公开(公告)号：CN120041481A

公开(公告)日：2025-05-27

申请号：CN202510187038.2

申请日：2025-02-20

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 郭慧琛 ,  孙世琪 ,  李志要 ,  尹双辉 ,  董虎 ,  白满元 ,  张韵 ,  滕志东 ,  王金 ,  丁耀忠 ,  吴金恩 ,  周静静

IPC: C12N15/81 ,  C07K14/09 ,  C12N9/50 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种利用毕赤酵母表达系统生产口蹄疫病毒样颗粒疫苗的方法及其产品和应用。所述的方法是通过将优化后的P1基因和优化后的3C蛋白酶的表达盒构建在同一个质粒上，然后在毕赤酵母里面进行诱导表达，最后通过组装、纯化后得到的。本发明通过在P1基因引入N1017D和H2145Y突变，提高了VLPs的耐酸性。同时，为了提高3C蛋白酶在毕赤酵母细胞中的切割效率，对3C蛋白酶基因进行了改良，提高了其对P1蛋白的切割功能，成功利用毕赤酵母表达系统制备了VLPs。本发明的提出为口蹄疫病毒样颗粒的制备提供了新的方法，相比其他真核表达系统更有优势，且解决了毕赤酵母系统中3C蛋白酶的影响问题，有利于将来的工业化生产。