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公开(公告)号:CN118344492A
公开(公告)日:2024-07-16
申请号:CN202410557290.3
申请日:2024-05-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种纳米荧光素酶融合抗原在非洲猪瘟病毒抗体检测中的应用。所述融合抗原由纳米荧光素酶的两个亚基LgBiT和SmBiT分别与非洲猪瘟病毒p30蛋白融合表达的LgBiT‑p30和SmBiT‑p30蛋白组成。所述融合抗原能够与针对非洲猪瘟病毒p30蛋白的特异性抗体结合,形成功能性的荧光素酶,与底物发生反应产生明亮的发光信号。所述融合抗原在非洲猪瘟病毒抗体检测中具备较高的特异性和敏感性,使得抗体的检测过程更加高效和快速。本发明实现了对非洲猪瘟病毒抗体简单、快速、敏感和特异的检测,为非洲猪瘟血清学诊断提供了一种创新而可靠的解决方案。
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公开(公告)号:CN118344474A
公开(公告)日:2024-07-16
申请号:CN202410667691.4
申请日:2024-05-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了口蹄疫病毒O型、A型和Asia1型广谱中和性猪源单克隆抗体pOA‑6、pOA‑13和pOA‑20。pOA‑6重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示;pOA‑13的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列分别如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示;pOA‑20的重链可变区和轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。本发明首次获得3株自然宿主源O型、A型和Asia1型FMDV广谱中和抗体,并鉴定其识别的关键抗原位点,为FMDV抗体药物开发和血清学检测方法建立提供了有力工具。
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公开(公告)号:CN118308451A
公开(公告)日:2024-07-09
申请号:CN202410531923.3
申请日:2024-04-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及猪RPS11蛋白在制备抑制口蹄疫病毒感染和复制药物中的应用。本发明首先发现,过表达宿主RPS11基因,能够抑制口蹄疫病毒的感染和复制,即RPS11可作为靶点用于筛选抑制口蹄疫病毒感染和复制的药物;本发明还提供了一种口蹄疫病毒的抑制细胞系和相应的制备方法,获得稳定过表达RPS11基因的细胞系,可用于制备抗口蹄疫病毒感染的细胞或动物模型,在临床、实验室研究上具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN118291398A
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202410578709.3
申请日:2024-05-11
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种缺失三个基因的减毒非洲猪瘟病毒株及作为疫苗的应用。本发明在ASFV‑CN/GS‑2018病毒中联合缺失MGF‑300‑1L基因、MGF‑300‑2R基因和MGF‑300‑4L基因、共计3个基因,降低了亲本毒株的毒性,获得了一株减毒非洲猪瘟疫苗株;所述减毒非洲猪瘟疫苗株免疫猪后对猪致弱、免疫后存活的猪能够对ASFV CN/GS/2018强毒株攻毒提供良好的免疫保护,可作为安全有效的防控非洲猪瘟疫情的候选疫苗,具有极大的社会价值。
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公开(公告)号:CN118255903A
公开(公告)日:2024-06-28
申请号:CN202410557272.5
申请日:2024-05-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒抗体的融合抗原、制备方法及检测试剂盒。所述融合抗原由纳米荧光素酶的两个亚基LgBiT和SmBiT分别与非洲猪瘟病毒p30蛋白和Protein G的C2结构域融合表达的SmBiT/p30和LgBiT/C2组成。所述融合抗原能够与针对非洲猪瘟病毒p30蛋白的特异性抗体结合,形成功能性的荧光素酶,在底物的催化作用下发光。本发明利用纳米荧光素酶亚基结构互补形成功能性荧光素酶的原理,将其用于非洲猪瘟病毒抗体的检测具备较高的特异性和敏感性,并可在较短的时间内完成抗体的检测,为非洲猪瘟的防控和净化提供了技术手段。
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公开(公告)号:CN118255877A
公开(公告)日:2024-06-28
申请号:CN202410410387.1
申请日:2024-04-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明属于免疫学技术领域,具体涉及一种抗猪流行性腹泻病毒S1蛋白的单克隆抗体及应用。所述的单克隆抗体重链可变区的CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的CDR1、氨基酸序列如SEQ ID No.2所示的CDR2和氨基酸序列如SEQ ID No.3所示的CDR3;轻链可变区CDR包括氨基酸序列如SEQ ID No.4所示的CDR1、氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的CDR2和氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的CDR3。可以利用常规基因工程或蛋白质工程的方法获得,避免了杂交瘤细胞长期冻存抗体丢失,同样也有利于抗体在基因和蛋白水平上进行优化,进而提高抗体的特异性和亲和力。
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公开(公告)号:CN117964778A
公开(公告)日:2024-05-03
申请号:CN202410066560.0
申请日:2024-01-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N9/88 , C12N15/81 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , A61K39/12 , A61K39/385 , A61P31/20 , C07K16/08 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)P14.5蛋白纳米颗粒及其制备方法和应用。所述蛋白纳米颗粒由蛋白质单体自组装形成,所述蛋白质单体由非洲猪瘟病毒P14.5蛋白和骨架蛋白通过连接肽连接后得到。所述骨架蛋白为mi3,其编码核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示,所述P14.5蛋白的编码核苷酸序列为SEQ ID NO:2所示。本发明利用蛋白骨架的自组装特性以及N端的可修饰性,将ASFV P14.5结构蛋白展示在蛋白骨架的外表面,获得了具有较高免疫效力及较高稳定性的非洲猪瘟纳米颗粒抗原,可用于制备抗ASFV特异性抗体或预防或治疗由ASFV感染引起的疾病的药物。本发明的提出为非洲猪瘟病毒的防控提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN117624346A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202410069095.6
申请日:2024-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , G01N33/58 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及一种抗猪流行性腹泻病毒N蛋白的特异性单克隆抗体及用途。首先,本发明获得了一种与猪流行性腹泻病毒N蛋白特异性反应的单克隆抗体6C12;其次,本申请以抗猪流行性腹泻病毒N蛋白兔多抗为捕获抗体,以HRP标记的6C12单抗作为检测抗体,建立了一种基于多抗和特异性单抗检测猪流行性腹泻病毒的双抗体夹心ELISA方法;所述方法可用于猪流行性腹泻病毒抗原水平监测,替代现有RT‑PCR和胶体金试纸条抗原检测方法,具有高特异性,高灵敏度;相比RT‑PCR法,本发明操作简单,不需要实验室支持,且缩短检测时间;相比胶体金试纸条检测,本发明成本低,且可以进行大批量抗原检测。
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公开(公告)号:CN120041481A
公开(公告)日:2025-05-27
申请号:CN202510187038.2
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种利用毕赤酵母表达系统生产口蹄疫病毒样颗粒疫苗的方法及其产品和应用。所述的方法是通过将优化后的P1基因和优化后的3C蛋白酶的表达盒构建在同一个质粒上,然后在毕赤酵母里面进行诱导表达,最后通过组装、纯化后得到的。本发明通过在P1基因引入N1017D和H2145Y突变,提高了VLPs的耐酸性。同时,为了提高3C蛋白酶在毕赤酵母细胞中的切割效率,对3C蛋白酶基因进行了改良,提高了其对P1蛋白的切割功能,成功利用毕赤酵母表达系统制备了VLPs。本发明的提出为口蹄疫病毒样颗粒的制备提供了新的方法,相比其他真核表达系统更有优势,且解决了毕赤酵母系统中3C蛋白酶的影响问题,有利于将来的工业化生产。
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公开(公告)号:CN119979606A
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202510187991.7
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种L蛋白突变的重组口蹄疫病毒株及在疫苗制备中的应用,属于生物医药技术领域。本发明首先发现在宿主细胞中过表达CISD2蛋白会抑制FMDV的复制,并且解析了抑制机制,具体包括CISD2通过抑制L蛋白的表达,尤其是通过蛋白酶体途径引起L蛋白的降解,进而抑制FMDV复制。本发明还鉴定出了CISD2蛋白降解L蛋白的关键位点,利用反向遗传技术,通过在L蛋白中引入关键位点氨基酸突变,成功构建并拯救得到L蛋白关键氨基酸位点突变的重组口蹄疫病毒,消除了CISD2蛋白降解L蛋白及抑制FMDV复制的能力,提升了病毒滴度,具有良好的生产性能,可用于制备重组口蹄疫病毒株及重组疫苗株。
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