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公开(公告)号:CN108676915A
公开(公告)日:2018-10-19
申请号:CN201810501992.4
申请日:2018-05-23
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2563/107 , C12Q2521/107
Abstract: 本发明属于动物病原检测技术领域,涉及一种基因VI型新城疫病毒强毒株的荧光RT‑PCR检测方法,先设计针对基因VI型新城疫病毒强毒株F基因的荧光RT‑PCR扩增引物和探针;再提取待测样品核糖核酸(RNA),用扩增引物和探针进行荧光RT‑PCR反应,根据荧光RT‑PCR扩增曲线和Ct值判定样品中是否含有基因VI型新城疫病毒强毒株;本发明具有特异性强、灵敏度高、操作简便等特点,可实现基因VI型新城疫病毒强毒株快速检测,满足疫病早期诊断和疫情监测的需要,便于基层操作和推广应用。
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公开(公告)号:CN104031998B
公开(公告)日:2017-09-01
申请号:CN201410246787.X
申请日:2014-05-30
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明涉及一种PCR试剂盒中防止阳性对照污染待测样品的方法,通过具体分析阳性模板核酸序列,在特定条件下下将用做阳性对照的模板缩短50‑100bp左右的碱基,完成相关PCR反应后,通过琼脂糖凝胶电泳即可观察和区分出待检样品的阳性条带是真阳性还是因操作失误造成待检样品中污染阳性对照而产生的假阳性。本发明能不改变反应过程的情况下直观反映各种样品检测的真实信息,不会出现假阳性。
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公开(公告)号:CN103290143B
公开(公告)日:2014-10-22
申请号:CN201310156372.9
申请日:2013-04-28
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明涉及一种用于禽肿瘤病检测的PCR复合参照物及其制备方法,及其用于检测禽肿瘤病的方法和试剂盒。本发明所涉及的DNA参照物可专门用于马立克氏病、禽白血病、禽网织内皮增生症的PCR检测,该参照物集中了这三种疾病的基因特征,可以代替这三种病毒的病原而作为检测所必需的参照样品。该PCR复合参照物既容易培养又具有生物安全性,可以解决这三种疾病的PCR诊断技术的困难问题。本发明具有一定的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN103952494A
公开(公告)日:2014-07-30
申请号:CN201410078254.5
申请日:2014-03-06
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明涉及一种裂谷热病毒RT-LAMP的检测方法检测过程中:步骤a,建立如下扩增反应体系:5μl RNA样品、2.5μl Bst DNA聚合酶缓冲液(10x)、1μl Bst DNA聚合酶(8U/μl)、1μl AMV反转录酶(10U/μl)、1μld NTP(25mmol/μl)、5μl Betaine(5μmol/μl)、1μl Mg SO4(100nmol/μl)、对应于L基因的四条引物各1μl引物浓度为F3与B3:5pmol/μl、BIP与FIP:70pmol/μl、H2O补足至25μl;步骤b,将上述各组分混匀后,在65℃水浴中反应1.5~2h;步骤c,用1.5%琼脂糖凝胶进行电泳,然后观察结果。本发明新型的RT-LAMP技术具有快速灵敏、操作简单,安全性高,价格低廉,不需要特殊仪器设备等优点,特别适用于基层检验检疫机构普及应用,为裂谷热病毒早期诊断提供了一种快速、使用的诊断方法。
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公开(公告)号:CN103290143A
公开(公告)日:2013-09-11
申请号:CN201310156372.9
申请日:2013-04-28
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明涉及一种用于禽肿瘤病检测的PCR复合参照物及其制备方法,及其用于检测禽肿瘤病的方法和试剂盒。本发明所涉及的DNA参照物可专门用于马立克氏病、禽白血病、禽网织内皮增生症的PCR检测,该参照物集中了这三种疾病的基因特征,可以代替这三种病毒的病原而作为检测所必需的参照样品。该PCR复合参照物既容易培养又具有生物安全性,可以解决这三种疾病的PCR诊断技术的困难问题。本发明具有一定的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN118086230A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410340669.9
申请日:2024-03-25
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Inventor: 戈胜强 , 王志亮 , 吴晓东 , 吕艳 , 左媛媛 , 韩秀琚 , 张永强 , 徐天刚 , 任炜杰 , 于松梅 , 韩乃君 , 刘雨田 , 屈海龙 , 巩明霞 , 赵永刚 , 郑冬霞 , 胡永新 , 赵云玲 , 迟田英 , 王英丽 , 包静月 , 李金明
Abstract: 本发明提供一种多基因家族大片段基因缺失的非洲猪瘟弱毒株及其构建方法和应用,所提供的自然弱毒株,所述的自然弱毒株相比于非洲猪瘟强毒株,其基因组缺失左侧可变区从MGF110‑9L到MGF360‑14L之间的核酸片段。本发明还提供一种非洲猪瘟病毒弱毒株的构建方法,是将非洲猪瘟病毒强毒株的左侧可变区从MGF110‑9L到MGF360‑14L之间的核酸片段去除后构建弱毒株。本发明所提供的自然缺失株和人工构建的基因缺失株均在多基因家族的核心区域发生大范围缺失,且毒株遗传稳定,无重组和突变发生,因此该毒株具备天然致弱属性,对于基础研究和疫苗研制具有重要意义。
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公开(公告)号:CN113943833B
公开(公告)日:2022-09-09
申请号:CN202111266568.4
申请日:2021-10-28
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Inventor: 南文龙 , 陆游 , 巩明霞 , 陈义平 , 吴晓东 , 李金明 , 李林 , 王喜乐 , 师丽刚 , 张永强 , 赵永刚 , 屈海龙 , 邹艳丽 , 赵晶晶 , 哈达 , 特木尔巴根 , 张雨初 , 王志亮
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种牛结节性皮肤病病毒LSDV、山羊痘病毒GTPV和绵羊痘病毒SPPV的快速检测方法,以及应用于检测方法的Taqman‑MGB探针三重荧光PCR引物对和探针组。其中用于羊痘病毒属CaPV检测的正向引物,其序列为SEQ ID NO:1、用于羊痘病毒属CaPV检测的反向引物,其序列为SEQ ID NO:2;用于检测牛结节性皮肤病病毒LSDV的探针,其序列为SEQ ID NO:3;用于检测山羊痘病毒GTPV的探针,其序列为SEQ ID NO:4;用于检测绵羊痘病毒SPPV的探针,其序列为SEQ ID NO:5。本发明的方法检测的灵敏度高、特异性好、快速高通量;且检测方法操作简便。
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公开(公告)号:CN113186358A
公开(公告)日:2021-07-30
申请号:CN202110668447.6
申请日:2021-06-16
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种可同时检测羊痘病毒属牛结节性皮肤病、山羊痘与绵羊痘的Cycleave荧光PCR引物对、探针及应用该引物对和探针的检测方法。本发明所提供的引物对和探针组,其正向引物的序列为SEQID NO:1;反向引物的序列为SEQ ID NO:2;探针的序列为SEQ ID NO:3,且探针的第8位为RNA碱基。本发明所提供的Cycleave荧光PCR检测羊痘病毒属病毒的引物、探针及方法具有检测灵敏度高、特异性好、高通量和操作简便的优点。
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公开(公告)号:CN110592285A
公开(公告)日:2019-12-20
申请号:CN201911002005.7
申请日:2019-10-21
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心 , 江苏奇天基因生物科技有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种RAA荧光法检测尼帕病毒的引物、探针及检测方法,其中引物和探针适用于RAA荧光法检测,并且能够准确地检测出尼帕病毒质粒,与亨得拉病毒质粒、口蹄疫病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒、猪圆环病毒、流行性乙型脑炎病毒、蓝耳病毒、猪瘟病毒、传染性胃肠炎病毒无交叉反应,特异性达100%;检测方法快速、容易实现高通量,同时降低了检测时间和检测成本,本发明提供的基于RAA荧光法快速检测尼帕病毒DNA的方法,灵敏度高,每反应检测灵敏度在95%的概率下达到74copies/反应。
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公开(公告)号:CN105986046A
公开(公告)日:2016-10-05
申请号:CN201610118137.6
申请日:2016-03-02
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
CPC classification number: C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/113 , C12Q2521/107
Abstract: 本发明属于动物病原检测技术领域,涉及一种新城疫病毒强毒株的荧光RT-PCR检测方法,先设计针对基因III、VI、VII、XII型新城疫病毒强毒株F基因的荧光RT-PCR扩增引物和探针;再提取待测样品核糖核酸(RNA),用扩增引物和探针进行荧光RT-PCR反应,根据荧光RT-PCR扩增曲线和Ct值判定样品中是否含有新城疫病毒强毒株;本发明具有特异性强、灵敏度高、操作简便等特点,可实现新城疫快速检测,满足早期诊断和出入境快速检验检疫的需要,便于基层操作和推广应用。
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