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公开(公告)号：CN111518791B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN202010299239.9
申请日：2018-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖水解酶，属于基因工程和酶工程领域。本发明对来源于Xanthomonas axonopodis pv.glycines、Janthinobacterium agaricidamnosum NBRC 102515、Caulobacter crescentus NA1000 CB15的蔗糖水解酶进行改造，分别对其第271位或第279位或第281位的丝氨酸残基进行定点突变，获得的单突变体酶的转苷活性较野生型蔗糖水解酶升高。这一发明有助于对于糖苷水解酶转苷和水解机理的研究，亦可应用于糖苷水解酶工业生产多聚糖。
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公开(公告)号：CN113584005A
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202110997938.5
申请日：2021-08-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氨肽酶的制备及其在蛋白脱苦中的应用，属于酶工程技术领域。本发明提供了一种氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的氨肽酶在酵母菌表达，其酶活达545U/mL。此氨肽酶对蛋白的脱苦能力强，将此蛋白水解酶以700U/g蛋白的添加量就能够消除大豆蛋白、鱼蛋白和虾蛋白的苦味，反应条件温和、并且不改变肽的其他特性。因此，本发明的氨肽酶在蛋白脱苦中具备极高的应用前景。
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公开(公告)号：CN112094781B
公开(公告)日：2021-08-24
申请号：CN202011031718.9
申请日：2020-09-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株解淀粉芽孢杆菌及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一株产胞外蛋白能力强的解淀粉芽孢杆菌WS；将此菌株接种至发酵培养基中发酵48h，即可使发酵上清中蛋白的表达量高达0.6mg/mL，比现有模式菌株B.amyloliquefaciens DSM7高0.2～0.3mg/mL；将以此菌株为宿主表达编码麦芽三糖淀粉酶的基因构建得到的重组菌接种至发酵培养基中发酵48h，即可使发酵上清中麦芽三糖淀粉酶的酶活高达155.28U/mL；将以此菌株为宿主表达编码普鲁兰酶的基因构建得到的重组菌接种至发酵培养基中发酵72h，即可使发酵上清中普鲁兰酶的酶活高达5.66U/mL。
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公开(公告)号：CN109402081B
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN201811426701.6
申请日：2018-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种淀粉蔗糖酶，属于基因工程和酶工程领域。本发明分别对来源于Deinococcus geothermalis的淀粉蔗糖酶第285位丙氨酸残基进行定点突变，对来源于Alteromonas macleodii的淀粉蔗糖酶第287位丙氨酸残基进行定点突变，对来源于Neisseria polysaccharea的淀粉蔗糖酶第295位丙氨酸残基进行定点突变，获得的单突变体酶的水解活性较野生型淀粉蔗糖酶升高。这一发明有助于对于糖苷水解酶转苷和水解机理的研究，亦可应用于糖苷水解酶工业生产多聚糖。
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公开(公告)号：CN112553134A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011601201.9
申请日：2020-12-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了本发明涉及一种在枯草芽孢杆菌中表达α‑淀粉酶的方法，属于基因工程以及生物工程技术领域。本发明通过敲除枯草芽孢杆菌WS9基因组上的hrcA基因，获得了枯草芽孢杆菌基因工程WHS9；通过优化Sec分泌系统元件，发现共表达编码Sec分泌系统中膜转运通道的主要成分SecYEG的基因最有利于α‑淀粉酶在枯草芽孢杆菌WHS9中的重组表达；通过筛选到的信号肽平衡了α‑淀粉酶在枯草芽孢杆菌WHS9中的整个分泌过程，最终获得的枯草芽孢杆菌重组菌WHS9GSAB经摇瓶培养后胞外α‑淀粉酶活性为2835.1U/mL，经3‑L罐发酵培养后胞外α‑淀粉酶活性可高达35779.5U/mL。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108753747B
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN201810568791.6
申请日：2018-06-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性和海藻糖产量提高的MTSase突变体，属于酶工程以及蛋白质工程技术领域。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体是通过将麦芽寡糖基海藻糖合成酶的一个氨基酸位点进行突变，得到了与亲本麦芽寡糖基海藻糖合成酶相比更高的热稳定性、更低的加酶量以及更高的产海藻糖转化率。本发明的麦芽寡糖基海藻糖合成酶突变体在50℃的半衰期比野生型增加12h，是野生型的1.3倍。
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公开(公告)号：CN108102996B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201810145993.X
申请日：2018-02-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种在枯草芽孢杆菌中高效表达麦芽糖淀粉酶的方法，属于基因工程及发酵工程领域。本发明通过检索信号肽序列，用Bacillus subtilis 168基因组PCR出各信号肽，与目的基因麦芽糖淀粉酶及载体pHY300PLK进行重组构建，并转化至枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CCTCC M 2016536，得到三株重组枯草芽孢杆菌。以重组枯草芽孢杆菌为菌种，发酵生产麦芽糖淀粉酶。并通过确定氮源、碳源、发酵条件等优化最佳摇瓶条件，提高重组酶酶活。本发明的优点在于确定了在枯草芽孢杆菌中能高效表达麦芽糖淀粉酶的信号肽，并用食品安全的枯草芽孢杆菌为表达宿主重组表达麦芽糖淀粉酶，对重组菌产酶进行了发酵优化，表达量较好，得到的发酵上清液酶活为396U/mL，并且发酵原料来源广泛，生产成本较低。
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公开(公告)号：CN110055233B
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN201910318019.3
申请日：2019-04-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的MTSase突变体及其应用，属于酶工程以及蛋白质工程技术领域。本发明的MTSase突变体S361R、S444E、S361R/S444E、S361K/S444E和G415P/S361R/S444E在60℃处理10min后的残余酶活分别为70.3％、50.1％、83.5％、65.9％、以及100％，是野生型的1.6、1.1、1.9、1.5以及2.3倍，其中，S361R/S444E和G415P/S361R/S444E在60℃的半衰期分别是14.9min和90.8min，分别是野生型的3.2和19.7倍，说明本发明的MTSase突变体热稳定性较野生型有了显著的改善。
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公开(公告)号：CN111607576A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010376738.3
申请日：2018-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了环糊精葡萄糖基转移酶突变体T383A及其制备方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明通过对环糊精葡萄糖基转移酶进行突变，得到了环糊精葡萄糖基转移酶歧化活力更高的突变体。突变T383A的摇瓶发酵酶歧化活力分别为野生酶的1.32倍。本发明对环糊精葡萄糖基转移酶工业化生产具有一定意义，并提高了该酶的在食品、医药、化工行业中的应用潜力。
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公开(公告)号：CN111518791A
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN202010299239.9
申请日：2018-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖水解酶，属于基因工程和酶工程领域。本发明对来源于Xanthomonas axonopodis pv.glycines、Janthinobacterium agaricidamnosum NBRC 102515、Caulobacter crescentus NA1000 CB15的蔗糖水解酶进行改造，分别对其第271位或第279位或第281位的丝氨酸残基进行定点突变，获得的单突变体酶的转苷活性较野生型蔗糖水解酶升高。这一发明有助于对于糖苷水解酶转苷和水解机理的研究，亦可应用于糖苷水解酶工业生产多聚糖。
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