一种分子探针功能化丙酮酸激酶的纳米传感器快速检测微生物

    公开(公告)号:CN108195811A

    公开(公告)日:2018-06-22

    申请号:CN201810032114.2

    申请日:2018-01-12

    Applicant: 海南大学

    Inventor: 万逸 宋凤阁 刘红

    Abstract: 海洋病害微生物是影响国民经济建设的重要因素之一,开展病害微生物检测和控制研究对国民经济建设有重大意义。本工作拟研发了一种基于分子探针功能化丙酮酸激酶的纳米传感器结合ATP荧光仪快速超灵敏诊断病原微生物。项目主要内容为:重点设计分子探针功能化丙酮酸激酶与微生物靶点识别机制和反应动力学,考察ATP荧光仪在微生物快速检测和微生物即时表达分析中作用规律。本工作创新性体现在:利用分子探针功能化丙酮酸激酶在分子水平上检测微生物,特别为解决涉及微生物检测方法中“便携式”和“全自动”问题提供参考和借鉴。

    一种高效稳定的细菌总RNA提取方法

    公开(公告)号:CN108034653A

    公开(公告)日:2018-05-15

    申请号:CN201810028845.X

    申请日:2018-04-07

    Applicant: 海南大学

    Inventor: 万逸 刘红 黄帅

    Abstract: RNA是生物体内重要的遗传物质,RNA的提取是分子生物学研究的基础,在进行对于cDNA文库构建、体外反转录、实时荧光定量PCR,Nothem杂交分析等下游分子生物学实验时都需要质量好的,完整性高的RNA。项目主要内容为:提供了一种高效的细菌细胞壁破碎方法,细胞破碎更加完全,更利于RNA溶出而得到较高质量的可直接用于下游分子生物学实验的总RNA。此方具有广泛的适用性,由其是对于革兰氏阳性菌,与其他方法相比,此方法能使提取的RNA浓度提高4~5倍。工作创新体现在:处理细菌时将Tissue Cell‑Destroyer DS1000、溶菌酶和玻璃珠结合在一起,使细菌细胞壁能够得到良好的破碎效果,Tissue Cell‑Destroyer DS1000的使用使RNA的提取效果大大提高。

    一种基于试纸条的Cas12a酶的微生物快速诊断技术

    公开(公告)号:CN110684823A

    公开(公告)日:2020-01-14

    申请号:CN201911013853.8

    申请日:2019-10-23

    Applicant: 海南大学

    Inventor: 万逸 刘红 葛晓林

    Abstract: 将Cas12a检测系统与胶体金快速诊断试纸条技术结合,首先通过PCR或恒温扩增技术实现目的片段的扩增,然后进行Cas12a检测反应,最后试纸条判读结果。此结合意义在于不需要特异性标记引物,避免扩增产物稀释和探针杂交等流程,试纸条可以实现多种微生物的检测,扩大了试纸条的适用性。将Cas12a检测系统的广泛性、稳定性、特异性、灵敏性与试纸条检测的直观、快速、方便性结合,为现场检测提供最佳检测法,利于及时诊断,在核酸分子诊断领域具有重要的应用潜力。

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