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公开(公告)号：CN102127556A
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN201010581342.9
申请日：2010-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株的新型木聚糖酶基因完整mRNA和DNA序列的克隆方法，其核苷酸序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。生物信息学分析表明该木聚糖酶属于糖苷水解酶第10家族，命名为Aus Xyn10A，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3，相应的基因命名为Aus xyn10A。本发明还公开了木聚糖酶工程菌的构建以及重组木聚糖酶的高效表达和纯化的方法。作为一种新型酶制剂，该木聚糖酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN101555482A
公开(公告)日：2009-10-14
申请号：CN200910024840.0
申请日：2009-02-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 人甲状旁腺激素(1－34)(hPTH(1－34))二联体与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白及其制备技术的发明属于长效重组融合蛋白技术领域。本发明的融合蛋白包括与人甲状旁腺激素(1－34)至少85％序列同源的二联体的第一区和与人血清白蛋白至少85％序列同源的第二区。利用两次重叠PCR技术，现将两个hPTH(1－34)进行拼接得到二联体，再将二联体与HSA拼接，中间不加入任何连接肽。该融合蛋白可以在不改变融合蛋白特性的前提下，进行个别氨基酸残基的取代、缺失或加入，它们在保留了人甲状旁腺激素激活受体和刺激骨重建的作用的基础上，显著延长了在体内的半衰期，是药学领域中，能够治疗骨质疏松症的，有良好前景的药用融合蛋白。
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公开(公告)号：CN101067129A
公开(公告)日：2007-11-07
申请号：CN200710022405.5
申请日：2007-05-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用宇佐美曲霉产业化生产木聚糖酶的方法，属于酶工程技术领域。本发明以蔗渣或玉米芯、麸皮和豆饼粉等农作物废弃物为发酵基料，并添加适量的无机盐、表面活性剂和自来水等，采用30M3固态发酵罐，利用宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001菌株固态发酵产业化生产木聚糖酶，本发明提供了发酵培养基配方和发酵条件，成熟发酵曲料经45～50℃热风烘干(干曲含水量8％左右)，木聚糖酶活性达到7783～9616IU/g干曲，高于目前国内水平。
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公开(公告)号：CN111471662B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202010288719.5
申请日：2020-04-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及SlEH1突变体及其在对映归一水解环氧化物中的应用，属于酶工程与生物催化领域。本发明通过番茄来源的环氧水解酶(SlEH1)的106和189位进行组合点突变，获得对映归一性提高的突变体。突变体SlEH1W106T/F189L归一性合成(R)‑1,2‑辛二醇的eep值提高至95.4％，相比于野生型酶提高了44.1％；并且SlEH1W106T/F189L可单次归一性合成400mmol/L(R)‑1,2‑辛二醇，最终得到(R)‑1,2‑辛二醇的eep>99.0％，总产率为82.6％，是目前报道的最佳催化剂。并且四种突变体对另外五种脂肪类环氧化物的归一性也有明显提高。
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公开(公告)号：CN110484495B
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN201910783787.6
申请日：2019-08-23
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明涉及一种从老年人体滑膜关节软骨分离培养细胞的方法，属于人体组织工程技术领域。其从老年关节软骨中获取大量且具有代谢活性的细胞，应用于临床自体软骨细胞移植修复软骨组织缺损和软骨退行性病变的分子病理与生物治疗基础研究。本发明所阐述的软骨细胞分离方法，结合机械切割与酶解软骨组织，在高温高压灭菌的组织分解瓶（Spinner flask）和细胞培养箱中，使软骨碎片与可降解软骨细胞外基质蛋白特异蛋白酶充分接触，达到完全溶解基质最大程度释放软骨细胞的目的。本发明相较于现有的人负重滑膜关节软骨细胞分离方法，软骨细胞的产量更高，活软骨细胞的比例更大，污染几率更低。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109355272B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201811621705.X
申请日：2018-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的木聚糖酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达技术领域。本发明通过定点突变和饱和突变生物技术改造木聚糖酶的分子结构，得到一株催化活性提高的木聚糖酶突变体AEx11AT98D/V124Q。突变酶的比活性及催化效率分别为AEx11A的3.04和2.74倍，而且该酶在耐高温和高热稳定性方面仍然和原酶类似。本发明解决了木聚糖酶催化活性低的限制性问题，有较大应用潜力，也为木聚糖酶的研究奠定了理论基础。
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公开(公告)号：CN109355271B
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN201811621721.9
申请日：2018-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种海洋红酵母来源的环氧化物水解酶及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种来源于海洋红酵母R.paludigenum的环氧化物水解酶基因(rpeh1)及对应的氨基酸序列；构建了含有该基因的重组质粒pET28a(+)‑rpeh1和基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a(+)‑rpeh1，并利用该菌株制备重组环氧化物水解酶；应用本发明构建的基因工程菌进行生物催化，制备得到对映纯的R型苯基乙二醇ee>73％。
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公开(公告)号：CN108165538B
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201810033882.X
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化活性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明的突变体是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸的基础上，将第106位的缬氨酸突变成了异亮氨酸。本发明摇瓶诱导10h得到的突变酶PvEH1V106I催化活性为234.75U/g，是野生型酶(157.15U/g)的1.49倍。
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公开(公告)号：CN107988308B
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201810033872.6
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开一种立体选择性提高的菜豆环氧水解酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶进行单向定点突变，获得对映选择性与对映归一性提高的突变酶W102L。与野生型相比，W102L对外消旋对氯环氧苯乙烷rac‑pCSO的E值从2.6提高至25.5，对rac‑pCSO的对映选择性提高了9.8倍。使用PvEH1W102L全细胞动力学拆分150mmol·L‑1的rac‑pCSO，反应4h后，可获得(R)‑对氯环氧苯乙烷的产率为45.62％(ees＝96.30％)和(R)‑对氯苯基乙二醇产率为50.91％(eep＝90.26％)。
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公开(公告)号：CN107937364B
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201810033894.2
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种对映选择性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明的突变体是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸的基础上，将第102位的色氨酸突变成了亮氨酸。本发明的突变酶PvEH1W102L的对映体比率(E值)是14.95，是野生型酶(E＝7.36)的2.03倍。
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