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公开(公告)号：CN104293739B
公开(公告)日：2017-08-11
申请号：CN201410535918.6
申请日：2014-10-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种针对H3N2犬流感病毒HA2蛋白的单克隆抗体，属于生物技术领域。利用2010年分离的H3N2犬流感病毒江苏分离株JS/10，接种10日龄SPF鸡胚，收集血凝效价大于等于6的尿囊液，纯化病毒接种MDCK细胞，皮内多点注射接种小鼠，细胞融合后，经三次ELISA检测已生成细胞集落的细胞上清，筛选出抗H3亚型杂交瘤细胞株mAb D7，中和抗体效价达1:12800，识别抗原鉴定证实其针对保守的HA2蛋白，抗体亚类为IgG2b。本发明制备针对H3N2犬流感病毒株JS/10 的保守的HA2蛋白单克隆抗体，为H3N2犬流感病毒感染的治疗提供了重要的免疫制剂，具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号：CN102512386A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110425607.0
申请日：2011-12-16
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K9/20 , A61K31/43 , A61P31/04 , A61K31/424
Abstract: 本发明属于兽药领域，涉及宠物用阿莫西林或阿莫西林与克拉维酸钾速溶咀嚼片及其制备方法。该速溶咀嚼片是在现有阿莫西林或阿莫西林与克拉维酸钾剂型基础上，结合口崩片口腔内释药速度快，但崩脆度较差；咀嚼片虽可咀嚼，但崩解释药速度慢，制备出阿莫西林或阿莫西林与克拉维酸钾速溶咀嚼片，极大地方便宠物给药，又能充分发挥阿莫西林的抗菌特点。该速溶咀嚼片的制备方法为：先将阿莫西林或阿莫西林与克拉维酸钾及相关辅料粉碎过50～100目筛；将主药与所选辅料，按合适比例混合均匀，制湿颗粒，经干燥、整粒后，压片，即得。本速溶咀嚼片具有广谱抗菌作用，可用于防治宠物细菌感染。使用时，将制剂放在宠物嘴中，咀嚼很快融化，较好地解决了宠物给药的便利顺应性。
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公开(公告)号：CN105861651A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610209902.5
申请日：2016-04-01
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12Q1/6893 , C12Q1/686 , C12Q2600/166 , C12Q2545/101
Abstract: 本发明提供一种检测患病犬是否感染巴贝斯虫的检测试剂盒，特别是含扩增内标的犬巴贝斯虫PCR检测试剂盒。该检测试剂盒包括上下游引物SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2，扩增内标质粒pMD?IAC，标准阳性模板质粒pMD?18S rRNA，标准阴性模板，空白模板，PCR反应液2×Taq PCR Mix，无菌水。该试剂盒的主要特点是在犬巴贝斯虫PCR检测体系中加入扩增内标，可以用来指示假阴性现象，排除因反应体系中存在抑制剂，PCR仪器故障，反应体系错误，聚合酶失活等原因造成的假阴性结果，进一步提高检测结果的准确性。
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公开(公告)号：CN112522213B
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN202011576998.1
申请日：2020-12-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N7/00 , C12N5/071 , A61K39/145 , A61P31/16 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种分离的H3N2流感病毒株及其应用，所述病毒的HA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，NA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明的目的是提供一株复制增强的H3N2流感病毒CP15，该病毒骨架全部来源于其母本A/Canine/Jiangsu/06/2010病毒株，仅在HA和NA蛋白分别出现K156E和R201K的氨基酸突变，抗CP15病毒的血清抗体对CP15及亲本JS/10均具有一定的中和活性，为将该病毒株应用于犬流感的防治奠定基础。
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公开(公告)号：CN112522213A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011576998.1
申请日：2020-12-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N7/00 , C12N5/071 , A61K39/145 , A61P31/16 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种分离的H3N2流感病毒株及其应用，所述病毒的HA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，NA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明的目的是提供一株复制增强的H3N2流感病毒CP15，该病毒骨架全部来源于其母本A/Canine/Jiangsu/06/2010病毒株，仅在HA和NA蛋白分别出现K156E和R201K的氨基酸突变，抗CP15病毒的血清抗体对CP15及亲本JS/10均具有一定的中和活性，为将该病毒株应用于犬流感的防治奠定基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104531607B
公开(公告)日：2017-11-07
申请号：CN201410836765.9
申请日：2014-12-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种犬原代细支气管上皮细胞及其在制备永生化细胞中的应用，属于生物技术领域。所述犬原代细支气管上皮细胞，取至45日龄的清洁级雄性比格犬。分离犬气管组织，剪碎后加入胶原酶及胰酶消化，得到完整的细支气管组织后培养所获细胞进一步通过间接免疫荧光试验检测角蛋白18表达，证实成功获得犬原代细支气管上皮细胞。构建含端粒酶基因（hTERT）的真核表达载体pEGFP‑hTERT，转染犬原代细支气管上皮细胞后，hTERT基因高表达，细支气管上皮细胞能够稳定传代培养至少20代。本发明制备的犬永生化细支气管上皮细胞，为研究犬流感病毒等犬类病原的感染机制提供了重要的生物材料。
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公开(公告)号：CN104293739A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201410535918.6
申请日：2014-10-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种针对H3N2犬流感病毒HA2蛋白的单克隆抗体，属于生物技术领域。利用2010年分离的H3N2犬流感病毒江苏分离株JS/10，接种10日龄SPF鸡胚，收集血凝效价大于等于6的尿囊液，纯化病毒接种MDCK细胞，皮内多点注射接种小鼠，细胞融合后，经三次ELISA检测已生成细胞集落的细胞上清，筛选出抗H3亚型杂交瘤细胞株mAbD7，中和抗体效价达1:12800，识别抗原鉴定证实其针对保守的HA2蛋白，抗体亚类为IgG2b。本发明制备针对H3N2犬流感病毒株JS/10的保守的HA2蛋白单克隆抗体，为H3N2犬流感病毒感染的治疗提供了重要的免疫制剂，具有潜在的应用前景。
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公开(公告)号：CN111704665B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN202010105415.0
申请日：2020-02-20
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/70 , C12N15/11 , A61K39/395 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种针对H3N2犬流感病毒的重组犬源化抗体scFv‑Fc，其包括，提取感染细胞的总RNA、反转录得cDNA；扩增VH、VL和Fc基因；然后进行PCR融合，提取重组质粒T‑scFv和/或T‑CE‑Fc；以所述T‑scFv和/或T‑CE‑Fc扩增出scFv和/或Fc，将所述scFv和/或所述Fc目的片段连接至克隆载体中，挑选阳性菌株；以所述scFv为模板，用CE‑scFv‑F和/或CE‑scFv‑R为引物，扩增，将产物与载体进行同源重组连接，完成后转化Rosetta感受态细胞，抗性平板筛选后，挑选阳性菌株命名ET‑32a‑scFv‑Fc。本发明可用于类似生物制剂的制备。本发明针对H3N2亚型CIV的重组犬源化抗体，为防控该病毒引起的犬群感染，以及应对其对人类健康和公共卫生构成的潜在威胁奠定物质基础。
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公开(公告)号：CN111704665A
公开(公告)日：2020-09-25
申请号：CN202010105415.0
申请日：2020-02-20
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/70 , C12N15/11 , A61K39/395 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种针对H3N2犬流感病毒的重组犬源化抗体scFv-Fc，其包括，提取感染细胞的总RNA、反转录得cDNA；扩增VH、VL和Fc基因；然后进行PCR融合，提取重组质粒T-scFv和/或T-CE-Fc；以所述T-scFv和/或T-CE-Fc扩增出scFv和/或Fc，将所述scFv和/或所述Fc目的片段连接至克隆载体中，挑选阳性菌株；以所述scFv为模板，用CE-scFv-F和/或CE-scFv-R为引物，扩增，将产物与载体进行同源重组连接，完成后转化Rosetta感受态细胞，抗性平板筛选后，挑选阳性菌株命名ET-32a-scFv-Fc。本发明可用于类似生物制剂的制备。本发明针对H3N2亚型CIV的重组犬源化抗体，为防控该病毒引起的犬群感染，以及应对其对人类健康和公共卫生构成的潜在威胁奠定物质基础。
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公开(公告)号：CN104531607A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410836765.9
申请日：2014-12-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种犬原代细支气管上皮细胞及其在制备永生化细胞中的应用，属于生物技术领域。所述犬原代细支气管上皮细胞，取至45日龄的清洁级雄性比格犬。分离犬气管组织，剪碎后加入胶原酶及胰酶消化，得到完整的细支气管组织后培养所获细胞进一步通过间接免疫荧光试验检测角蛋白18表达，证实成功获得犬原代细支气管上皮细胞。构建含端粒酶基因（hTERT）的真核表达载体pEGFP-hTERT，转染犬原代细支气管上皮细胞后，hTERT基因高表达，细支气管上皮细胞能够稳定传代培养至少20代。本发明制备的犬永生化细支气管上皮细胞，为研究犬流感病毒等犬类病原的感染机制提供了重要的生物材料。
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