公开(公告)号：CN118147221A

公开(公告)日：2024-06-07

申请号：CN202410402075.6

申请日：2024-04-03

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张昌伟 ,  杨紫蕊 ,  王文龙 ,  肖栋 ,  刘同坤 ,  侯喜林 ,  李英 ,  胡春梅 ,  王建军

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20

Abstract: 本发明公开了一种快速获得不结球白菜高Vc含量双单倍体材料的方法，所述方法根据不结球白菜GGP基因的uORF序列设计sgRNA，构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，使用根癌农杆菌侵染带柄子叶和下胚轴的方法转化不结球白菜单倍体诱导系，然后将含有基因编辑元件的单倍体诱导系与野生型不结球白菜育种材料杂交，后代经过表型和流式细胞仪鉴定和筛选得到不含基因编辑元件的不结球白菜双单倍体，然后对得到双单倍体进行基因编辑位点鉴定和Vc含量测定，快速获得不结球白菜高Vc含量双单倍体材料。采用本发明的方法可以快速获得纯合的突变体双单倍体材料，提高不结球白菜维生素C的含量，为白菜品质生物育种打下基础。