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公开(公告)号：CN110590729A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910904189.X
申请日：2019-09-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07D311/62 , A61K47/42 , A61K31/352
Abstract: 本发明属于提高白菜花色苷热稳定性领域，涉及一种采用核桃肽提高白菜花色苷热稳定性的方法。包括以下步骤：选择生长状况良好的白菜，洗净备用；选取酸化的乙醇作为提取剂，将提取液和白菜在超声条件下提取花色苷，获得提取液；提取液离心来，分离上清液得到花色苷的粗提取液；浓缩来，得到花色苷粗提取浓缩液；将花色苷粗提取浓缩液中浸泡2.5-4小时，后再用蒸馏水冲洗大孔树脂，再用解吸液解吸大孔树脂，收集解吸液并浓缩，得到纯化的花色苷溶液；花色苷溶液中加入核桃肽溶液并加热来。本发明通过低浓度的核桃肽的作用来保存花色苷，并且能够较为显著的提高花色苷在一定温度的保存率，这对未来花色苷的保存和开发利用具有积极的作用。
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公开(公告)号：CN118272428A
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202410562568.6
申请日：2024-05-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种发根农杆菌介导的芸薹属作物高效遗传转化和基因编辑方法。本发明通过发根农杆菌介导ZmWUS2、AtIPT和AtPLT5三个生长发育调控因子实现芸薹属作物的遗传转化和基因编辑体系的建立，通过发根农杆菌介导ZmWUS2、AtIPT和AtPLT5三个生长发育调控因子诱导外植体形成愈伤，直接形成芽，解决了芸薹属作物根再生困难的问题，使得根再生能力差的物种实现了高效转化。
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公开(公告)号：CN116286946A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310103908.4
申请日：2023-02-13
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种无外源DNA的植物基因编辑方法，通过采用含有移动TLS(tRNA like sequence)基因编辑元件的发根农杆菌侵染植物的营养体，之后进行培养至营养体萌发出转基因毛状根，含有移动TLS基因编辑元件所转录的RNA在移动TLS的带动下从根部移动到营养体新生长的器官以编辑植物基因组。与现有方法相比，本发明的方法无需组培、嫁接和根诱导芽，不受基因型和物种限制的，操作简单，可应用到所有具有茎并能诱导毛状根的草本和木本植物，可以极大地促进CRISPR/Cas9、Cpf1等基因编辑技术在基因功能验证和基因工程育种的应用。
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公开(公告)号：CN115976255A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202211275100.6
申请日：2022-10-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种在苗期鉴定不结球白菜抽薹时间的方法，属于分子生物学技术领域。该方法以不结球白菜的基因组DNA为模板，采用引物组6943bp‑insert‑2F/2R通过聚合酶链式反应扩增该片段，根据目标条带的大小，即可快速鉴定不结球白菜早抽薹材料和品种。本发明提供的鉴定方法，可以在不结球白菜发育早期检测早抽薹的材料和品种，提高检测效率的同时节省了大量人力物力，进一步加快了不结球白菜的育种进程。
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公开(公告)号：CN108504769A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810592942.1
申请日：2018-06-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明选用早开花的油用型品种‘YS-143’与晚开花的芜菁品种‘VT-044’为试材，分别观察其在长日照和短日照两个条件下的开花时间。同时以两个材料为模板克隆这个基因的cDNA序列，并利用生物信息学技术对其氨基酸序列进行分析，发现早花型和晚花型白菜类作物CCA1基因上的差异位点，并通过生物信息学、测序比对等分析得到了初步确认，开发出一个InDel标记。所述InDel分子标记的核苷酸序列为ACCCTT，位于早花型白菜类作物CCA1基因的第六个外显子上，但不存在于晚花型白菜类作物CCA1基因编码区。最后通过验证，将其作为功能标记进行分子辅助育种工作。本发明的分子标记可简便、快速、高通量地应用于育种实践。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108017687A
公开(公告)日：2018-05-11
申请号：CN201711393806.1
申请日：2017-12-21
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K1/14
Abstract: 本发明属于植物营养成分提取领域，具体涉及一种基于响应面分析的不结球白菜叶片中可溶性蛋白提取方法；该方法通过单因素试验和配置标准溶液并绘制标准曲线，在595nm波长测得吸光值，计算出回归方程；称取新鲜不结球白菜叶片1g放入研钵中，加2ml磷酸缓冲溶液研磨成匀浆，转移到离心管中，再用6ml磷酸缓冲溶液分次洗涤研钵，洗涤液收集于同一离心管中，在25℃下放置45min以充分提取，离心处理弃去沉淀，上清液转入10ml容量瓶，并以磷酸缓冲溶液定容至刻度，得待测样品提取液；吸取0.1ml蛋白质提取液，加入5ml考马斯亮蓝G250试剂，放置2min后测得595nm下的吸光值，计算得到待测样品提取液中蛋白质含量。本发明的实验准确性高和提取效果好。
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公开(公告)号：CN107557381A
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201710949078.1
申请日：2017-10-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种白菜CRISPR-Cas9基因编辑体系的建立及其应用。设计两对sgRNA引物sGAvrIIF1/sGR1和sGF2/sGAvrIIR2，分别以pChimera sgRNA vector为模板进行PCR扩增，分别取纯化目的片段以sGAvrIIF1/sGAvrIIR2为引物进行融合PCR；将载体pCAS9-TPC与融合PCR产物酶切后融合连接，融合连接产物转化大肠杆菌，获得阳性菌落进行培养提取质粒得到植物基因编辑载体。通过本发明，可简单有效的实现了对白菜的基因编辑，对白菜转基因体系的建立也奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN118147221A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410402075.6
申请日：2024-04-03
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/84 , C12N15/113 , C12N9/22 , A01H5/00 , A01H6/20
Abstract: 本发明公开了一种快速获得不结球白菜高Vc含量双单倍体材料的方法，所述方法根据不结球白菜GGP基因的uORF序列设计sgRNA，构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，使用根癌农杆菌侵染带柄子叶和下胚轴的方法转化不结球白菜单倍体诱导系，然后将含有基因编辑元件的单倍体诱导系与野生型不结球白菜育种材料杂交，后代经过表型和流式细胞仪鉴定和筛选得到不含基因编辑元件的不结球白菜双单倍体，然后对得到双单倍体进行基因编辑位点鉴定和Vc含量测定，快速获得不结球白菜高Vc含量双单倍体材料。采用本发明的方法可以快速获得纯合的突变体双单倍体材料，提高不结球白菜维生素C的含量，为白菜品质生物育种打下基础。
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公开(公告)号：CN116515892A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310679807.1
申请日：2023-06-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了网格轻链蛋白在抑制TuMV侵染不结球白菜中的应用。本发明通过获得BcCLC1、BcCLC2病毒诱导的基因沉默（VIGS）诱导的沉默植株，结果表明VIGS诱导的基因沉默后，不结球白菜中BcCLC1、BcCLC2基因的相对表达水平明显下降，沉默植株接种TuMV后发现植株中病毒RNA的积累量均明显低于对照植株，这说明BcCLC1、BcCLC2基因沉默抑制TuMV的侵染，在不结球白菜抗TuMV育种具有应用前景。
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公开(公告)号：CN115747370A
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202211417240.2
申请日：2022-11-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组不结球白菜的KASP分子标记及其在种质资源鉴定中的应用。所述KASP分子标记基于不结球白菜基因组和重测序KASP技术，开发了一组不结球白菜的KASP引物，根据所开发的SNP位点以及设计的引物可以构建所选群体的DNA指纹图谱、品种鉴定、以及种子纯度鉴定等实验，实现对不结球白菜种质资源和种子纯度的快速、准确、有效地鉴定。
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