-
公开(公告)号:CN117384925A
公开(公告)日:2024-01-12
申请号:CN202211510854.5
申请日:2022-11-29
IPC: C12N15/53 , C12N15/11 , C12N5/10 , C12N15/867 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种双荧光素报告IFN‑β启动子活性慢病毒质粒、报告细胞系及构建方法,本发明以plvx质粒为骨架通过引入Gluc分泌性荧光素酶基因作为报告基因,并且在该基因的下游反向串联Luc基因作为内参基因以归一化实验结果,合成了用于报告IFN‑β启动子活性的DNA片段组合物、构建了pIFNβ活性双荧光素酶报告系统稳转细胞系。本发明不仅解决了因为转染不同质粒的效率和细胞状态带来的实验差异,同时将分泌性荧光素酶报告基因和慢病毒包装系统结合使得整套系统更加适合高通量持续性实验的检测。
-
公开(公告)号:CN102174421A
公开(公告)日:2011-09-07
申请号:CN201110057770.6
申请日:2011-03-10
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种产甘油酿酒酵母NAU-ZH-GY1及其应用,属于微生物发酵领域,该菌是从未加工的蜂蜜中分离得到,经鉴定为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),保藏编号CGMCC No.4551。该菌株通过液体发酵,发酵培养物中富含有甘油,大量酵母活菌,以及丰富的氨基酸、维生素等微生物代谢物质,应用于反刍动物围产期饲料添加剂生产,甘油可作为能量补充物缓解能量负平衡;酵母菌和氨基酸、维生素等微生物代谢物质,可调节动物胃肠道菌群,拮抗病原微生物,提高机体免疫力,并促进营养物质转化吸收,提高生产性能,将是一种绿色、营养、安全、性价比高的新型饲料添加剂。
-
公开(公告)号:CN118634254A
公开(公告)日:2024-09-13
申请号:CN202311722420.6
申请日:2023-12-14
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K35/76 , A61K31/496 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了一种噬菌体鸡尾酒组合物在制备治疗沙门菌药物中的应用,所述噬菌体鸡尾酒组合物由噬菌体(salmonella phage)YT30和噬菌体(salmonella phage)CX36组成,所述噬菌体(salmonella phage)YT30与噬菌体(salmonella phage)CX36的数量比为1:1。本发明噬菌体鸡尾酒组合物对浮游态和生物被膜状态的肠炎沙门菌的裂解均具有协同作用,并且在体内噬菌体鸡尾酒与恩诺沙星在治疗沙门菌感染鸭时能够在保证对感染鸭保护率的同时,大大减少恩诺沙星用量。
-
公开(公告)号:CN116064873A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202211511047.5
申请日:2022-11-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本申请公开了一种可同时检测罗非鱼中五种食源性致病菌的多重PCR引物组及检测方法。该多重PCR检测引物由特异性地针对无乳链球菌ef‑tμ基因、嗜水气单胞菌ompA基因、沙门菌invA基因、霍乱弧菌ompW基因、大肠杆菌phoA基因的引物对组成,其序列表2所示。基于上述引物对,本发明优化了多重PCR检测体系和反应条件,建立了五重PCR检测方法,并对多重PCR体系的特异性、灵敏度以及人工模拟样品检测进行评价,灵敏度均在0.4 ng/μL以上,检出限可达到102 CFU/mL。本方法的建立为罗非鱼常见食源性致病菌的快速检测提供了重要的技术手段,也为罗非鱼细菌病的防控奠定了基础。
-
公开(公告)号:CN109913565B
公开(公告)日:2020-06-19
申请号:CN201910281743.3
申请日:2019-04-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所 , 南京农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/6804 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/63
Abstract: 本发明公开了一种用于检测副溶血弧菌的试剂盒、引物对、探针及方法。所述的试剂盒包括RPA反应体系,所述的RPA反应体系包括RPA引物探针混合液,所述RPA引物探针混合液包括一引物对和探针,所述引物对中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。本发明引物特异性强、灵敏度高、检测结果准确。将检测副溶血弧菌的RPA技术与胶体金测流层析试纸条结合能够实现副溶血弧菌的快速检测,能最少检测到10pg的副溶血弧菌DNA。
-
公开(公告)号:CN104293739B
公开(公告)日:2017-08-11
申请号:CN201410535918.6
申请日:2014-10-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种针对H3N2犬流感病毒HA2蛋白的单克隆抗体,属于生物技术领域。利用2010年分离的H3N2犬流感病毒江苏分离株JS/10,接种10日龄SPF鸡胚,收集血凝效价大于等于6的尿囊液,纯化病毒接种MDCK细胞,皮内多点注射接种小鼠,细胞融合后,经三次ELISA检测已生成细胞集落的细胞上清,筛选出抗H3亚型杂交瘤细胞株mAb D7,中和抗体效价达1:12800,识别抗原鉴定证实其针对保守的HA2蛋白,抗体亚类为IgG2b。本发明制备针对H3N2犬流感病毒株JS/10 的保守的HA2蛋白单克隆抗体,为H3N2犬流感病毒感染的治疗提供了重要的免疫制剂,具有潜在的应用前景。
-
公开(公告)号:CN103734497A
公开(公告)日:2014-04-23
申请号:CN201310632843.9
申请日:2013-11-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开一种抗奶牛热应激的饲料添加剂。酿酒酵母菌(Saccharomyces?cerevisiae,Sc)NAU‐ZH‐GY1可在制备抗奶牛热应激的饲料添加剂中的应用。本发明在高渗条件下通过连续补料方式发酵生产出富含甘油、酵母活菌,以及丰富的氨基酸、维生素等微生物代谢产物的抗奶牛热应激的饲料添加剂,能协同发挥甘油和酵母菌的双重功效,可显著提高热应激条件下奶牛的泌乳量、4%乳脂校正乳产量和乳脂率,提高血糖浓度,降低乳中体细胞数、非酯化脂肪酸和尿素氮的浓度,为奶牛补充能量,减缓体重的降低,增强抗氧化能力,降低HSP70mRNA水平,有效缓解了奶牛的热应激。
-
公开(公告)号:CN102174421B
公开(公告)日:2012-10-17
申请号:CN201110057770.6
申请日:2011-03-10
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种产甘油酿酒酵母NAU-ZH-GY1及其应用,属于微生物发酵领域,该菌是从未加工的蜂蜜中分离得到,经鉴定为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),保藏编号CGMCC No.4551。该菌株通过液体发酵,发酵培养物中富含有甘油,大量酵母活菌,以及丰富的氨基酸、维生素等微生物代谢物质,应用于反刍动物围产期饲料添加剂生产,甘油可作为能量补充物缓解能量负平衡;酵母菌和氨基酸、维生素等微生物代谢物质,可调节动物胃肠道菌群,拮抗病原微生物,提高机体免疫力,并促进营养物质转化吸收,提高生产性能,将是一种绿色、营养、安全、性价比高的新型饲料添加剂。
-
公开(公告)号:CN119410802A
公开(公告)日:2025-02-11
申请号:CN202411655403.X
申请日:2024-11-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/46
Abstract: 本发明公开了一种基于RPA和CRISPR‑Cas12a的无乳链球菌快速检测试剂盒及其应用,包括重组酶聚合酶扩增技术的扩增引物、CRISPR RNA、ssDNA探针和Cas12a蛋白;其中,所述重组酶聚合酶扩增技术的扩增引物的上游引物序列如SEQ ID NO:1所示;下游引物序列如SEQ ID NO:2所示。本发明实现了无乳链球菌快速、灵敏、准确、特异的检测。
-
公开(公告)号:CN117165616A
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202310924840.6
申请日:2023-07-26
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种乳酸菌组成型异源蛋白高表达表面展示质粒系统及应用,通过设计4种表达盒序列,构建了相应的质粒载体,筛选得到一种可以显著提高外源表达蛋白产量乳酸菌‑大肠杆菌穿梭质粒系统pHC,并且该质粒表达系统可以在乳酸乳球菌内实现外源蛋白分泌表达。然而对于杆菌只能在细胞内表达,无法分泌到培养基中以及在细菌细胞壁表面表达,进而对其进行进一步改造,在表达盒的N端引入可替换式LPXTG motif(LPQTG)基序获得pHCL质粒表达系统,该质粒表达系统可在宿主菌的内源性分选酶作用下将外源蛋白展示到细胞壁表面。此外该质粒表达系统可以根据宿主菌分选酶识别LPXTG基序特异性,通过分子生物学手段替换不同的LPXTG基序以实现异源蛋白表面展示效果最大化。
-
-
-
-
-
-
-
-
-