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公开(公告)号：CN116593721A
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202310564722.9
申请日：2023-05-19
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供了一种标记植物固醇的试剂及其应用和标记植物固醇的方法，属于植物固醇检测技术领域，该试剂中的胆固醇炔烃类似物实现了特异性地与植物固醇结合，同时还不影响植物的自然生化反应，所采用的叠氮荧光化物抗激光淬灭能力强，能够在一定程度上减轻光照毒害，实现在活体状态下长时间观察的效果，因此，本发明的试剂荧光标记活体植物细胞中的固醇快速、高效、稳定、特异性强，从而能够直观的观察固醇在植物中的分布状态。本发明所述的标记植物固醇的方法，通过生物正交反应标记植物固醇，该方法操作较为简便，可重复性高。
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公开(公告)号：CN116397008A
公开(公告)日：2023-07-07
申请号：CN202211367270.7
申请日：2022-11-02
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12Q1/6809 , C12Q1/6895 , C12N15/29 , C12N15/11 , G16B40/00
Abstract: 本发明公开了一种油松年龄标记基因PtMADS26的筛选鉴定方法与应用，涉及林木育种技术领域。本发明基于加权共表达网络分析筛选和鉴定到油松年龄标记基因PtMADS26，进一步通过实时荧光定量分析实验检测PtMADS26在不同年龄油松中的表达模式，并测定其在反复截顶和未截顶油松中的表达水平，从而确定其参与油松成熟态向幼年态的调控。本发明通过共表达网络分析为挖掘树木年龄标记基因及互作关系预测提供了新的思路，在克服多年生树木成熟效应，促进无性繁殖，缩短育种年限方面具有重要意义。
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公开(公告)号：CN115825020A
公开(公告)日：2023-03-21
申请号：CN202211070807.3
申请日：2022-09-01
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供了一种Halo‑tag标记和3D超分辨成像观察植物活细胞核蛋白的方法，属于分子标记技术和显微成像技术领域。本发明提供的观察植物活细胞核蛋白的方法，包括如下步骤：步骤一：获取Halo‑tag转基因植株；步骤二：制备和培养植物原生质体细胞；步骤三：Halo‑tag荧光染料的孵育和漂洗；步骤四：3D‑SIM超分辨成像观察；步骤五：利用软件分析图像和统计相关参数。本发明方法可以长时间的、特异性的标记植物细胞核内蛋白质，抗猝灭和漂白能力大大提高，并且标记过程非常十分简单和快速，能够实现植物细胞核内的目标分子的长时间追踪和精细定位观察。
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公开(公告)号：CN110455595B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN201910644850.8
申请日：2019-07-17
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开一种用于超薄切片的植物组织整体染色法。该方法包括如下实验步骤：(1)固定：收集成熟的青杄花粉，用戊二醛与多聚甲醛进行前固定，再使用1％锇酸进行后固定；用TCH处理，再用1％锇酸进一步沉积锇；(2)块染：用2.5％醋酸钆、2.5％醋酸钐、2％醋酸双氧铀进行块染；(3)乙醇梯度脱水：分别用30％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、100％乙醇进行脱水；(4)渗透：分别用乙醇与丙酮混合溶液、100％丙酮、丙酮与spurr树脂混合溶液、100％spurr树脂进行渗透处理；(5)包埋与聚合：在包埋板中加入100％spurr树脂，放入样品后置于烘箱进行聚合。本方法具操作简单、染色效果较好，图像对比度明显；还有利于超薄连续切片，为实现植物组织三维重构奠定了技术基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109142398B
公开(公告)日：2021-02-02
申请号：CN201810810425.7
申请日：2018-07-16
Applicant: 北京林业大学
IPC: G01N23/046 , G01N1/30 , G01N1/28
Abstract: 一种提高拟南芥种子成像质量的方法，本发明属于生物学领域，具体涉及一种提高植物种子成像质量方法的领域。本发明的目的是为了解决拟南芥种子三维图像成像质量较差，无法用于进一步分析拟南芥种子内部参数的问题。本发明的提高拟南芥种子成像质量的方法，按以下步骤进行：一、溶液的配制：配制标准固定液，配制碘化铯溶液；二、拟南芥种子的处理；三、拟南芥种子的干燥；四、拟南芥种子的微计算断层扫描仪成像；五、重构图片预处理。通过本发明提供的方法得到的拟南芥种子图像经Micro CT扫描，其结果更清晰，大幅提高图像质量，十分利用拟南芥种子三维重构的建立，也为拟南芥种子内部参数计算提供可靠数据。
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公开(公告)号：CN105273082A
公开(公告)日：2016-01-27
申请号：CN201510607983.X
申请日：2015-09-22
Applicant: 北京林业大学
IPC: C07K16/18 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种GFP蛋白多克隆抗体的制备方法，首先用DNAstar软件对GFP蛋白进行抗原预测分析，选择亲水性强，抗原性指数高的两段区域作为抗原区，然后通过设计引物，用含有GFP核苷酸序列的pCAMBIA1300质粒做模板，进行扩增；把抗原基因片段连接到pET28a载体上，重组质粒转化入BL21中，筛选阳性克隆并PCR鉴定；选用日本大耳白兔，在注射抗原的同时，加入免疫佐剂刺激机体产生较强的免疫反应，对多克隆抗体兔进行双肩皮下两点和双后腿肌肉两点常规免疫；纯化IgG抗体。本发明所制备的抗体具有效价高，灵敏性好，可重复等优点，可以有效弥补现有GFP抗体的缺点和不足；可以有效降低抗体的非特异性。
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公开(公告)号：CN104232639A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410309033.4
申请日：2014-07-01
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供了一种与植物木质化相关的microRNA857及其相关生物材料与应用。该应用为如下任一所述生物材料在降低植物木质化程度中的应用：(1)miR857；(2)miR857的编码基因；(3)表达miR857的重组载体。本发明通过实验证明，过量表达miR857导致茎干平均直径减小和机械强度减弱，木质素含量降低。本发明为木本植物以及有关农作物木质化程度的改变等提供了更多的有效途径。本发明为根据实际生产需要来培育木质素含量低的植物品种，提供了一种全新的并且简单有效的方法。
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公开(公告)号：CN119876188A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202510361379.7
申请日：2025-03-26
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种Pt6G00980基因及其蛋白在判定油松种子萌发活力中的应用，涉及生物技术领域。该基因的表达量与萌发活力呈负相关，随着油松种子的萌发而逐渐降低。本发明还提供检测该基因的引物组，通过使用本发明提供的引物组对待测样本的cDNA和参考样本的cDNA进行定量PCR扩增，并比较待测样本和参考样本中Pt6G00980基因的表达量，能够实现对待测样本萌发活力的准确判定。与传统的依赖观察种子萌发率及生理指标的分辨方法相比，本发明提供的技术方案可准确反映出油松种子的萌发活力，且精度更高，科学性更强，可重复性好。
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公开(公告)号：CN118853689B
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202410908796.4
申请日：2024-07-08
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了Pt9G10460基因及其编码蛋白在判断油松幼苗是否进入暗形态建成期中的应用。属于农业生物技术领域。本发明提供了标记基因Pt9G10460及其编码蛋白，该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。该基因及其编码蛋白均能用于判断油松幼苗是否进入暗形态建成期。本发明还提供了特异性扩增上述基因的引物对，利用该引物对能特异性扩增Pt9G10460基因。使用qRT‑PCR技术分析Pt9G10460基因在油松不同状态组织中的表达量，能够高效、准确地判断待测样本是否处于暗形态建成期。实验证明，本发明提供的技术方案可准确判断油松幼苗是否进入暗形态建成期，且精度更高，科学性更强，可重复性好。
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