一种镰刀菌单端孢霉烯族A类毒素的分子鉴定方法

    公开(公告)号:CN102443590B

    公开(公告)日:2014-06-18

    申请号:CN201010506095.6

    申请日:2010-10-09

    Abstract: 本发明属于植物检验检疫技术领域,具体地涉及一种镰刀菌单端孢霉烯族A类毒素的分子鉴定方法。其特征是,针对单端孢霉烯A类毒素,通过Tri13基因信息设计一对特异性引物,从产镰刀菌A类毒素的镰刀菌中分离得到T-2毒素的特异性片段(其长度为470bp),而不产镰刀菌A类毒素的镰刀菌中不能扩增到该特异片段,采用PCR反应,利用琼脂糖凝胶电泳检测产物,直接根据产物片段的有无及大小,即可确定某一镰刀菌是否产T-2毒素。本发明可用于谷物、饲料和食品安全中镰刀菌单端孢霉烯族A类毒素的检测。

    一种Viviparous1基因及其启动子表达载体的构建方法和应用

    公开(公告)号:CN102321657A

    公开(公告)日:2012-01-18

    申请号:CN201110267782.1

    申请日:2011-09-09

    Abstract: 本发明公开了一种Viviparous1基因及其启动子表达载体的构建方法和应用,其步骤:A、目的基因及其启动子的克隆:合成引物VpromoterF、VpromoterR以玉米851213-1×HE124B基因组DNA为模板,扩增出目的基因Vp1的启动子序列Vpromoter.剥离玉米胚,在含10μmABA MS培养基中,摇床培养,提取mRNA,反转录合成cDNA,引物VgCF和VgCR,扩增出Vp1基因的编码序列Vp1cds,PCR产物经酶切后连接到pBluescript SK+/-,测序;B、载体构建:以pBML-PMI载体为基础,Vpromoter和Vp1cds经酶切后,与pBML-PMI质粒连接,构建成pBML-PMI-Vp1表达载体。C、Viviparous 1基因及其启动子在小麦穗发芽抗性育种中的应用。利用农杆菌介导,转化小麦愈伤,获得转基因小麦。提高了ABA信号传递的敏感性,增强了小麦种子的休眠性,获得的转基因阳性材料穗发芽抗性显著提高。

    一种农杆菌介导的无抗生素筛选转基因大麦植株的方法

    公开(公告)号:CN101016568B

    公开(公告)日:2010-05-19

    申请号:CN200710051390.5

    申请日:2007-01-26

    Abstract: 本发明属于植物转基因技术领域,具体涉及一种农杆菌介导的无抗生素筛选培育大麦转基因植株的方法。本发明的要点是,通过农杆菌介导将报导基因manA导入受体大麦细胞中,利用甘露糖替代抗生素作为选择剂,对转化后的受体细胞进行筛选;通过磷酸甘露糖异构酶活性调节大麦的遗传转化进程,利用氯酚红显色方法和PCR方法对转基因大麦候选植株作进一步筛选,最终获得高转化率的转基因大麦植株。本发明所采用农杆菌介导遗传转化的大麦栽培品种转化率最高达到12%,用氯酚红显色法筛选转化植株的效率达到100%。

    一种养殖水体合理养殖密度的计算方法

    公开(公告)号:CN118332774A

    公开(公告)日:2024-07-12

    申请号:CN202410350462.X

    申请日:2024-03-26

    Abstract: 本发明提供一种养殖水体合理养殖密度的计算方法,涉及水产养殖技术领域,该方法包括如下步骤:构建有限空间养殖对象生物积累模型、进行密度梯度养殖试验、获取试验组生物量积累参数、求解各密度梯度试验组的极限产量ki、求解目标养殖水体的养殖容量求近似解Km、计算合理养殖密度N。本发明的有益效果为:该方法通过密度梯度养殖试验,获取试验组生物量积累参数实际养殖数据,并结合构建的模型以及养殖数据计算出养殖容量的近似解,并对得到的近似解进行校验,最终为合理放养密度的计算提供依据。该计算方法结合了理论计算以及实际养殖试验,可以快速高效地确定精养水体合理放养密度,且结果可靠,对养殖生产的指导性强。

    适合转基因小麦定量检测的内标准基因引物设计及应用

    公开(公告)号:CN103173521B

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201110432297.5

    申请日:2011-12-21

    Abstract: 本发明公开了一种适合转基因小麦定量检测的内标准基因引物设计及应用,其步骤:A、通过NCBI数据库BlastN筛选物种特异性好的基因,查找非同源区段设计引物,扩增区段,将上下游序列进行Primer-Blast检测;B、选取16个不同物种种子和35个不同小麦品种灭菌消毒、萌发取叶片提取DNA;C、SouthernBlot鉴定候选特异性好的PSG719、UCB基因位点数为6个,拷贝数为2个;D、普通PCR鉴定内标准基因引物物种特异性:E、普通PCR鉴定内标准基因引物不同小麦品种间稳定性。确定两对引物做转基因小麦检测时的定性或定量检测内标准基因引物。方法易行,操作简便,定性检测极限为0.95个小麦基因组,定量检测为5个小麦基因组,通过Real-timePCR检测,线性关系良好。

    一种镰刀菌单端孢霉烯族B类毒素的分子鉴定方法

    公开(公告)号:CN102443589B

    公开(公告)日:2013-12-04

    申请号:CN201010506091.8

    申请日:2010-10-09

    Abstract: 本发明属于植物检验检疫技术领域,具体涉及一种镰刀菌B类毒素的分子检测方法及应用。其特征是,针对单端孢霉烯B类毒素,同过Tri11基因信息设计的一组多重PCR引物,从产3-AcDON、15-AcDON和NIV毒素的禾谷镰刀菌中分离得到334bp、279bp、497bp的特异片段,采用PCR反应,利用琼脂糖凝胶电泳检测产物,直接根据产物片段的大小,即可检测出禾谷镰刀菌产生毒素的类型。本发明可用于谷物、饲料和食品安全中镰刀菌B类毒素的检测。

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