公开(公告)号：CN110592286B

公开(公告)日：2022-06-21

申请号：CN201911002650.9

申请日：2019-10-21

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心 ,  江苏奇天基因生物科技有限公司

Inventor： 吴晓东 ,  樊晓旭 ,  李林 ,  南文龙 ,  赵洋 ,  蔡禹希 ,  郭利川 ,  应清界 ,  吴发兴

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种RAA荧光法检测结节性皮肤病病毒的引物、探针及检测方法，其中引物和探针适用于RAA荧光法检测，并且能够准确地检测出结节性皮肤病病毒质粒，与支原体、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛副流感病毒、牛呼吸合胞体病毒、山羊痘病毒、绵羊痘病毒无交叉反应，特异性达100％；检测方法快速、容易实现高通量，同时降低了检测时间和检测成本，本发明提供的基于RAA荧光法快速检测结节性皮肤病病毒DNA的方法，灵敏度高，每反应检测灵敏度达到10copies/反应。

公开(公告)号：CN113943833A

公开(公告)日：2022-01-18

申请号：CN202111266568.4

申请日：2021-10-28

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 南文龙 ,  陆游 ,  巩明霞 ,  陈义平 ,  吴晓东 ,  李金明 ,  李林 ,  王喜乐 ,  师丽刚 ,  张永强 ,  赵永刚 ,  屈海龙 ,  邹艳丽 ,  赵晶晶 ,  哈达 ,  特木尔巴根 ,  张雨初 ,  王志亮

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供一种牛结节性皮肤病病毒LSDV、山羊痘病毒GTPV和绵羊痘病毒SPPV的快速检测方法，以及应用于检测方法的Taqman‑MGB探针三重荧光PCR引物对和探针组。其中用于羊痘病毒属CaPV检测的正向引物，其序列为SEQ ID NO：1、用于羊痘病毒属CaPV检测的反向引物，其序列为SEQ ID NO：2；用于检测牛结节性皮肤病病毒LSDV的探针，其序列为SEQ ID NO：3；用于检测山羊痘病毒GTPV的探针，其序列为SEQ ID NO：4；用于检测绵羊痘病毒SPPV的探针，其序列为SEQ ID NO：5。本发明的方法检测的灵敏度高、特异性好、快速高通量；且检测方法操作简便。

公开(公告)号：CN108148893A

公开(公告)日：2018-06-12

申请号：CN201711402372.7

申请日：2017-12-22

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 陈义平 ,  秦立得 ,  南文龙 ,  谭鹏飞 ,  巩明霞 ,  张凤霞

IPC: C12Q1/6844 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明提供一种牛种布氏菌的RPA快速鉴别检测方法，其中所使用的引物组的序列为SEQ ID NO:1-4。本发明引物组及方法的优点如下：1)高效灵敏：30min即可完成扩增，扩增模板的最低检出限为1.0×10-2ng/μl；2)特异性强：采用PRA引物组特异性对牛种布氏菌进行鉴别检测，与其他种、生物型的布氏菌、布氏菌疫苗株及常见非布氏菌株，无交叉反应；3)操作简便：配置好的RPA反应体系，置于39℃恒温条件下完成反应，不需要使用PCR仪。4)高通量：可在水浴或恒温培养箱中一次性进行大量样品检测，不受PCR仪设备检测孔数量限制。

公开(公告)号：CN104805215A

公开(公告)日：2015-07-29

申请号：CN201510254878.2

申请日：2015-05-19

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 陈义平 ,  南文龙 ,  王勇 ,  巩明霞 ,  张风霞 ,  张悦勇

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

CPC classification number: C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6858 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2561/101 ,  C12Q2545/114 ,  C12Q2531/113

Abstract: 本发明的目的是提供一种人用布氏菌弱毒疫苗株104M的Taqman-MGB荧光定量PCR快速检测方法。本发明用于检测人用布氏菌弱毒疫苗株104M的引物组，其序列为SEQ ID NO：1-3。本发明引物组的高效灵敏：在1.5h的时间里，即可完成扩增，扩增模板的最低检出限为1.0×10-4ng/μl；特异性强：采用MGB标记的荧光探针，特异性针对104M基因组产生荧光扩增信号，而对其它种、生物型的布氏菌、布氏菌弱毒疫苗及常见非布氏菌株，不产生荧光扩增信号；操作简便：配置好的Taqman-MGB荧光定量PCR反应体系，置于荧光定量PCR仪中即可完成整个扩增及结果判定过程，不需要通过琼脂糖凝胶电泳鉴定。

公开(公告)号：CN104232783A

公开(公告)日：2014-12-24

申请号：CN201410521587.0

申请日：2014-09-30

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 陈义平 ,  南文龙 ,  谭鹏飞 ,  巩明霞 ,  张风霞 ,  张悦勇

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2563/107

Abstract: 本发明的目的在于提供一种用于检测牛种布氏菌弱毒疫苗株A19的引物组，引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1-3。本发明引物组及方法的优点如下：1)高效灵敏：在1.5h的时间里，即可完成扩增，扩增模板的最低检出限为4.0×10-5ng/μl；2)特异性强：采用Cycling标记的荧光探针，特异性针对A19基因组产生荧光扩增信号，而对其它种、生物型的布氏菌、布氏菌弱毒疫苗及常见非布氏菌株，不产生荧光扩增信号；3)操作简便：配置好的Cycleave PCR反应体系，置于荧光定量PCR仪中即可完成整个扩增及结果判定过程，不需要通过琼脂糖凝胶电泳鉴定；4)高通量：根据荧光定量PCR仪的检测孔数量，可以一次性实现48～384个样品的检测。