公开(公告)号：CN104531607A

公开(公告)日：2015-04-22

申请号：CN201410836765.9

申请日：2014-12-29

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  谢星 ,  庞茂达 ,  郁磊 ,  林焱 ,  赵艳兵 ,  梁姗 ,  马可

IPC: C12N5/071 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明提供了一种犬原代细支气管上皮细胞及其在制备永生化细胞中的应用，属于生物技术领域。所述犬原代细支气管上皮细胞，取至45日龄的清洁级雄性比格犬。分离犬气管组织，剪碎后加入胶原酶及胰酶消化，得到完整的细支气管组织后培养所获细胞进一步通过间接免疫荧光试验检测角蛋白18表达，证实成功获得犬原代细支气管上皮细胞。构建含端粒酶基因（hTERT）的真核表达载体pEGFP-hTERT，转染犬原代细支气管上皮细胞后，hTERT基因高表达，细支气管上皮细胞能够稳定传代培养至少20代。本发明制备的犬永生化细支气管上皮细胞，为研究犬流感病毒等犬类病原的感染机制提供了重要的生物材料。

公开(公告)号：CN104531607B

公开(公告)日：2017-11-07

申请号：CN201410836765.9

申请日：2014-12-29

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  谢星 ,  庞茂达 ,  郁磊 ,  林焱 ,  赵艳兵 ,  梁姗 ,  马可

IPC: C12N5/071 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明提供了一种犬原代细支气管上皮细胞及其在制备永生化细胞中的应用，属于生物技术领域。所述犬原代细支气管上皮细胞，取至45日龄的清洁级雄性比格犬。分离犬气管组织，剪碎后加入胶原酶及胰酶消化，得到完整的细支气管组织后培养所获细胞进一步通过间接免疫荧光试验检测角蛋白18表达，证实成功获得犬原代细支气管上皮细胞。构建含端粒酶基因（hTERT）的真核表达载体pEGFP‑hTERT，转染犬原代细支气管上皮细胞后，hTERT基因高表达，细支气管上皮细胞能够稳定传代培养至少20代。本发明制备的犬永生化细支气管上皮细胞，为研究犬流感病毒等犬类病原的感染机制提供了重要的生物材料。

公开(公告)号：CN104293739A

公开(公告)日：2015-01-21

申请号：CN201410535918.6

申请日：2014-10-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  谢星 ,  庞茂达 ,  林焱 ,  赵艳兵 ,  梁珊 ,  陆承平

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/10 ,  A61K39/42 ,  A61P31/16

Abstract: 本发明提供了一种针对H3N2犬流感病毒HA2蛋白的单克隆抗体，属于生物技术领域。利用2010年分离的H3N2犬流感病毒江苏分离株JS/10，接种10日龄SPF鸡胚，收集血凝效价大于等于6的尿囊液，纯化病毒接种MDCK细胞，皮内多点注射接种小鼠，细胞融合后，经三次ELISA检测已生成细胞集落的细胞上清，筛选出抗H3亚型杂交瘤细胞株mAbD7，中和抗体效价达1:12800，识别抗原鉴定证实其针对保守的HA2蛋白，抗体亚类为IgG2b。本发明制备针对H3N2犬流感病毒株JS/10的保守的HA2蛋白单克隆抗体，为H3N2犬流感病毒感染的治疗提供了重要的免疫制剂，具有潜在的应用前景。

公开(公告)号：CN118634254A

公开(公告)日：2024-09-13

申请号：CN202311722420.6

申请日：2023-12-14

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  李刚 ,  庞茂达 ,  董雨豪 ,  黄昊

IPC: A61K35/76 ,  A61K31/496 ,  A61P31/04

Abstract: 本发明公开了一种噬菌体鸡尾酒组合物在制备治疗沙门菌药物中的应用，所述噬菌体鸡尾酒组合物由噬菌体(salmonella phage)YT30和噬菌体(salmonella phage)CX36组成，所述噬菌体(salmonella phage)YT30与噬菌体(salmonella phage)CX36的数量比为1：1。本发明噬菌体鸡尾酒组合物对浮游态和生物被膜状态的肠炎沙门菌的裂解均具有协同作用，并且在体内噬菌体鸡尾酒与恩诺沙星在治疗沙门菌感染鸭时能够在保证对感染鸭保护率的同时，大大减少恩诺沙星用量。

公开(公告)号：CN104293739B

公开(公告)日：2017-08-11

申请号：CN201410535918.6

申请日：2014-10-11

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  谢星 ,  庞茂达 ,  林焱 ,  赵艳兵 ,  梁珊 ,  陆承平

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/10 ,  A61K39/42 ,  A61P31/16

Abstract: 本发明提供了一种针对H3N2犬流感病毒HA2蛋白的单克隆抗体，属于生物技术领域。利用2010年分离的H3N2犬流感病毒江苏分离株JS/10，接种10日龄SPF鸡胚，收集血凝效价大于等于6的尿囊液，纯化病毒接种MDCK细胞，皮内多点注射接种小鼠，细胞融合后，经三次ELISA检测已生成细胞集落的细胞上清，筛选出抗H3亚型杂交瘤细胞株mAb D7，中和抗体效价达1:12800，识别抗原鉴定证实其针对保守的HA2蛋白，抗体亚类为IgG2b。本发明制备针对H3N2犬流感病毒株JS/10 的保守的HA2蛋白单克隆抗体，为H3N2犬流感病毒感染的治疗提供了重要的免疫制剂，具有潜在的应用前景。