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公开(公告)号:CN108753739B
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN201810627238.5
申请日:2018-06-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/01 , A61K39/245 , A61P31/22 , A61K39/187 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株,其插入的外源序列包括:CMV启动子、猪瘟病毒E2蛋白的信号肽及编码E2蛋白第1‑342位氨基酸和SV40 polyA的核苷酸序列。本发明还公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株的制备方法和应用。本发明的重组伪狂犬病毒弱毒株,对伪狂犬病毒及猪瘟病毒均有较好的免疫保护效果,适于作为防治伪狂犬病及猪瘟的疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN113584063A
公开(公告)日:2021-11-02
申请号:CN202110882874.4
申请日:2021-08-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种基于转录调控序列重布的反向遗传操作方法及其应用,其中,所述方法为根据HuN4‑F112感染性克隆全长测序以及转录调控前导序列(Leader TRS),下游转录调控序列(body TRSs)一级核心6碱基序列的鉴定,将HuN4‑F112全基因组设计为分别包含Leader TRS,Body TRSs在内的六段基因组序列,分别设计用于Leader TRS,Body TRSs核心6碱基序列C5C6定点突变的引物,获得全基因组转录调控序列整体突变的基因组片段。该TRS circuit突变PRRS弱毒疫苗株能够有效抵抗自然环境中普遍发生的基因组间重组现象,对临床上PRRS的有效防控有重要意义。
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公开(公告)号:CN112661817A
公开(公告)日:2021-04-16
申请号:CN202011556967.X
申请日:2020-12-25
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/01 , C07K16/08 , C07K16/06 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一株针对ASFV p54蛋白单克隆抗体的制备方法、表位鉴定以及应用。通过将分析p54蛋白的优势抗原表位,选取合适的区域克隆到pET‑30a载体中,构建出原核表达载体pET‑30a‑p54‑JD,将表达的p54蛋白纯化后免疫Balb/c小鼠,经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞,然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗p54蛋白的单克隆抗体,并鉴定了该抗体所对应的p54蛋白抗原表位。
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公开(公告)号:CN110735006A
公开(公告)日:2020-01-31
申请号:CN201911216202.9
申请日:2019-12-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟TaqMan实时荧光定量PCR检测试剂,本发明建立基于ASFV p17蛋白的编码基因D177L的TaqMan实时荧光定量PCR检测体系,通过条件优化得到较为理想的扩增曲线和检测效果,与传统PCR检测方法相比,具有特异性更强、灵敏度更高、重复性更好、自动化程度更高反应更快等优点,且不需要电泳及紫外检测耗时更短、结果更加直观。
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公开(公告)号:CN118791578A
公开(公告)日:2024-10-18
申请号:CN202411023175.4
申请日:2024-07-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/08 , C07K19/00 , C07K16/10 , C12N15/40 , C12N15/70 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp12蛋白的抗原表位、单克隆抗体及应用,本研究利用表达和纯化后的nsp12蛋白为抗原免疫小鼠,通过间接ELISA和IFA等免疫学检测方法成功地筛选获得了5株能够稳定分泌nsp12mAb的阳性杂交瘤细胞株。结果表明,单抗3G11和9C2识别抗原表位为93TWGFESDTAY102,2E3识别抗原表位为115DYNDAFRARQ124,10G6和2A4识别抗原表位为142PGPVIEPTL150。而且,新鉴定出的三个抗原表位均位于nsp12蛋白表面,属于免疫显性抗原表位,在PRRSV‑2不同毒株之间的nsp12蛋白中三个抗原表位高度保守,可以作为PRRSV‑2检测的靶标,有助于PRRSV检测方法的开发。
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公开(公告)号:CN118725054A
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202411079537.1
申请日:2024-08-07
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/165 , C12N15/50 , C12N15/85 , C12N1/21 , A61K39/215 , A61K47/44 , A61K47/28 , A61P31/14 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种用于猪流行性腹泻病毒的自复制mRNA疫苗的构建方法和应用,属于医药技术领域。所述自复制mRNA疫苗包括如SEQ ID NO:1所述序列。还公开了脂质纳米颗粒包裹的自复制mRNA疫苗,其包括所述的自复制mRNA疫苗,以及用于包裹所述自复制mRNA疫苗的脂质,本发明制备的mRNA疫苗,能够快速应对当前流行的猪流行性腹泻病毒,减少了新疫苗开发的研发生产周期。疫苗有效性试验表明本发明制备的自复制mRNA疫苗具有良好的免疫原性,体内可产生高水平的猪流行性腹泻病毒的中和抗体。
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公开(公告)号:CN117903262A
公开(公告)日:2024-04-19
申请号:CN202410083824.3
申请日:2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/08 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp7单克隆抗体的制备、表位鉴定及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp7,利用大肠杆菌表达重组Nsp7,纯化后免疫Balb/c小鼠,经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞,然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗Nsp7的单克隆抗体,并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为184KFWDKNSGD192。
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公开(公告)号:CN112062831B
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202010629062.4
申请日:2020-07-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/705 , C07K16/28 , C07K16/06 , A61K39/395 , A61P31/14 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一株CD163蛋白单克隆抗体MAb的制备方法、表位鉴定以及应用。通过将CD163对于PRRSV复制具有重要作用的功能结构域SRCR5‑6克隆到pColdI载体中,构建出原核表达载体中携带His标签的CD163 SRCR5‑6的蛋白,纯化SRCR5‑6蛋白免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞同和制备杂交瘤细胞获得抗猪CD163蛋白的单克隆抗体,且对抗体进行了表位鉴定。
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公开(公告)号:CN113444837A
公开(公告)日:2021-09-28
申请号:CN202110607667.8
申请日:2021-06-01
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟病毒TaqMan荧光定量PCR检测试剂盒及其应用,该方法仅特异性扩增ASFV,不与CSFV、PRRSV、PEDV、PRV等发生交叉反应,特异性较高。该方法的最低检测数为10个拷贝,本研究建立基于ASFV E248R基因的TaqMan实时荧光定量检测方法是一种特异、灵敏、高效的可应用于临床的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。
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公开(公告)号:CN112779228A
公开(公告)日:2021-05-11
申请号:CN202110187738.3
申请日:2021-02-18
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/08 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒疫苗株及其制备方法,所述疫苗株为将FJzz1在Vero细胞连续传至200代获得。选取低代次FJzz1‑F20和高代次FJzz1‑F200毒株对仔猪进行了致病性评价,结果显示高代次FJzz1‑F200感染组仔猪临床表现明显轻于FJzz1‑F20感染组,且发病猪未有死亡。与FJzz1‑F20感染组相比,FJzz1‑F200感染组仔猪的粪便排毒量和肠组织中的病毒载量显著降低,且肠道组织无明显组织病理学改变。同时,检测发现FJzz1‑F200感染组在肠组织中可以诱导高水平的I型和III型干扰素产生。上述研究结果表明,本发明的FJzz1‑F200其致病性弱,具有作为PEDV候选弱毒疫苗毒株的潜力。
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