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公开(公告)号:CN108753739B
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN201810627238.5
申请日:2018-06-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/01 , A61K39/245 , A61P31/22 , A61K39/187 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株,其插入的外源序列包括:CMV启动子、猪瘟病毒E2蛋白的信号肽及编码E2蛋白第1‑342位氨基酸和SV40 polyA的核苷酸序列。本发明还公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株的制备方法和应用。本发明的重组伪狂犬病毒弱毒株,对伪狂犬病毒及猪瘟病毒均有较好的免疫保护效果,适于作为防治伪狂犬病及猪瘟的疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN113584063A
公开(公告)日:2021-11-02
申请号:CN202110882874.4
申请日:2021-08-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种基于转录调控序列重布的反向遗传操作方法及其应用,其中,所述方法为根据HuN4‑F112感染性克隆全长测序以及转录调控前导序列(Leader TRS),下游转录调控序列(body TRSs)一级核心6碱基序列的鉴定,将HuN4‑F112全基因组设计为分别包含Leader TRS,Body TRSs在内的六段基因组序列,分别设计用于Leader TRS,Body TRSs核心6碱基序列C5C6定点突变的引物,获得全基因组转录调控序列整体突变的基因组片段。该TRS circuit突变PRRS弱毒疫苗株能够有效抵抗自然环境中普遍发生的基因组间重组现象,对临床上PRRS的有效防控有重要意义。
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公开(公告)号:CN112661817A
公开(公告)日:2021-04-16
申请号:CN202011556967.X
申请日:2020-12-25
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/01 , C07K16/08 , C07K16/06 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一株针对ASFV p54蛋白单克隆抗体的制备方法、表位鉴定以及应用。通过将分析p54蛋白的优势抗原表位,选取合适的区域克隆到pET‑30a载体中,构建出原核表达载体pET‑30a‑p54‑JD,将表达的p54蛋白纯化后免疫Balb/c小鼠,经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞,然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗p54蛋白的单克隆抗体,并鉴定了该抗体所对应的p54蛋白抗原表位。
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公开(公告)号:CN110735006A
公开(公告)日:2020-01-31
申请号:CN201911216202.9
申请日:2019-12-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟TaqMan实时荧光定量PCR检测试剂,本发明建立基于ASFV p17蛋白的编码基因D177L的TaqMan实时荧光定量PCR检测体系,通过条件优化得到较为理想的扩增曲线和检测效果,与传统PCR检测方法相比,具有特异性更强、灵敏度更高、重复性更好、自动化程度更高反应更快等优点,且不需要电泳及紫外检测耗时更短、结果更加直观。
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公开(公告)号:CN110408622A
公开(公告)日:2019-11-05
申请号:CN201910467239.2
申请日:2019-05-31
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种猪IRAV基因,该基因序列包含编码SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,本发明还公开了猪IRAV蛋白质,该蛋白质具有SEQ ID NO.2所示氨基酸序列,本发明还公开了抗猪IRAV蛋白的单克隆抗体。本发明的猪IRAV基因、蛋白质,具有抗病毒活性,适于研制抗病毒药物,应用前景广阔;本发明的单克隆抗体,与猪IRAV蛋白具有很好的特异性反应,为进一步研究猪IRAV蛋白的生物学功能奠定基础。
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公开(公告)号:CN119798425A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202510115642.4
申请日:2025-01-24
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C07K14/08 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种PRRSV非结构蛋白12抗体的制备、表位鉴定及应用。通过构建真核表达载体pCDNA3.4‑Nsp12‑strep,瞬时转染CHO细胞,利用下游strep标签纯化获得PRRSV Nsp12重组蛋白,将纯化后的Nsp12作为抗原免疫Balb/C小鼠,分离小鼠脾细胞,经FACS法分离单个特异性B细胞,并通过RT‑PCR获得单个B细胞的抗体可变区序列,分别构建重链、轻链重组表达质粒,转染CHO悬浮细胞,表达并利用Protein G纯化获得了2种完整的抗PRRSV Nsp12单克隆抗体1N14和2S18,进一步确定了1N14和2S18抗体的应用范围及1N14抗体识别的具体抗原表位,其序列为104YEFTGNGEDW113。
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公开(公告)号:CN117903262A
公开(公告)日:2024-04-19
申请号:CN202410083824.3
申请日:2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/08 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp7单克隆抗体的制备、表位鉴定及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp7,利用大肠杆菌表达重组Nsp7,纯化后免疫Balb/c小鼠,经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞,然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗Nsp7的单克隆抗体,并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为184KFWDKNSGD192。
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公开(公告)号:CN116589565A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310760995.0
申请日:2023-06-26
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供一株非洲猪瘟病毒p72单克隆抗体的制备及其在检测p72蛋白和建立非洲猪瘟病毒乳胶层析试纸条检测方法中的应用。本发明制备了一株ASFV p72蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株R3E9,确定了该株单抗的可变区序列。该株单抗,可用于IFA,识别杆状病毒表达的p72蛋白和ASFV感染细胞中的p72蛋白;也可用于western blotting,识别变性的p72蛋白。以该株单抗制备的非洲猪瘟病毒乳胶层析试纸条,具有良好的特异性和灵敏性,无需辅助设备即可实现ASFV现场快速检测,为我国猪场快速诊断ASFV提供重要技术支撑,将增强我国防控ASFV能力。
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公开(公告)号:CN112062831B
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202010629062.4
申请日:2020-07-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/705 , C07K16/28 , C07K16/06 , A61K39/395 , A61P31/14 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一株CD163蛋白单克隆抗体MAb的制备方法、表位鉴定以及应用。通过将CD163对于PRRSV复制具有重要作用的功能结构域SRCR5‑6克隆到pColdI载体中,构建出原核表达载体中携带His标签的CD163 SRCR5‑6的蛋白,纯化SRCR5‑6蛋白免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞同和制备杂交瘤细胞获得抗猪CD163蛋白的单克隆抗体,且对抗体进行了表位鉴定。
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公开(公告)号:CN113912707A
公开(公告)日:2022-01-11
申请号:CN202010649175.0
申请日:2020-07-08
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种猪源盖塔病毒抗体及分泌该抗体的杂交瘤细胞株。本发明还公开了检测盖塔病毒的试剂盒以及上述抗体在制备检测盖塔病毒的产品中的应用。本发明的猪源盖塔病毒抗体,能够高效特异性地识别猪源盖塔病毒和猪源盖塔病毒E2蛋白,在盖塔病毒的临床诊断及免疫检测方面具有很好的应用前景。
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