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公开(公告)号：CN118425500A
公开(公告)日：2024-08-02
申请号：CN202410691843.4
申请日：2024-05-31
Applicant: 南京农业大学 , 南京农业大学三亚研究院 , 新疆畜牧科学院兽医研究所(新疆畜牧科学院动物临床医学研究中心)
IPC: G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N21/65
Abstract: 本发明提供一种检测牛结节性皮肤病病毒的试纸条及其制备方法和应用，属于兽医诊断试剂制备领域。该试纸条包括支撑底板，在所述支撑底板上依次设置有样品垫、硝基纤维素膜和吸水垫，所述硝基纤维素膜包括C线和T线，所述C线上设有山羊抗鼠IgG，所述T线上设有牛结节性皮肤病病毒单克隆抗体Ab2。配合所述试纸条使用的免疫探针，所述免疫探针是将表面修饰有DTNB的金纳米颗粒与单原子钨配位，然后再修饰牛结节性皮肤病病毒单克隆抗体抗体Ab1后所得。本发明试纸条配合免疫探针检测牛结节性皮肤病病毒，不仅灵敏度高、特异性高且成本低。
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公开(公告)号：CN118286196B
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202410711538.7
申请日：2024-06-04
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K31/216 , A61P17/00 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供丹酚酸A在制备抗牛结节性皮肤病病毒药物中的用途，属于抗病毒应用领域。本发明还提供抗牛结节性皮肤病病毒药物，含有丹酚酸A。体外实验证明，丹酚酸A具有显著的抗病毒活性，在10μM的浓度下即可展现出极强的抗牛结节性皮肤病病毒感染的作用。丹酚酸A是提取自中药丹参的天然产物，具有活血祛瘀，通经止痛，清心除烦，凉血消痈的功效，相比于激素、抗生素、化学合成药等，对机体生理功能无明显损伤等毒副作用。因此，丹酚酸A在制备抗牛结节性皮肤病病毒药物中有良好的前景。
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公开(公告)号：CN112522213B
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN202011576998.1
申请日：2020-12-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N7/00 , C12N5/071 , A61K39/145 , A61P31/16 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种分离的H3N2流感病毒株及其应用，所述病毒的HA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，NA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明的目的是提供一株复制增强的H3N2流感病毒CP15，该病毒骨架全部来源于其母本A/Canine/Jiangsu/06/2010病毒株，仅在HA和NA蛋白分别出现K156E和R201K的氨基酸突变，抗CP15病毒的血清抗体对CP15及亲本JS/10均具有一定的中和活性，为将该病毒株应用于犬流感的防治奠定基础。
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公开(公告)号：CN112522213A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011576998.1
申请日：2020-12-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N7/00 , C12N5/071 , A61K39/145 , A61P31/16 , G01N33/68 , G01N33/569 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种分离的H3N2流感病毒株及其应用，所述病毒的HA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，NA蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明的目的是提供一株复制增强的H3N2流感病毒CP15，该病毒骨架全部来源于其母本A/Canine/Jiangsu/06/2010病毒株，仅在HA和NA蛋白分别出现K156E和R201K的氨基酸突变，抗CP15病毒的血清抗体对CP15及亲本JS/10均具有一定的中和活性，为将该病毒株应用于犬流感的防治奠定基础。
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公开(公告)号：CN118271430B
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202410694268.3
申请日：2024-05-31
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N5/20 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供牛结节性皮肤病病毒的单克隆抗体及其应用，涉及医药技术和生物监测技术领域。该牛结节性皮肤病病毒的单克隆抗体，是由杂交瘤细胞株MP2E4分泌，所述杂交瘤细胞株MP2E4的保藏编号为CCTCC NO:C202393。本发明还提供检测牛结节性皮肤病病毒的阻断ELISA试剂盒，包括重组LSDV117蛋白和所述牛结节性皮肤病病毒的单克隆抗体；所述重组LSDV117蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明牛结节性皮肤病病毒的单克隆抗体，具有良好的体外中和病毒的能力，采用以该单克隆抗体建立的阻断ELISA试剂盒检测牛结节皮肤病病毒时，快速、高效，灵敏度、重复性和特异性较好。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118271430A
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202410694268.3
申请日：2024-05-31
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N5/20 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/42 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供牛结节性皮肤病病毒的单克隆抗体及其应用，涉及医药技术和生物监测技术领域。该牛结节性皮肤病病毒的单克隆抗体，是由杂交瘤细胞株MP2E4分泌，所述杂交瘤细胞株MP2E4的保藏编号为CCTCC NO:C202393。本发明还提供检测牛结节性皮肤病病毒的阻断ELISA试剂盒，包括重组LSDV117蛋白和所述牛结节性皮肤病病毒的单克隆抗体；所述重组LSDV117蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明牛结节性皮肤病病毒的单克隆抗体，具有良好的体外中和病毒的能力，采用以该单克隆抗体建立的阻断ELISA试剂盒检测牛结节皮肤病病毒时，快速、高效，灵敏度、重复性和特异性较好。
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公开(公告)号：CN117568279A
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202310729246.1
申请日：2023-06-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供H3N2犬流感病毒NA蛋白真核表达稳转细胞株、其建立方法及应用，具体为稳定表达NAGFP融合蛋白的人肺癌稳转细胞A549NAGFP。在H3N2犬流感病毒的NA基因的C端融合GFP蛋白基因，并将融合基因与真核表达载体pcDNA3.1（+）连接，构建pcDNA3.1NAGFP重组表达质粒，同时构建pcDNA3.1GFP对照质粒，分别将质粒转染进入真核细胞A549，经G418筛选并亚克隆得到人肺癌稳转细胞A549NAGFP与A549GFP。对稳转细胞株表达产物进行亚细胞定位及蛋白功能验证，结果表明GFP蛋白主要定位于细胞核，NAGFP融合蛋白主要定位于细胞质，并且经Western Blot验证NAGFP融合蛋白能够与GFP标签抗体及H3N2犬流感病毒全病毒抗体结合，具有良好的反应原性。
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公开(公告)号：CN117384925A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202211510854.5
申请日：2022-11-29
IPC: C12N15/53 , C12N15/11 , C12N5/10 , C12N15/867 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种双荧光素报告IFN‑β启动子活性慢病毒质粒、报告细胞系及构建方法，本发明以plvx质粒为骨架通过引入Gluc分泌性荧光素酶基因作为报告基因，并且在该基因的下游反向串联Luc基因作为内参基因以归一化实验结果，合成了用于报告IFN‑β启动子活性的DNA片段组合物、构建了pIFNβ活性双荧光素酶报告系统稳转细胞系。本发明不仅解决了因为转染不同质粒的效率和细胞状态带来的实验差异，同时将分泌性荧光素酶报告基因和慢病毒包装系统结合使得整套系统更加适合高通量持续性实验的检测。
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公开(公告)号：CN119410802A
公开(公告)日：2025-02-11
申请号：CN202411655403.X
申请日：2024-11-19
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/46
Abstract: 本发明公开了一种基于RPA和CRISPR‑Cas12a的无乳链球菌快速检测试剂盒及其应用，包括重组酶聚合酶扩增技术的扩增引物、CRISPR RNA、ssDNA探针和Cas12a蛋白；其中，所述重组酶聚合酶扩增技术的扩增引物的上游引物序列如SEQ ID NO：1所示；下游引物序列如SEQ ID NO：2所示。本发明实现了无乳链球菌快速、灵敏、准确、特异的检测。
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公开(公告)号：CN117165616A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202310924840.6
申请日：2023-07-26
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供一种乳酸菌组成型异源蛋白高表达表面展示质粒系统及应用，通过设计4种表达盒序列，构建了相应的质粒载体，筛选得到一种可以显著提高外源表达蛋白产量乳酸菌‑大肠杆菌穿梭质粒系统pHC，并且该质粒表达系统可以在乳酸乳球菌内实现外源蛋白分泌表达。然而对于杆菌只能在细胞内表达，无法分泌到培养基中以及在细菌细胞壁表面表达，进而对其进行进一步改造，在表达盒的N端引入可替换式LPXTG motif(LPQTG)基序获得pHCL质粒表达系统，该质粒表达系统可在宿主菌的内源性分选酶作用下将外源蛋白展示到细胞壁表面。此外该质粒表达系统可以根据宿主菌分选酶识别LPXTG基序特异性，通过分子生物学手段替换不同的LPXTG基序以实现异源蛋白表面展示效果最大化。
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