一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶生产菌株及其应用

    公开(公告)号:CN105802897B

    公开(公告)日:2019-02-12

    申请号:CN201610363798.5

    申请日:2016-05-26

    Inventor: 吴敬 宿玲恰 韩唱

    Abstract: 本发明公开了一种D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶生产菌株及其应用,属于生物工程和酶工程技术领域。本发明的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶生产菌为一株Clostridium sp,是从森林附近土壤中经菌株富集、平板菌落特征初筛,采用摇瓶复筛,测定酶活力,经酶活测定,比较D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶活性大小而得到。该菌生产的D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶可以D‑果糖为底物催化生产D‑阿洛酮糖,温度范围广、没有副产物生成、反应方法简便、低能耗、物料成本低等优点,加入Co2+后60℃半衰期长达9h,有较强的耐热优势,而且在高温60℃条件下以果葡糖浆为底物进行反应转化率最高可达33.8%。该菌可用于化妆品、食品、药品等领域。

    一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法

    公开(公告)号:CN109371006A

    公开(公告)日:2019-02-22

    申请号:CN201811517830.6

    申请日:2018-12-12

    Abstract: 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法,属于生物工程技术领域。本发明以重组枯草芽孢杆菌SPase/pBSMuL3作为生产菌株,LX-1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为7.75U/g,酶活回收率达到110.85%;LX-1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为9.54U/g,酶活回收率达到101.82%。在相同的转化时间内,以0.5M蔗糖和0.5M葡萄糖为底物连续操作11次,氨基化树脂LX-1000EA固定化SPase保持39.15%的转化率,94%的残留酶活;氨基化树脂LX-1000HA固定化SPase保持42.5%的转化率,91%的残留酶活。结果表明,该固定化方法操作简单,固定化酶酶活没有损失,且应用效果很好,具有很高的工业化应用潜力。

    一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法

    公开(公告)号:CN109371006B

    公开(公告)日:2021-12-14

    申请号:CN201811517830.6

    申请日:2018-12-12

    Abstract: 本发明公开了一种蔗糖磷酸化酶的固定化方法,属于生物工程技术领域。本发明以重组枯草芽孢杆菌SPase/pBSMuL3作为生产菌株,LX‑1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为7.75U/g,酶活回收率达到110.85%;LX‑1000EA固定化蔗糖磷酸化酶的酶活为9.54U/g,酶活回收率达到101.82%。在相同的转化时间内,以0.5M蔗糖和0.5M葡萄糖为底物连续操作11次,氨基化树脂LX‑1000EA固定化SPase保持39.15%的转化率,94%的残留酶活;氨基化树脂LX‑1000HA固定化SPase保持42.5%的转化率,91%的残留酶活。结果表明,该固定化方法操作简单,固定化酶酶活没有损失,且应用效果很好,具有很高的工业化应用潜力。

    一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶生产菌株及其应用

    公开(公告)号:CN105802897A

    公开(公告)日:2016-07-27

    申请号:CN201610363798.5

    申请日:2016-05-26

    Inventor: 吴敬 宿玲恰 韩唱

    CPC classification number: C12R1/145 C12N9/90 C12P19/02 C12P19/24

    Abstract: 本发明公开了一种D?阿洛酮糖?3?差向异构酶生产菌株及其应用,属于生物工程和酶工程技术领域。本发明的D?阿洛酮糖?3?差向异构酶生产菌为一株Clostridium sp,是从森林附近土壤中经菌株富集、平板菌落特征初筛,采用摇瓶复筛,测定酶活力,经酶活测定,比较D?阿洛酮糖?3?差向异构酶活性大小而得到。该菌生产的D?阿洛酮糖?3?差向异构酶可以D?果糖为底物催化生产D?阿洛酮糖,温度范围广、没有副产物生成、反应方法简便、低能耗、物料成本低等优点,加入Co2+后60℃半衰期长达9h,有较强的耐热优势,而且在高温60℃条件下以果葡糖浆为底物进行反应转化率最高可达33.8%。该菌可用于化妆品、食品、药品等领域。

    一种利用角质酶突变体促进重组蛋白胞外表达的方法

    公开(公告)号:CN114410605B

    公开(公告)日:2023-07-04

    申请号:CN202210090842.5

    申请日:2020-11-03

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 吴敬 宿玲恰 黄燕

    Abstract: 本发明公开了一种利用角质酶突变体促进重组蛋白胞外表达的方法,属于生物工程、酶工程、微生物工程技术领域。本发明采用角质酶突变体和目标蛋白在枯草芽孢杆菌中共表达,目标蛋白包括木糖异构酶、4,6‑α‑葡萄糖基转移酶、4‑α‑糖基转移酶、海藻糖合酶和分支酶等,可实现胞内定位目标蛋白胞外表达,提高生产效率、简化后提取工艺,具有较高的学术意义和应用价值。

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