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公开(公告)号:CN117686717A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311572153.9
申请日:2023-11-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种使用免疫印迹技术半定量分析人关节软骨细胞分泌蛋白质表达水平的方法。本发明所述方法包括如下步骤:1)制备含分泌蛋白培养液;2)采集含分泌蛋白培养液的样本;3)对样本进行透析脱盐处理;4)浓缩制备含分泌蛋白培养液粉末;5)复溶含分泌蛋白培养液粉末及蛋白定量;6)分离复溶后培养液中的蛋白组分;7)免疫印迹法检测复溶后培养液样本中的分泌蛋白的表达水平。本发明采用低温透析和真空浓缩技术,能够在维持蛋白质结构完整的条件下,显著提高人关节软骨组织培养液样品中分泌蛋白的浓度,适合采取免疫印迹技术检测样品中的分泌蛋白的化学荧光信号。本发明为研究因软骨组织退行性病变而发生的骨关节疾病的发病机理,以及治疗此类疾病的生物小分子药物的研发,提供了一个重要的细胞反应检测工具。
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公开(公告)号:CN110484495A
公开(公告)日:2019-11-22
申请号:CN201910783787.6
申请日:2019-08-23
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明涉及一种从老年人体滑膜关节软骨分离培养细胞的方法,属于人体组织工程技术领域。其从老年关节软骨中获取大量且具有代谢活性的细胞,应用于临床自体软骨细胞移植修复软骨组织缺损和软骨退行性病变的分子病理与生物治疗基础研究。本发明所阐述的软骨细胞分离方法,结合机械切割与酶解软骨组织,在高温高压灭菌的组织分解瓶(Spinner flask)和细胞培养箱中,使软骨碎片与可降解软骨细胞外基质蛋白特异蛋白酶充分接触,达到完全溶解基质最大程度释放软骨细胞的目的。本发明相较于现有的人负重滑膜关节软骨细胞分离方法,软骨细胞的产量更高,活软骨细胞的比例更大,污染几率更低。
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公开(公告)号:CN110484495B
公开(公告)日:2021-03-09
申请号:CN201910783787.6
申请日:2019-08-23
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明涉及一种从老年人体滑膜关节软骨分离培养细胞的方法,属于人体组织工程技术领域。其从老年关节软骨中获取大量且具有代谢活性的细胞,应用于临床自体软骨细胞移植修复软骨组织缺损和软骨退行性病变的分子病理与生物治疗基础研究。本发明所阐述的软骨细胞分离方法,结合机械切割与酶解软骨组织,在高温高压灭菌的组织分解瓶(Spinner flask)和细胞培养箱中,使软骨碎片与可降解软骨细胞外基质蛋白特异蛋白酶充分接触,达到完全溶解基质最大程度释放软骨细胞的目的。本发明相较于现有的人负重滑膜关节软骨细胞分离方法,软骨细胞的产量更高,活软骨细胞的比例更大,污染几率更低。
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公开(公告)号:CN208627041U
公开(公告)日:2019-03-22
申请号:CN201820435004.6
申请日:2018-03-29
Applicant: 江南大学附属医院
Inventor: 王全明
Abstract: 本实用新型公开了一种泡沫硬化剂快速制备装置,包括第一针筒和第二针筒;第一针筒和第二针筒相互连通设置;所述第一针筒内装有硬化剂;所述第二针筒内装有气体;所述第一针筒和第二针筒交替推拉配合实现硬化剂与气体的混合;通过在第一针筒和第二针筒的流通路径上设置计数器,有效克服了两支针筒快速往复推拉时速度太快导致的计数错误,保证了所制成泡沫硬化剂的品质;通过卡紧装置实现了第二针筒的快速拆装,显著提高了配置效率;通过第一针筒和第二针筒之间的最佳设置角度实现了硬化剂与气体之间的从充分快速混合;该泡沫硬化剂快速制备装置结构简单、操作精准,极大得缩短了手术中泡沫硬化剂配置所用的时间,提升了泡沫硬化剂的质量稳定性。
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