一种裂谷热病毒RT-LAMP的检测方法

    公开(公告)号:CN103952494A

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201410078254.5

    申请日:2014-03-06

    CPC classification number: C12Q1/70 C12Q1/6844 C12Q2531/119

    Abstract: 本发明涉及一种裂谷热病毒RT-LAMP的检测方法检测过程中:步骤a,建立如下扩增反应体系:5μl RNA样品、2.5μl Bst DNA聚合酶缓冲液(10x)、1μl Bst DNA聚合酶(8U/μl)、1μl AMV反转录酶(10U/μl)、1μld NTP(25mmol/μl)、5μl Betaine(5μmol/μl)、1μl Mg SO4(100nmol/μl)、对应于L基因的四条引物各1μl引物浓度为F3与B3:5pmol/μl、BIP与FIP:70pmol/μl、H2O补足至25μl;步骤b,将上述各组分混匀后,在65℃水浴中反应1.5~2h;步骤c,用1.5%琼脂糖凝胶进行电泳,然后观察结果。本发明新型的RT-LAMP技术具有快速灵敏、操作简单,安全性高,价格低廉,不需要特殊仪器设备等优点,特别适用于基层检验检疫机构普及应用,为裂谷热病毒早期诊断提供了一种快速、使用的诊断方法。

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