温控装置用于在控制主板的控制下提供适合微生物孵化环境。实现两种或者三种不同荧光蛋白基因标记的微生物的相互作用研究。本发明自动化程度高,可以用于实时在线地检测多种微生物,分析微生物之间“种间共处”、“互生”、“共生”、“拮抗”、“竞争”、“寄生”和“捕食”等的种间关系,提高了检测效率。

    一种海水鱼神经坏死病毒可视化RT-LAMP检测体系

    公开(公告)号:CN118813870A

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202311455726.X

    申请日:2023-11-03

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明提供了一种利用RTX逆转录酶和Bst DNA聚合酶的RT‑LAMP可视化检测石斑鱼神经坏死病毒的体系,包括一下步骤:1)提取石斑鱼神经坏死病毒RNA;2)设计并合成特异性引物;3)对钙黄绿素和MnCl2浓度比进行优化;4)对反应体系特异性和灵敏度进行分析。本发明利用RTX逆转录酶和Bst DNA聚合酶直接进行RNA病毒检测,并利用钙黄绿素显示指示剂使检测结果可视化,可肉眼观察检测结果,具有操作简单、快速、准确、高灵敏度等特点,对于资源匮乏地区疫情监控具有很大潜力。

    一种可与磁珠结合的病毒RNA快速提取的裂解液

    公开(公告)号:CN118813601A

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202311465918.9

    申请日:2023-11-07

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明提供一种可与磁珠结合的病毒RNA快速提取的裂解液,该裂解液成分简单,原料廉价易得,可快速高效裂解病毒组织,并释放出RNA。该裂解液与二氧化硅磁珠联用,可快速完成病毒RNA抽提;避免使用苯酚、氯仿的等对人体有危害的有机溶剂;操作简单、无需离心设备。其提取质量与商业试剂盒相当,可直接用于后续RNA扩增和检测,适用于实验室或现场病毒快速检测。

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