公开(公告)号：CN119798425A

公开(公告)日：2025-04-11

申请号：CN202510115642.4

申请日：2025-01-24

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 李丽薇 ,  段宏勇 ,  韩松 ,  杨楠 ,  童武 ,  王树茂

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/13 ,  C07K14/08 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569

Abstract: 本发明提供一种PRRSV非结构蛋白12抗体的制备、表位鉴定及应用。通过构建真核表达载体pCDNA3.4‑Nsp12‑strep，瞬时转染CHO细胞，利用下游strep标签纯化获得PRRSV Nsp12重组蛋白，将纯化后的Nsp12作为抗原免疫Balb/C小鼠，分离小鼠脾细胞，经FACS法分离单个特异性B细胞，并通过RT‑PCR获得单个B细胞的抗体可变区序列，分别构建重链、轻链重组表达质粒，转染CHO悬浮细胞，表达并利用Protein G纯化获得了2种完整的抗PRRSV Nsp12单克隆抗体1N14和2S18，进一步确定了1N14和2S18抗体的应用范围及1N14抗体识别的具体抗原表位，其序列为104YEFTGNGEDW113。