羊口疮病毒低含量样品的病毒分离方法

    公开(公告)号:CN104745539B

    公开(公告)日:2018-02-06

    申请号:CN201510152702.6

    申请日:2015-04-02

    Abstract: 本发明涉及羊口疮病毒低含量样品的病毒分离方法。传统的羊口疮病毒都是从结痂和患病羊的口唇皮屑中分离的,分离周期长,需要盲传5代后才会有病变,同时,病料来源范围小,限制的羊口疮病毒的研究工作。本发明使用特有的Virus holder溶液对唾液、乳汁、内脏等样品进行离心过滤处理后,接种于牛睾丸原代细胞中培养后弃去毒液;加细胞维持液培养后收毒;反复冻融收集细胞培养物,从第3代接种牛睾丸细胞后的72h可观察到细胞病变。本发明使用特有的Virus holder溶液处理样品,能够从病毒含量极低的样品中分离羊口疮病毒,取材范围大,病毒分离周期短,稳定性高,能够很好的保持病毒的完整性和活性。

    一种治疗奶牛临床乳房炎的生物性免疫制剂及其制作方法

    公开(公告)号:CN1589897A

    公开(公告)日:2005-03-09

    申请号:CN200310105874.5

    申请日:2003-11-03

    Inventor: 陈德坤

    Abstract: 本发明涉及一种治疗奶牛临床乳房炎的生物性免疫制剂及其制作方法,其具有抗细菌、病毒、真菌及寄生虫等多种功能,避免了抗生素只抗细菌的局限,并且克服了抗生素治标不治本的局限,从提高奶牛免疫抵抗力尤其是乳房局部免疫力来达到治疗奶牛临床乳房炎这一根本途径入手,实现治愈奶牛乳房炎的目的。本发明包括以下组分:猪淋巴细胞转移因子为0%-100%;牛淋巴细胞转移因子为0%-100%。工艺过程为:选取猪、牛的脾脏绞碎按比例混合后进行组织捣碎匀浆,将匀浆液反复进行冰冻、解融,再进行冷冻离心,取上清液经过透析、冰冻、解冻、过滤后制成成品。

    一种山羊伪结核杆菌抗体的ELISA检测试剂盒的制备方法

    公开(公告)号:CN105181963B

    公开(公告)日:2017-08-01

    申请号:CN201510458766.9

    申请日:2015-07-30

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,提供一种山羊伪结核杆菌抗体的ELISA检测试剂盒的制备方法。本发明以完整的伪结核棒状杆菌菌体作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法,检测血清中是否含有抗伪结核棒状杆菌抗体,判断山羊是否感染伪结核。本发明确定了阴阳性临界值,具有很高的特异性和重复性,能够快速有效的检测出山羊血清中的伪结核抗体,可用于山羊伪结核诊断、流行病学调查。

    一种羊口疮病毒ELISA检测试剂盒的制备方法

    公开(公告)号:CN105044345A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510489772.0

    申请日:2015-08-11

    CPC classification number: G01N33/577

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种羊口疮病毒ELISA检测试剂盒的制备方法。本发明针利用实验室现有两株杂交瘤细胞D4和G9,分别制备并纯化小鼠腹水,建立双抗夹心ELISA检测方法,并组装成试剂盒。该试剂盒能够特异性检测羊口疮病毒,最低检测限度为0.625ng/ml,且不与羊痘病毒存在交叉反应,为羊口疮疫病防控,流行病学调查等提供有力工具。一种羊口疮病毒ELISA检测试剂盒的制备方法为:用两株识别羊口疮病毒不同表位的单克隆抗体D4和G9,建立双抗夹心ELISA检测方法,并组装成检测试剂盒。

    一种羊口疮病毒的快速分离方法

    公开(公告)号:CN104694484A

    公开(公告)日:2015-06-10

    申请号:CN201510077329.2

    申请日:2015-02-13

    Abstract: 本发明涉及一种羊口疮病毒的快速分离方法,具体涉及利用牛睾丸细胞从患病羊及隐性带毒羊的外周血中分离羊口疮病毒的方法。其利用牛睾丸细胞,从羊口疮发病羊及隐性带毒羊的外周血中分离羊口疮病毒,为羊口疮病毒的分离提供了方便快捷的方法,为生产和科研提供便利。本发明一种羊口疮病毒的快速分离方法的步骤为:1)羊口疮病毒病料的采集与检测;2)病料的处理;3)羊口疮病毒的分离。

    一种山羊口疮病毒毒力弱化方法

    公开(公告)号:CN102533681A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201110452835.7

    申请日:2011-12-30

    Abstract: 本发明涉及一种山羊传染性脓疱病毒毒力弱化方法,其利用犊牛睾丸细胞系,通过羊口疮病毒的连续传代培养,致使羊口疮病毒毒力致弱,为羊口疮病毒弱毒疫苗的制备与生产提供了稳定可靠的方法,用以获得大量的稳定的疫苗。本发明包括以下步骤:1)羊口疮病毒的分离与初步培养;2)羊口疮病毒在犊牛睾丸细胞系连续传代培养直到毒力弱化。步骤1)中,羊口疮病毒的初步培养采用犊牛睾丸细胞系培养,犊牛睾丸细胞系的培养液为M199、DMEM(高糖)、RPMI-1640培养基。步骤1)中,羊传染性脓疱病毒分离于患病山羊的口唇部结痂。步骤2)中,犊牛睾丸细胞系是通过导入端粒酶逆转录基因(hTERT)方法制备的。

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