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公开(公告)号：CN120041481A
公开(公告)日：2025-05-27
申请号：CN202510187038.2
申请日：2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种利用毕赤酵母表达系统生产口蹄疫病毒样颗粒疫苗的方法及其产品和应用。所述的方法是通过将优化后的P1基因和优化后的3C蛋白酶的表达盒构建在同一个质粒上，然后在毕赤酵母里面进行诱导表达，最后通过组装、纯化后得到的。本发明通过在P1基因引入N1017D和H2145Y突变，提高了VLPs的耐酸性。同时，为了提高3C蛋白酶在毕赤酵母细胞中的切割效率，对3C蛋白酶基因进行了改良，提高了其对P1蛋白的切割功能，成功利用毕赤酵母表达系统制备了VLPs。本发明的提出为口蹄疫病毒样颗粒的制备提供了新的方法，相比其他真核表达系统更有优势，且解决了毕赤酵母系统中3C蛋白酶的影响问题，有利于将来的工业化生产。
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公开(公告)号：CN119959545A
公开(公告)日：2025-05-09
申请号：CN202510018411.1
申请日：2025-01-06
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提出了一种用于筛查口蹄疫病毒持续感染牛的标志物、试剂盒及其应用，属于病毒免疫学检测技术领域。所述的标志物由牛外周血中的CD21+B细胞和牛口咽液中的IgA组成。在口蹄疫病毒感染28天后同时检测牛外周血中的CD21+B细胞数量和口咽液中的IgA的水平，FMDV持续感染牛外周血中的CD21+B细胞比例显著低于康复牛外周血中的CD21+B细胞比例，同时FMDV持续感染牛OPF中IgA的水平显著高于康复牛OPF中IgA的水平，从而可以更有效的筛查出FMDV持续感染的牛。ROC分析结果显示，在35dpc时，AUC为1.000(95％置信区间，0.782‑1.000)，诊断的敏感性和特异性均达到了100％。因此，本发明的提出为筛查FMDV持续感染牛提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN119552821A
公开(公告)日：2025-03-04
申请号：CN202411690015.5
申请日：2024-11-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C07K14/09 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫假病毒细胞培养系统及其应用。本发明属于生物技术领域。本发明提供的一种细胞培养系统，可用于生产具有转录和复制能力的口蹄疫假病毒(FMDV‑trVLPs)，但其不具有活病毒的感染性。该系统由Nluc替换了FMDV衣壳蛋白基因(P1)的亚基因组复制子(FMDV‑Nluc)和稳定整合FMDV P12A3C基因的BHK‑21细胞系(BHK‑P1)组成。当FMDV‑Nluc复制子转染进BHK‑P1细胞后，可生产出口蹄疫假病毒FMDV‑trVLPs，并能在BHK‑P1细胞内增殖和传代，有效实现生物安全降级，在降低生物安全风险、模拟FMDV活病毒研究方面具有巨大潜力与实用价值。
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公开(公告)号：CN117990904A
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202410166120.2
申请日：2024-02-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/536 , G01N33/532 , C07K16/10
Abstract: 本发明公开了一种用于A型口蹄疫病毒中和抗体检测的液相阻断ELISA试剂盒及其应用。所述的液相阻断ELISA试剂盒中包含A型口蹄疫病毒中和抗体Ab1、A型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)抗原以及生物素标记的Ab1抗体，其中，所述的A型口蹄疫病毒中和抗体Ab1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明基于自主研发制备的A型口蹄疫病毒中和抗体Ab1抗体和A型口蹄疫病毒VLPs，研发出一种敏感性和特异性均较好，可以检测A型口蹄疫病毒中和抗体，且价格低廉的国产A型口蹄疫病毒中和抗体检测试剂盒，能够方便的用于评价疫苗诱导的抗体是否具有保护作用，其检测结果与传统VNT方法检测结果具有很高的符合率(95.3％)。
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公开(公告)号：CN119454924A
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202411319801.4
申请日：2024-09-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒mRNA疫苗组合物及其应用。所述的疫苗组合物选自以下组合中的任一：(1)由PRRSV GP3mRNA、PRRSV GP4mRNA以及PRRSV GP5mRNA组成的mRNA疫苗组合物；或(2)由PRRSV GP5mRNA、PRRSV膜蛋白(M)mRNA以及PRRSV核衣壳蛋白(N)mRNA组成的mRNA疫苗组合物。本发明以高致病性PRRSV JX‑A1毒株为模板，分别构建了可合成多个融合蛋白GP345，GP5M、GP5MN和单个结构蛋白GP3，GP4，GP5，M，N的mRNA。脂质体包封后接种小鼠进行免疫学评价，结果显示：单个mRNA‑LNPs混合组的体液免疫和细胞免疫水平均高于重组mRNA‑LNPs，其中GP5+M+N，GP3+4+5效果相对最好。本发明的提出为预防PRRSV提供了新的技术手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118050507A
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202410162239.2
申请日：2024-02-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/536 , G01N33/68 , G01N33/532 , C07K16/10
Abstract: 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒中和抗体液相阻断ELISA检测试剂盒及其应用。所述的液相阻断ELISA试剂盒中包含用作包被抗体的O型口蹄疫病毒中和抗体Ab1、用作反应抗原的O型口蹄疫病毒样颗粒抗原以及用作检测抗体的生物素标记的Ab1抗体，其中，所述的O型口蹄疫病毒中和抗体Ab1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明基于O型口蹄疫病毒中和抗体Ab1抗体和O型口蹄疫病毒VLPs，提出了O型口蹄疫病毒中和抗体液相阻断ELISA检测试剂盒，该试剂盒可用于检测O型口蹄疫病毒中和抗体，能够方便的用于评价一个O型口蹄疫疫苗诱导的抗体是否具有保护作用，敏感性和特异性均较好，且价格低廉，其检测结果与传统VNT方法检测结果具有较高的符合率(90.83％)。
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公开(公告)号：CN117964778A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410066560.0
申请日：2024-01-16
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N9/88 , C12N15/81 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , A61K39/12 , A61K39/385 , A61P31/20 , C07K16/08 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)P14.5蛋白纳米颗粒及其制备方法和应用。所述蛋白纳米颗粒由蛋白质单体自组装形成，所述蛋白质单体由非洲猪瘟病毒P14.5蛋白和骨架蛋白通过连接肽连接后得到。所述骨架蛋白为mi3，其编码核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示，所述P14.5蛋白的编码核苷酸序列为SEQ ID NO：2所示。本发明利用蛋白骨架的自组装特性以及N端的可修饰性，将ASFV P14.5结构蛋白展示在蛋白骨架的外表面，获得了具有较高免疫效力及较高稳定性的非洲猪瘟纳米颗粒抗原，可用于制备抗ASFV特异性抗体或预防或治疗由ASFV感染引起的疾病的药物。本发明的提出为非洲猪瘟病毒的防控提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN119955944A
公开(公告)日：2025-05-09
申请号：CN202510030997.3
申请日：2025-01-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鉴定口蹄疫病毒持续感染牛的分子标志物组合及其应用。所述的分子标志物组合由IL‑10、IL‑1β以及CXCL8基因组成。在口蹄疫病毒持续感染牛中，IL‑10、IL‑1β以及CXCL8基因的表达水平均在攻毒后7天显著低于康复牛，而在攻毒后14天显著高于康复牛。对这三个基因进行诊断的敏感性和特异性分析。结果显示，在7dpc时，AUC为1.000(95％置信区间，0.872‑1.000)，诊断的敏感性和特异性均达到了100％。在14dpc时，AUC为1.000(95％置信区间，0.872‑1.000)，诊断的敏感性和特异性也均达到了100％。该结果说明IL‑10、IL‑1β、CXCL8可作为一个分子标志物组合，在口蹄疫病毒感染早期(
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公开(公告)号：CN119265193A
公开(公告)日：2025-01-07
申请号：CN202411319573.0
申请日：2024-09-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12N15/113 , C12N15/67 , A61K39/00
Abstract: 本发明公开了一种能够提高mRNA表达效率的非编码区序列及其应用。本发明以报告基因EGFP为目的基因设计了8种不同非编码区，通过比较携带不同非编码区的EGFP在不同时间点和细胞系的表达水平和转染效率，最终筛选出一款能高水平表达的mRNA非编码区，携带该非编码区的EGFP mRNA转染细胞后能够迅速翻译表达，3h可见明显绿色荧光，而EGFP‑Control在转染后12小时可见微弱的绿色荧光，且荧光强度一直比较弱。此外，通过对非编码区RNA序列的二级结构，GC含量和序列长度等进一步分析并阐释其表达差异的原因，为高效mRNA疫苗的序列设计提供了理论依据。
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公开(公告)号：CN119162247A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411485227.X
申请日：2024-10-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种稳定表达猪瘟病毒疫苗株E2蛋白的悬浮HEK293细胞系的构建方法。本发明构建了表达猪瘟病毒疫苗株E2蛋白的悬浮HEK293细胞系。在细胞稳定传代试验中证实，当HEK‑E2细胞系能够稳定传10代时，培养上清中E2蛋白的表达量稳定，产量稳定保持在1.0‑1.2 mg/ml，亲和层析纯化获得的E2蛋白纯度达到95%，双抗体夹心ELISA确定其具有很好的反应原性，206佐剂乳化E2蛋白免疫猪能够诱导高水平的血清抗体，攻击强毒后能够得到完全保护。本发明构建的HEK‑293细胞系能够稳定分泌表达的CSFV E2蛋白的具备开发为重组E2基因工程疫苗的应用前景。
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