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公开(公告)号：CN114214424B
公开(公告)日：2022-12-20
申请号：CN202111476770.X
申请日：2021-12-06
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11 , A01K67/02
Abstract: 本发明提供了一组检测优质高产奶山羊的引物组、测定方法和奶山羊的培育方法，涉及新品种选育技术领域。本发明所述引物组，以CDC14A基因的AA型和/或RBPJL基因的TT型作为高产奶基因型，利用所述引物组可以早期筛选出具有高产奶特性的奶山羊。本发明还提供了所述引物组在培育高产奶奶山羊新品种中的应用，以含有CDC14A基因的AA型和/或RBPJL基因的TT型的阿尔卑斯奶山羊为原始父本，以含有CDC14A基因的AA型和/或RBPJL基因的TT型的本地地方品种关中奶山羊为原始母本，每代均经过高产基因型检测，依次通过二元杂交、级进杂交和横交固定，得到奶山羊新品种。所述奶山羊新品种具有双亲优点。
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公开(公告)号：CN113355356A
公开(公告)日：2021-09-07
申请号：CN202110755642.2
申请日：2021-07-05
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N5/10
Abstract: 本发明提供了一种CSN1S1基因敲除载体以及CSN1S1基因敲除奶山羊乳腺上皮细胞的制备方法，涉及基因工程技术领域，所述基因敲除载体包括CRISPR/Cas9载体骨架与连接在所述载体质粒上的一段DNA片段，所述DNA片段的序列如SEQ ID NO:2所示。本发明通过该基因敲除载体简便、快速、高效地敲除了奶山羊CSN1S1基因，获得了纯合的敲除CSN1S1基因的奶山羊乳腺上皮细胞。
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公开(公告)号：CN108300763A
公开(公告)日：2018-07-20
申请号：CN201810193267.5
申请日：2018-03-09
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/66 , C12Q1/6851 , G01N33/68
CPC classification number: C12Q1/66 , C12Q1/6851 , G01N33/68 , C12Q2545/101 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种筛选miR-101-3p靶基因的方法，该方法以山羊基因组DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用PTGS2引物在PCR条件下进行扩增PTGS2基因3'UTR区；构建双荧光素酶报告系统，检测荧光素酶活性，结果显示，miR-101-3P降低了荧光素酶的活性，初步确定PTGS2为miR-101-3P的靶基因；采用RT-qPCR和Western blot方法验证miR-101-3P对PTGS2基因在mRNA和蛋白水平表达的影响。结果显示：miR-101-3P可以抑制PTGS2基因在mRNA和蛋白水平上的表达，进一步确定miR-101-3P可与PTGS23'UTR结合，PTGS2是miR-101-3P的目标靶基因。
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公开(公告)号：CN102851390B
公开(公告)日：2014-11-05
申请号：CN201210394431.1
申请日：2012-10-17
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种奶山羊乳房炎病原菌多重PCR检测试剂盒的制备方法。一种奶山羊乳房炎病原菌多重PCR检测试剂盒的制备方法为：1）待检样本DNA提取；2）设置PCR检测试剂盒；3）PCR扩增；4）PCR扩增产物分析。本发明对对提高乳房炎的检测、监控水平，保障羊奶及其奶制品食品安全具有重要意义。
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公开(公告)号：CN103238751A
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201310180733.3
申请日：2013-05-10
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种肉用绵羊专用代乳料配方及制备方法，配方包括乳清粉、膨化玉米粉、大豆粕、大豆浓缩蛋白、脂肪粉、全脂奶粉、石粉、磷酸氢钙、食盐、微生态制剂、肉羊专用有机多矿、肉羊专用水溶性多维、20％莫能菌素、酶制剂和甜味剂；制备方法为：将细石粉、磷酸氢钙、细食盐、微生态制剂、肉羊专用有机多矿、肉羊专用水溶性多维、莫能菌素、酶制剂、甜味剂等小料混匀制备成半成品A；再将膨化玉米粉、大豆粕、大豆浓缩蛋白超微粉碎后与A和脂肪粉、全脂奶粉采用不锈钢混合机混合均匀。本发明提供的肉用绵羊专用代乳料配方采用多种幼畜易消化吸收的原料，辅助添加有机活性成分，制备方法简单易操作，具有良好的发展前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102847172A
公开(公告)日：2013-01-02
申请号：CN201210394438.3
申请日：2012-10-17
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61K48/00 , A61K39/085 , A61P31/04
Abstract: 本发明属于动物基因工程技术领域，具体涉及一种预防山羊葡萄球菌乳房炎的基因工程疫苗制备方法及应用。本发明通过以下步骤完成：1）扩增目的基因ClfA、ClfA及Sbi；2）构建pCI-Hla/ClfA-A/Sbi-I-II真核重组表达载体；3）建立免疫程序及评估免疫效果。本发明基因工程疫苗是以迅速发展的分子生物学技术、遗传性、免疫学为基础，包括基因工程亚单位疫苗、基因突变疫苗、核酸疫苗等。核酸疫苗即DNA疫苗，是重组构建一种或多种抗原编码基因的真核表达载体，并将其直接注入机体而激活免疫系统，以达到预防和治疗疾病的目的。
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公开(公告)号：CN102433269B
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201110321155.1
申请日：2011-10-21
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N1/20 , C12N15/56 , C12N9/42 , C05F3/00 , C05F11/02 , C05F11/08 , A61K35/74 , A61P1/00 , C12R1/07
CPC classification number: Y02A40/205
Abstract: 本发明涉及一种新的芽孢杆菌，分类命名是短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1。该短小芽孢杆菌从藏猪新鲜粪便中分离，能产生纤维素酶，具有降解羧甲基纤维素钠的能力，在37℃，220rpm培养96h后羧甲基纤维素酶活性为0.92μmol/ml·min。以Bacillus pumilusSAFR-032内切酶基因bglC基因序列为参考，设计引物成功扩增出了短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)BY-1的内切-β-1，4-葡聚糖酶基因，命名为bglC-BY。经NCBI blast该基因与bglC相似度为88％，而与Bacillus pumilus endoglucanase A precursor(EglA)基因相似性较高为96％，实现了pET表达系统表达并在培养温度为30℃，220rpm情况下，在菌液吸光值A595为0.7534时开始诱导，诱导后42h小时活性最高，胞外酶活测定最高为0.5434μmol/ml·min。
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公开(公告)号：CN101928774B
公开(公告)日：2012-03-14
申请号：CN201010199157.3
申请日：2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测山羊生长激素（GH）基因编码区5个碱基突变多态性的聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，以山羊基因组DNA序列为模板，在TaqDNA聚合酶、Buffer（缓冲环境）、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用两对反应（PCR）引物P1和P2，在PCR条件下进行扩增，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行扩增目的片段大小判定；采用DNA测序技术筛查到山羊GH基因编码区5个碱基的突变，然后对GH基因的SNPs进行基因分型和基因频率分析，以及与布尔山羊、布尔山羊和关中奶山羊的杂交后代（F1和F2代）3月龄的生长性状之间进行了关联分析；结果表明：GH基因P1和P2检测的SNPs位点可用作山羊生长性状早期选择（3月龄）的分子标记。
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公开(公告)号：CN101865798B
公开(公告)日：2011-11-09
申请号：CN201010199444.4
申请日：2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N1/30
Abstract: 本发明公开了一种聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）电泳中的DNA银染方法，先用0.1% AgNO3浸泡聚丙烯酰胺凝胶10–15min，用蒸馏水清洗2次，其次用0.04%的Na2CO3、2mL的37% HCOH/L、2%的NaOH混合溶液显色5–6 min，蒸馏水冲洗2次即可完成全部染色过程。传统的DNA银染方法需要5-6种化学试剂，配制4中溶液，花费40-60min才能完成染色步骤，而本方法只需要4种化学试剂，配制2种溶液，花费20min就可以达到与传统染色方法相同的结果，而且在变性聚丙烯酰胺电泳（PAGE）中，本染色方法可以将DNA的量降低到0.44ng；在非变性聚丙烯酰胺电泳（PAGE）中可以将DNA的量降低到3.5ng。本方法与传统染色方法相比，不仅节约了时间，降低额成本，而且提高了检测的灵敏度。
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公开(公告)号：CN101967484A
公开(公告)日：2011-02-09
申请号：CN201010199264.6
申请日：2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种奶山羊多胎和单胎卵巢差异表达新基因及其筛选、鉴定和功能分析方法，以西农萨能奶山羊为试验材料，采用抑制性消减杂交技术构建奶山羊多胎（3羔）和单胎乏情期卵巢组织正反向消减cDNA文库，筛选差异表达基因片断，利用实时定量PCR验证差异表达基因，并利用生物信息学分析基因结构和潜在的功能。
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