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公开(公告)号：CN110408676B
公开(公告)日：2023-04-25
申请号：CN201910656506.0
申请日：2019-07-19
Applicant: 海南大学
Abstract: 目前，纳米孔技术已经成为核酸测序和分析的热点方法。然而，以高灵敏度和特异性在宽浓度范围内检测并量化超低水平核酸仍然是一个挑战。本工作拟研发了一种超灵敏的基于胰蛋白酶激活气溶素原成孔的纳米孔策略（tNASA——trypsin‑activated nanopore amplified sandwich assay），通过胰蛋白酶激活气溶素原和使用微型电流放大器eONEHS的信号检测来进行待测样品的信号放大。本工作创新性体现在：利用胰蛋白酶激活气溶素原组装纳米孔作为信号发生器做到了对信号的二次放大，能够进行aM核酸和单细胞水平上的检测，不仅能够满足微生物检测领域中高选择性、高灵敏度和低成本的要求，同时也为病毒的诊断提供了新的见解。
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公开(公告)号：CN108562742A
公开(公告)日：2018-09-21
申请号：CN201810313597.3
申请日：2018-04-10
Applicant: 海南大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 海洋病害微生物是影响国民经济建设的重要因素之一，开展病害微生物检测和控制研究对国民经济建设有重大意义。本工作拟研发了一种基于金属结合多肽标签的溶血素组装纳米孔的纳米传感器超灵敏诊断病原微生物。项目主要内容为：重点设计金属结合多肽标签的溶血素与检测探针分子在纳米金表面识别机制和反应动力学，考察pA电流计在微生物快速检测和微生物即时表达分析中作用规律。本工作创新性体现在：利用金属结合多肽标签的溶血素组装纳米孔作为信号发生器在分子水平上检测微生物，特别为解决涉及微生物检测方法中“便携式”和“全自动”问题提供参考和借鉴。
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公开(公告)号：CN108195811A
公开(公告)日：2018-06-22
申请号：CN201810032114.2
申请日：2018-01-12
Applicant: 海南大学
Abstract: 海洋病害微生物是影响国民经济建设的重要因素之一，开展病害微生物检测和控制研究对国民经济建设有重大意义。本工作拟研发了一种基于分子探针功能化丙酮酸激酶的纳米传感器结合ATP荧光仪快速超灵敏诊断病原微生物。项目主要内容为：重点设计分子探针功能化丙酮酸激酶与微生物靶点识别机制和反应动力学，考察ATP荧光仪在微生物快速检测和微生物即时表达分析中作用规律。本工作创新性体现在：利用分子探针功能化丙酮酸激酶在分子水平上检测微生物，特别为解决涉及微生物检测方法中“便携式”和“全自动”问题提供参考和借鉴。
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公开(公告)号：CN119246475A
公开(公告)日：2025-01-03
申请号：CN202411378220.8
申请日：2024-09-30
Applicant: 海南大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明提供了一种沙门氏菌检测的侧向层析试纸条及其检测方法，属于食品安全诊断领域。本发明所述荧光纳米金刚石为含氮空位色心的纳米金刚石，在540nm激发光下，可激发670nm附近红色荧光，同时，荧光纳米金刚石通过微波调控可以改变内部的量子自旋，滤除背景荧光，从而提高检测限；本发明所述试纸条可以在较低浓度的实际样本中，通过Cas12特异性靶向激活机制获得第一次信号放大，接着通过荧光纳米金刚石的荧光信号进行第二次放大，实现对沙门氏菌的快速高灵敏检测。本发明的意义在于通过更换标记材料改变信号输出方式，提升试纸条灵敏度，Cas12酶具有精确的核酸靶向和切割功能，能对非靶标核酸进行切割，将检测信号进一步放大，提高检测特异性、灵敏度，而且荧光信号的快速、直观读取使其可用于现场检测，满足及时快速的诊断需求，在食品安全诊断领域具有重要的应用潜力与经济价值。
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公开(公告)号：CN118813870A
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202311455726.X
申请日：2023-11-03
Applicant: 海南大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种利用RTX逆转录酶和Bst DNA聚合酶的RT‑LAMP可视化检测石斑鱼神经坏死病毒的体系，包括一下步骤：1)提取石斑鱼神经坏死病毒RNA；2)设计并合成特异性引物；3)对钙黄绿素和MnCl2浓度比进行优化；4)对反应体系特异性和灵敏度进行分析。本发明利用RTX逆转录酶和Bst DNA聚合酶直接进行RNA病毒检测，并利用钙黄绿素显示指示剂使检测结果可视化，可肉眼观察检测结果，具有操作简单、快速、准确、高灵敏度等特点，对于资源匮乏地区疫情监控具有很大潜力。
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公开(公告)号：CN117431336A
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202210870980.5
申请日：2022-07-23
Applicant: 海南大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 一种检测海水鱼神经坏死病毒的单酶RT‑qPCR体系本发明提供一种利用RTX逆转录酶的RT‑qPCR检测石斑鱼神经坏死病毒的方法，包括以下步骤：1）取感染神经坏死病毒的石斑鱼的新鲜脑组织并提取RNA；2）设计并合成引物；3）制备反应体系；4）以待测的样本RNA为模板进行RT‑qPCR反应；5）获得荧光信号强度并进行结果分析及反应体系特异性试验。本发明利用单酶直接检测RNA病毒，集所有试剂于一管中进行一步反应，不需要分步实验，与常规RT‑qPCR实验相比，具有操作简单、低成本、快速等特点，有潜力成为临床检测和疫情监控的有力工具。
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公开(公告)号：CN116970597A
公开(公告)日：2023-10-31
申请号：CN202210434992.3
申请日：2022-04-24
Applicant: 海南大学
IPC: C12N15/10 , C12Q1/6806 , C12Q1/6844
Abstract: 一种可与磁珠结合进行病毒核酸提取的裂解液本发明涉及一种可与磁珠结合进行病毒核酸提取的裂解液，病毒在裂解液的作用下释放核酸并吸附在磁珠上，吸附在磁珠上的核酸及洗脱下的核酸溶液均可直接进行下游的扩增、检测、分子杂交等实验，此外该病毒裂解液可直接使用全血进行病毒核酸裂解，可适用于畜牧类传染性疾病的快速现场检测。
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公开(公告)号：CN116536303A
公开(公告)日：2023-08-04
申请号：CN202210095350.5
申请日：2022-01-26
Applicant: 海南大学
IPC: C12N15/10 , C12Q1/6806 , C12Q1/689 , C12R1/42 , C12R1/445
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种细菌核酸释放剂结合磁珠进行酸提取的方法。本发明可实现革兰氏阳性菌与阴性菌的核酸快速提取，该法与溶菌酶进行核酸提取法相比大幅度降低核酸提取时间，此外磁珠上核酸在洗脱下来后，可直接进行下游的PCR扩增、检测、分子杂交等实验，特别适用于传染性疾病的快速检测和爆发重大疫情的现场检测。
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公开(公告)号：CN109115741A
公开(公告)日：2019-01-01
申请号：CN201810963857.1
申请日：2018-08-23
Applicant: 海南大学
IPC: G01N21/64
CPC classification number: G01N21/6486
Abstract: 本发明属于微生物检测领域，具体公开了一种多色荧光磁性化学鼻传感器快速检测病原微生物，并对作用于微生物的抗生素进行筛选，该“化学鼻”传感器包括多色荧光蛋白和季铵盐化的磁性纳米颗粒。基于上述“化学鼻”传感器，多色荧光蛋白信号猝灭，而后与待测病原微生物竞争结合，多色荧光蛋白游离发出荧光信号，再根据荧光信号的变化差异，得到不同微生物的响应信号；进一步地，“化学鼻”传感器与经抗生素作用的待测微生物竞争结合，对抗生素进行筛选。本发明的“化学鼻”传感器操作简单、使用方便，灵敏度高、稳定性强，可用于病原微生物及其作用抗生素的快速检测和筛选，能够为微生物感染、抗生素鉴别以及疾病诊断等方面提供参考和借鉴。
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