公开(公告)号：CN103952494A

公开(公告)日：2014-07-30

申请号：CN201410078254.5

申请日：2014-03-06

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 王华 ,  吴晓东 ,  徐天刚 ,  王淑娟 ,  李林 ,  王志亮

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

CPC classification number: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119

Abstract: 本发明涉及一种裂谷热病毒RT-LAMP的检测方法检测过程中：步骤a，建立如下扩增反应体系：5μl RNA样品、2.5μl Bst DNA聚合酶缓冲液(10x)、1μl Bst DNA聚合酶(8U/μl)、1μl AMV反转录酶(10U/μl)、1μld NTP(25mmol/μl)、5μl Betaine(5μmol/μl)、1μl Mg SO4(100nmol/μl)、对应于L基因的四条引物各1μl引物浓度为F3与B3：5pmol/μl、BIP与FIP：70pmol/μl、H2O补足至25μl；步骤b，将上述各组分混匀后，在65℃水浴中反应1.5～2h；步骤c，用1.5％琼脂糖凝胶进行电泳，然后观察结果。本发明新型的RT-LAMP技术具有快速灵敏、操作简单，安全性高，价格低廉，不需要特殊仪器设备等优点，特别适用于基层检验检疫机构普及应用，为裂谷热病毒早期诊断提供了一种快速、使用的诊断方法。

公开(公告)号：CN110607396A

公开(公告)日：2019-12-24

申请号：CN201910773243.1

申请日：2019-08-21

Applicant: 青岛立见诊断技术发展中心 ,  中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 李阳 ,  张志 ,  孙学强 ,  于晓慧 ,  路平 ,  尼博 ,  周晓翠 ,  徐天刚 ,  孙明军 ,  王琳

IPC: C12Q1/70 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6813 ,  G01N33/569 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于动物病原分子检测技术领域，具体涉及一种鹦鹉多重病毒检测引物、检测试剂盒、病毒检测方法及应用。本发明所述试剂盒分别利用鹦鹉喙羽病病毒的CP基因、鹦鹉幼雏病病毒VP1基因以及禽腺病毒hexon基因为模板，用特定引物通过PCR合成了经地高辛标记的特异性核酸探针，通过斑点分子杂交，这些探针可用于检测病料样品中鹦鹉喙羽病病毒、鹦鹉幼雏病病毒或禽腺病毒核酸的存在。利用本发明所涉及的试剂盒，通过提取病料组织样品的DNA进行斑点分子杂交，可在24h～36h内完成检测并报告结果，特异性强，准确性高。如将同一样品的核酸提取物分点在三张膜上，同时加入对应的核酸探针，即可同时检测三种不同的病毒。

公开(公告)号：CN118086230A

公开(公告)日：2024-05-28

申请号：CN202410340669.9

申请日：2024-03-25

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 戈胜强 ,  王志亮 ,  吴晓东 ,  吕艳 ,  左媛媛 ,  韩秀琚 ,  张永强 ,  徐天刚 ,  任炜杰 ,  于松梅 ,  韩乃君 ,  刘雨田 ,  屈海龙 ,  巩明霞 ,  赵永刚 ,  郑冬霞 ,  胡永新 ,  赵云玲 ,  迟田英 ,  王英丽 ,  包静月 ,  李金明

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/34 ,  C12Q1/70 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供一种多基因家族大片段基因缺失的非洲猪瘟弱毒株及其构建方法和应用，所提供的自然弱毒株，所述的自然弱毒株相比于非洲猪瘟强毒株，其基因组缺失左侧可变区从MGF110‑9L到MGF360‑14L之间的核酸片段。本发明还提供一种非洲猪瘟病毒弱毒株的构建方法，是将非洲猪瘟病毒强毒株的左侧可变区从MGF110‑9L到MGF360‑14L之间的核酸片段去除后构建弱毒株。本发明所提供的自然缺失株和人工构建的基因缺失株均在多基因家族的核心区域发生大范围缺失，且毒株遗传稳定，无重组和突变发生，因此该毒株具备天然致弱属性，对于基础研究和疫苗研制具有重要意义。

公开(公告)号：CN116515774A

公开(公告)日：2023-08-01

申请号：CN202310452068.2

申请日：2023-04-25

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 戈胜强 ,  王志亮 ,  吴晓东 ,  吕艳 ,  左媛媛 ,  韩秀琚 ,  张永强 ,  徐天刚 ,  任炜杰 ,  于松梅 ,  韩乃君 ,  刘雨田 ,  屈海龙 ,  巩明霞 ,  赵永刚 ,  郑冬霞 ,  胡永新 ,  赵云玲 ,  迟田英 ,  王英丽 ,  包静月 ,  李金明

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/34 ,  C12Q1/70 ,  C12N15/11 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供一种多基因家族大片段基因缺失的非洲猪瘟弱毒株及其构建方法和应用，所提供的自然弱毒株，所述的自然弱毒株相比于非洲猪瘟强毒株，其基因组缺失左侧可变区从MGF110‑9L到MGF360‑14L之间的核酸片段。本发明还提供一种非洲猪瘟病毒弱毒株的构建方法，是将非洲猪瘟病毒强毒株的左侧可变区从MGF110‑9L到MGF360‑14L之间的核酸片段去除后构建弱毒株。本发明所提供的自然缺失株和人工构建的基因缺失株均在多基因家族的核心区域发生大范围缺失，且毒株遗传稳定，无重组和突变发生，因此该毒株具备天然致弱属性，对于基础研究和疫苗研制具有重要意义。

公开(公告)号：CN111363854A

公开(公告)日：2020-07-03

申请号：CN202010331697.6

申请日：2020-04-24

Applicant: 云南省畜牧兽医科学院 ,  中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 王静林 ,  孟锦昕 ,  李楠 ,  何于雯 ,  徐天刚

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种用于检测乙脑病毒和盖塔病毒的核酸组及检测方法，核酸组包括用于检测乙脑病毒基因的第一引物对以及用于检测盖塔病毒的第二引物对；第一引物对包括：SEQ ID NO.1所示的上游引物和SEQ ID NO.2所示的下游引物；第二引物对包括：SEQ ID NO.4所示的上游引物和SEQ ID NO.5所示的下游引物。该核酸组可以用于检测样品中的乙脑病毒和盖塔病毒，具有较高的特异性和灵敏度。

公开(公告)号：CN107663552A

公开(公告)日：2018-02-06

申请号：CN201610608504.0

申请日：2016-07-29

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 王淑娟 ,  王清华 ,  吴晓东 ,  包静月 ,  吕艳 ,  樊晓旭 ,  赵明 ,  徐天刚 ,  王华 ,  赵永刚 ,  孙成友 ,  邹艳丽 ,  王志亮

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6869 ,  C12R1/93

CPC classification number: C12Q1/701 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2535/122 ,  C12Q2565/301 ,  C12Q2563/107

Abstract: 本发明属于生物技术领域，它确立了西尼罗病毒焦磷酸测序方法，含有三个技术要点：①确立了核酸检测所需要的引物序列；②确立了检测反应种类；③确立了检测反应体系和反应条件。该西尼罗病毒焦磷酸测序方法可以用于西尼罗病毒科学研究，也可以用于动物或人的临床诊断检测。