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公开(公告)号：CN102120966A
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN201010580120.5
申请日：2010-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株乳清酸核苷-5’-磷酸脱羧酶(ura3)缺陷型毕赤酵母(P.pastoris)X-33菌株的构建及利用，属于生物工程技术领域。该下程菌株P.pastoris X-33(Δura3)是通过采用同源重组敲除目的基因的方法而获得。该菌株可以利用URA3基因作为选择标记，构建各种工程菌株。而且，工程菌株构建时不要求载体携带的ura3基因来源于相同微生物种属。同时提供了一个对X33后续的工程化改造如糖基化改造提供了更好的平台菌株，具有非常大的潜在应用前景。
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公开(公告)号：CN101979576A
公开(公告)日：2011-02-23
申请号：CN201010503402.5
申请日：2010-10-12
Applicant: 江南大学 , 中国人民解放军第四军医大学
IPC: C12N15/16 , C12N15/70 , C07K14/575
Abstract: 本发明公开了一种血管钠肽(VNP)的制备方法，为克服传统VNP化学合成法价格昂贵，生物活性低等缺陷，本发明在制备VNP过程中，用PCR技术扩增目的基因，以pGEX-4T-1为载体质粒酶切后定向插入VNP目的基因后形成重组质粒，以大肠杆菌BL21(DE3)作为表达菌株，以GST亲和柱分离目的蛋白，这种方法既能获得较高表达量的蛋白，又能通过亲和性得到较纯的蛋白。运用本发明技术获得的VNP比起化学合成法具有更好的生物学活性，且成本较化学合成法要低，为VNP进一步通过生物法生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN102212140A
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN201110081303.7
申请日：2011-04-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 人血管内皮生长因子165(hVEGF165)突变体与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白及其制备技术的发明属于长效重组融合蛋白技术领域。本发明的融合蛋白包括与人血管内皮生长因子165至少85％序列同源的第一区和与人血清白蛋白至少85％序列同源的第二区。利用重叠PCR的方法获得VEGF165的突变体，利用限制性酶切连接的方法将hVEGF165与HSA拼接，中间不加入任何连接肽。该融合蛋白可以在不改变融合蛋白特性的前提下，进行个别氨基酸残基的取代、缺失或加入，它们在保留了hVEGF165活性的基础上，可望显著延长在体内的半衰期，是药学领域中，能够替代hVEGF165的，有良好前景的药用融合蛋白。
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公开(公告)号：CN101691595A
公开(公告)日：2010-04-07
申请号：CN200910184691.4
申请日：2009-08-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种新的重组毕赤酵母的发酵方法。在甘油生长重组毕赤酵母的基础上，采用脉冲式甲醇补料诱导重组蛋白的表达。该方法在甲醇流加控制时不需使用甲醇传感器，同时克服DO stat补料诱导过程中的甲醇浓度过低，也克服了恒速间歇式恒速流加诱导过程中由于补料速度过快而带来的甲醇蓄积和补料速度过低导致的甲醇浓度过低等缺点。采用脉冲式甲醇补料后，重组长效融合干扰素的表达量得到了很大程度的提高。
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公开(公告)号：CN102121053A
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN201010580148.9
申请日：2010-12-09
Applicant: 江南大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种新的抗病毒药物筛选的方法。大部分病毒在侵染人体细胞的过程中会抑制体细胞正常的5‘-帽子结构依赖的翻译方式，而启动依赖病毒mRNA5’-非翻译区含有的内部核糖体进入元件(IRES)的翻译方式。本方法利用病毒的这一特性，以病毒mRNA5’-非翻译区IRES所介导的翻译水平的高低作为评价病毒活性的强弱，进而作为抗病毒药物筛选的指标。该方法使得抗病毒药物的筛选指标得以简化并同时可以对药物抗病毒活性进行定性或者定量评价，使得抗病毒药物筛选的速度大大提高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102120979A
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN201010580240.5
申请日：2010-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种新的提高重组蛋白的表达的方法。在正常重组毕赤酵母的工艺流程的基础上，加入微量的退黑激素可以大大提高重组蛋白的表达。该方法使得重组酵母菌高密度发酵时由于供氧不均衡等胁迫带来的酵母内部自由基积累得到降低，改善了高密度发酵过程中因自由基带来的对酵母本身的损伤，从而改善了酵母本身的生理状况。使用退黑激素后，重组蛋白的表达量得到了很大程度的提高。
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公开(公告)号：CN104403005A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410699879.3
申请日：2014-11-28
Applicant: 江南大学 , 无锡鑫连鑫生物医药科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一类新颖的胰高血糖素样肽-1（GLP-1）类似物与人血清白蛋白重组蛋白及其制备的方法。该新颖重组蛋白组成框架为：T-S-X-G-G-H，T代表的蛋白序列为生物亲和标签；S代表的蛋白序列为蛋白酶酶切位点；X代表一个氨基酸；G代表GLP-1类似物蛋白；H代表人血清白蛋白。该设计通过生物制备后经酶切获得N端均一的GLP-1类似物样品，提高生物样品的均一性和活性。并构建稳定表达这类重组蛋白的中国仓鼠卵巢细胞（CHO）稳定表达株。本发明制备的新颖重组蛋白具有更高的生物学活性和更优的体内外稳定性。这类重组蛋白可用于治疗2型糖尿病及通过降低血浆葡萄糖而受益的其它疾病。可用于诱导细胞分化为β胰腺细胞的1型糖尿病的治疗。同时也可用于刺激神经系统产生饱腹感和抑制胃蠕动而受益的其他疾病。
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公开(公告)号：CN102121024A
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN201010580162.9
申请日：2010-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 人血管内皮生长因子165b(hVEGF165b)与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白及其制备技术的发明属于长效重组融合蛋白技术领域。本发明的融合蛋白包括与人血管内皮生长因子165b至少85％序列同源的第一区和与人血清白蛋白至少85％序列同源的第二区。利用限制性酶切连接的方法将hVEGF165b与HSA拼接，中间不加入任何连接肽。该融合蛋白可以在不改变融合蛋白特性的前提下，进行个别氨基酸残基的取代、缺失或加入，它们在保留了hVEGF165b活性的基础上，可望显著延长在体内的半衰期，是药学领域中，能够替代hVEGF165b的，有良好前景的药用融合蛋白。
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公开(公告)号：CN101555482A
公开(公告)日：2009-10-14
申请号：CN200910024840.0
申请日：2009-02-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 人甲状旁腺激素(1－34)(hPTH(1－34))二联体与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白及其制备技术的发明属于长效重组融合蛋白技术领域。本发明的融合蛋白包括与人甲状旁腺激素(1－34)至少85％序列同源的二联体的第一区和与人血清白蛋白至少85％序列同源的第二区。利用两次重叠PCR技术，现将两个hPTH(1－34)进行拼接得到二联体，再将二联体与HSA拼接，中间不加入任何连接肽。该融合蛋白可以在不改变融合蛋白特性的前提下，进行个别氨基酸残基的取代、缺失或加入，它们在保留了人甲状旁腺激素激活受体和刺激骨重建的作用的基础上，显著延长了在体内的半衰期，是药学领域中，能够治疗骨质疏松症的，有良好前景的药用融合蛋白。
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公开(公告)号：CN102775492A
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201210001319.7
申请日：2012-01-05
Applicant: 江南大学
IPC: C07K14/635 , C12Q1/68 , C12Q1/02 , A61K38/29 , A61P19/10
Abstract: 本发明“一种高活性人甲状旁腺激素(1-34)突变蛋白及其活性检测方法”属于蛋白质药物领域。本发明通过对天然人甲状旁腺激素(1-34)的第25、26、27位氨基酸进行置换，发现了一种高活性的人甲状旁腺激素(1-34)突变蛋白。本发明还建立了一种快速的稳定的活性检测方法，可以在3-10天内对一种或多种蛋白质或多肽类药物进行活性检测，并与人甲状旁腺激素标准品进行比较。活性检测结果显示上述人甲状旁腺激素(1-34)突变蛋白的活性优于标准品，因此有望成为疗效更强，副作用更小的骨质疏松治疗药物。
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