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公开(公告)号：CN108048586A
公开(公告)日：2018-05-18
申请号：CN201711402789.3
申请日：2017-12-22
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供一种种牛种布氏菌弱毒疫苗株S19的检测方法和检测用的引物组，其中所使用的引物组的序列为SEQ ID NO:1‑4。本发明引物组及方法的优点如下：1)高效灵敏：30min即可完成扩增，扩增模板的最低检出限为1.0×10‑3ng/μl；2)特异性强：采用两对PRA引物组特异性对S19进行鉴别检测，与其他种、生物型的布氏菌、布氏菌疫苗株及常见非布氏菌株，无交叉反应；3)操作简便：配置好的RPA反应体系，置于39℃恒温条件下完成反应，不需要使用PCR仪；4)高通量：可在水浴或恒温培养箱中一次性进行大量样品检测，不受PCR仪设备检测孔数量限制。
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公开(公告)号：CN108148893A
公开(公告)日：2018-06-12
申请号：CN201711402372.7
申请日：2017-12-22
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/689 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供一种牛种布氏菌的RPA快速鉴别检测方法，其中所使用的引物组的序列为SEQ ID NO:1-4。本发明引物组及方法的优点如下：1)高效灵敏：30min即可完成扩增，扩增模板的最低检出限为1.0×10-2ng/μl；2)特异性强：采用PRA引物组特异性对牛种布氏菌进行鉴别检测，与其他种、生物型的布氏菌、布氏菌疫苗株及常见非布氏菌株，无交叉反应；3)操作简便：配置好的RPA反应体系，置于39℃恒温条件下完成反应，不需要使用PCR仪。4)高通量：可在水浴或恒温培养箱中一次性进行大量样品检测，不受PCR仪设备检测孔数量限制。
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公开(公告)号：CN104232783A
公开(公告)日：2014-12-24
申请号：CN201410521587.0
申请日：2014-09-30
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明的目的在于提供一种用于检测牛种布氏菌弱毒疫苗株A19的引物组，引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1-3。本发明引物组及方法的优点如下：1)高效灵敏：在1.5h的时间里，即可完成扩增，扩增模板的最低检出限为4.0×10-5ng/μl；2)特异性强：采用Cycling标记的荧光探针，特异性针对A19基因组产生荧光扩增信号，而对其它种、生物型的布氏菌、布氏菌弱毒疫苗及常见非布氏菌株，不产生荧光扩增信号；3)操作简便：配置好的Cycleave PCR反应体系，置于荧光定量PCR仪中即可完成整个扩增及结果判定过程，不需要通过琼脂糖凝胶电泳鉴定；4)高通量：根据荧光定量PCR仪的检测孔数量，可以一次性实现48～384个样品的检测。
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公开(公告)号：CN104232783B
公开(公告)日：2015-06-03
申请号：CN201410521587.0
申请日：2014-09-30
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明的目的在于提供一种用于检测牛种布氏菌弱毒疫苗株A19的引物组，引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1-3。本发明引物组及方法的优点如下：1)高效灵敏：在1.5h的时间里，即可完成扩增，扩增模板的最低检出限为4.0×10-5ng/μl；2)特异性强：采用Cycling标记的荧光探针，特异性针对A19基因组产生荧光扩增信号，而对其它种、生物型的布氏菌、布氏菌弱毒疫苗及常见非布氏菌株，不产生荧光扩增信号；3)操作简便：配置好的Cycleave PCR反应体系，置于荧光定量PCR仪中即可完成整个扩增及结果判定过程，不需要通过琼脂糖凝胶电泳鉴定；4)高通量：根据荧光定量PCR仪的检测孔数量，可以一次性实现48～384个样品的检测。
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