一种DBAT突变酶D166HR363H及其应用

    公开(公告)号:CN105524892A

    公开(公告)日:2016-04-27

    申请号:CN201610028306.7

    申请日:2016-01-15

    CPC classification number: C12N9/1029 C12N2800/101 C12P17/02

    Abstract: 本发明公开一种DBAT突变酶D166HR363H及其应用。该突变酶是氨基酸序列为SEQ ID NO:2的DBAT酶的第166位氨基酸由Asp变为His,第363位氨基酸由Arg变为His;其氨基酸序列为SEQ ID NO:8。该突变酶在利用乙酰辅酶A的催化效率上比野生型酶提高了39倍,大大提高了乙酰辅酶A的使用率和产物巴卡亭Ⅲ的产量。同时,为降低生产成本,本发明寻找了7种廉价的酰基供体,突变酶均能高效利用这些酰基供体,其中对乙酸乙烯酯的利用率提高了143倍,能作为替代昂贵的乙酰辅酶A用于制备巴卡亭Ⅲ。迄今为止,在生物合成巴卡亭Ⅲ的研究中,并未发现有以非植物辅酶类为酰基供体并体现高利用率的研究。

    一种多基因载体组装方法与应用

    公开(公告)号:CN103114102B

    公开(公告)日:2014-12-03

    申请号:CN201310034775.6

    申请日:2013-01-29

    Abstract: 本发明公开了一种多基因载体组装方法与应用,属于基因工程技术领域。该方法包括如下步骤(1)采用含有酶切位点的重叠引物对三个基因片段进行PCR扩增,通过1.33×连接buffer将三个片段连接成重组质粒;(2)重组质粒含有单一酶切位点,在每个插入基因对应的重叠引物内加上质粒单一酶切位点末端碱基,将重组质粒用相应的酶进行酶切,依次用1.33×连接buffer将重组质粒酶切片段和PCR扩增片段连接成新的重组质粒。(1)中引入的多个酶切位点,可以为后续的多基因酶切连接做基础;(2)不仅可以减少质粒单酶切后自连以及目的基因反向连接,而且只需要一个合适的酶切位点,就可以连接所有的目的基因片段。

    一种筛选ε-聚赖氨酸产生菌的方法

    公开(公告)号:CN102094066B

    公开(公告)日:2013-07-31

    申请号:CN201010585034.3

    申请日:2010-12-13

    CPC classification number: Y02P20/582

    Abstract: 本发明属于微生物发酵工程领域,涉及一种筛选ε-聚赖氨酸产生菌的方法,是采用在不含指示剂的初筛培养基表面加入Dragendorff试剂,通过与产透明圈的菌株周围形成砖红色聚集圈来筛选ε-聚赖氨酸产生菌。本发明改进了原有的筛选方法,可直观高效的筛选ε-聚赖氨酸产生菌。本发明工艺简单,有效缩短了筛选周期和工作量,筛选效率较高。

    一种杏鲍菇素牛肉食品及其制备方法

    公开(公告)号:CN102599480A

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN201210058756.2

    申请日:2012-03-08

    Abstract: 本发明公开了一种杏鲍菇素牛肉食品及其制备方法。所述杏鲍菇素牛肉食品是以每1000克的杏鲍菇条,配10~30克牛肉粉和其他调味辅料混合即得;所述杏鲍菇条采用新鲜的杏鲍菇废弃小菇或边菇经清洗、切分、干燥步骤制备得到,所述干燥是将切分好的杏鲍菇于55~70℃烘箱内干燥1.5~3h即得。本发明在保持杏鲍菇固有质地脆嫩的口感上带来更丰富的味道和稳定的贮存保障。本发明在综合利用杏鲍菇废弃菇减少资源浪费的同时,加工工艺保留杏鲍菇鲜品原有口感的基础上对口味作了创新,产品也弥补了在现今即食类市场上杏鲍菇即食类产品品种单一的缺陷,将拥有广阔的市场前景。

    一种重组多功能纤维素酶的生产方法

    公开(公告)号:CN102093959A

    公开(公告)日:2011-06-15

    申请号:CN201010585035.8

    申请日:2010-12-13

    Abstract: 本发明属于微生物发酵工程领域,涉及重组多功能纤维素酶的制备方法,其特征是将多功能纤维素酶基因遗传转化银耳芽孢获得银耳芽孢工程菌株,作为生产菌株,采用甘蔗渣粉为最佳培养基,在优化的培养条件下摇瓶发酵制备重组多功能纤维素酶。甘蔗渣培养基配方为甘蔗渣粉17-23g/L,酵母膏3.1-4.9g/L,磷酸氢二钾1g/L,磷酸二氢钾0.46g/L,硫酸镁1g/L,pH值5.0-5.5。最佳培养条件为:培养温度25℃、培养时间4d、摇床转速180r/min。最佳产酶量为:Xylanase酶活1.09×105U/L,CMCase酶活3.7×104U/L。本发明的方法能有效地使银耳芽孢工程菌株利用廉价的农业废弃物甘蔗渣生产重组多功能纤维素酶。

    一种草菇和杏鲍菇原生质体融合的方法

    公开(公告)号:CN101985617A

    公开(公告)日:2011-03-16

    申请号:CN201010523452.X

    申请日:2010-10-26

    Abstract: 本发明提供了一种草菇和杏鲍菇原生质体融合的方法,是将草菇和杏鲍菇的菌丝酶解制取原生质体,以杏鲍菇原生质体热灭活为标记,采用PEG介导的化学方法,将草菇和杏鲍菇原生质体融合,利用0℃低温筛选融合子,并进行出菇实验,获得融合菌株。本发明方法能有效地把草菇和杏鲍菇原生质体融合,获得具有杏鲍菇特性的高产耐低温的草菇新菌株。本发明为两种性状互补明显的食用菌科间远缘融合创制目标新菌株提供了一种有效方法。

    一种转基因食用菌及其制备方法

    公开(公告)号:CN1800347A

    公开(公告)日:2006-07-12

    申请号:CN200510126406.5

    申请日:2005-12-08

    Abstract: 本发明公开了一种转基因食用菌,该转基因食用菌基因组中整合了抗冷冻蛋白基因afp。本发明进一步公开了该转基因食用菌的制备方法。本发明为食用菌的遗传育种开辟一条新的育种途径——基因工程育种;并使受到低温限制的高温型食用菌的生产、新鲜菌的流通、低温冷冻保鲜以及菌种的低温贮藏等问题得到解决。

    一种高含EGT的硫因灵芝工厂化固体发酵菌质及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN118146961A

    公开(公告)日:2024-06-07

    申请号:CN202410484777.3

    申请日:2024-04-22

    Abstract: 本发明公开一种高含EGT的硫因灵芝工厂化固体发酵菌质及其制备方法和应用。本发明以硫因灵芝FQ23为出发菌株,通过前体氨基酸优化进一步提高了灵芝固体发酵体系中EGT的含量;小麦菌种替代种子液,优化了发酵工艺,降低了发酵成本;建立了高产EGT的灵芝工厂化发酵体系,提高了发酵效率;使每克菌质干重的EGT产量达到了(1.673±0.08)mg/g DW;采用漆酶在发酵过程中变化规律来快速检测EGT的产量变化,实时停止发酵,保持产品质量的稳定;硫因灵芝固体发酵菌质除了高含EGT外还含有多种活性成分,能够多靶点防治老年痴呆症,为我国进入老龄化时期的广大老人免于老年痴呆症的困扰提供物质帮助。

Patent Agency Ranking