公开(公告)号：CN110455595A

公开(公告)日：2019-11-15

申请号：CN201910644850.8

申请日：2019-07-17

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 李晓娟 ,  姚小敏 ,  林金星 ,  马玲玉 ,  沈微微

IPC: G01N1/28 ,  G01N1/30 ,  G01N1/36

Abstract: 本发明公开一种用于超薄切片的植物组织整体染色法。该方法包括如下实验步骤：(1)固定：收集成熟的青杄花粉，用戊二醛与多聚甲醛进行前固定，再使用1％锇酸进行后固定；用TCH处理，再用1％锇酸进一步沉积锇；(2)块染：用2.5％醋酸钆、2.5％醋酸钐、2％醋酸双氧铀进行块染；(3)乙醇梯度脱水：分别用30％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、100％乙醇进行脱水；(4)渗透：分别用乙醇与丙酮混合溶液、100％丙酮、丙酮与spurr树脂混合溶液、100％spurr树脂进行渗透处理；(5)包埋与聚合：在包埋板中加入100％spurr树脂，放入样品后置于烘箱进行聚合。本方法具操作简单、染色效果较好，图像对比度明显；还有利于超薄连续切片，为实现植物组织三维重构奠定了技术基础。

公开(公告)号：CN110455595B

公开(公告)日：2022-04-01

申请号：CN201910644850.8

申请日：2019-07-17

Applicant: 北京林业大学

Inventor： 李晓娟 ,  姚小敏 ,  林金星 ,  马玲玉 ,  沈微微

IPC: G01N1/28 ,  G01N1/30 ,  G01N1/36

Abstract: 本发明公开一种用于超薄切片的植物组织整体染色法。该方法包括如下实验步骤：(1)固定：收集成熟的青杄花粉，用戊二醛与多聚甲醛进行前固定，再使用1％锇酸进行后固定；用TCH处理，再用1％锇酸进一步沉积锇；(2)块染：用2.5％醋酸钆、2.5％醋酸钐、2％醋酸双氧铀进行块染；(3)乙醇梯度脱水：分别用30％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、100％乙醇进行脱水；(4)渗透：分别用乙醇与丙酮混合溶液、100％丙酮、丙酮与spurr树脂混合溶液、100％spurr树脂进行渗透处理；(5)包埋与聚合：在包埋板中加入100％spurr树脂，放入样品后置于烘箱进行聚合。本方法具操作简单、染色效果较好，图像对比度明显；还有利于超薄连续切片，为实现植物组织三维重构奠定了技术基础。