公开(公告)号：CN107287301A

公开(公告)日：2017-10-24

申请号：CN201710501338.9

申请日：2017-06-27

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 安小鹏 ,  侯金星 ,  宋宇轩 ,  马海东 ,  李广 ,  曹斌云

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种利用核仁磷酸蛋白基因选择山羊生长性状的分子标记方法，该方法以山羊基因组DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用4对引物在PCR条件下进行扩增Nucleophosmin(NPM)基因5'UTR区和外显子1，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1-P4的PCR扩增产物，发现引物P3扩增位点存在18bp的碱基缺失，然后对引物P3的扩增产物进行基因分型和基因频率分析，以及与关中奶山羊和波尔山羊的生长性状之间进行关联分析；结果表明：Nucleophosmin基因外显子1由引物P3检测的SNPs位点可用作山羊产生长性状选择的分子标记。

公开(公告)号：CN107287301B

公开(公告)日：2020-08-04

申请号：CN201710501338.9

申请日：2017-06-27

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 安小鹏 ,  侯金星 ,  宋宇轩 ,  马海东 ,  李广 ,  曹斌云

IPC: C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了一种利用核仁磷酸蛋白基因选择山羊生长性状的分子标记方法，该方法以山羊基因组DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用4对引物在PCR条件下进行扩增Nucleophosmin(NPM)基因5'UTR区和外显子1，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1‑P4的PCR扩增产物，发现引物P3扩增位点存在18bp的碱基缺失，然后对引物P3的扩增产物进行基因分型和基因频率分析，以及与关中奶山羊和波尔山羊的生长性状之间进行关联分析；结果表明：Nucleophosmin基因外显子1由引物P3检测的SNPs位点可用作山羊产生长性状选择的分子标记。

公开(公告)号：CN108300763A

公开(公告)日：2018-07-20

申请号：CN201810193267.5

申请日：2018-03-09

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 安小鹏 ,  曹斌云 ,  宋宇轩 ,  李广 ,  马海东

IPC: C12Q1/66 ,  C12Q1/6851 ,  G01N33/68

CPC classification number: C12Q1/66 ,  C12Q1/6851 ,  G01N33/68 ,  C12Q2545/101 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2563/107

Abstract: 本发明公开了一种筛选miR-101-3p靶基因的方法，该方法以山羊基因组DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用PTGS2引物在PCR条件下进行扩增PTGS2基因3'UTR区；构建双荧光素酶报告系统，检测荧光素酶活性，结果显示，miR-101-3P降低了荧光素酶的活性，初步确定PTGS2为miR-101-3P的靶基因；采用RT-qPCR和Western blot方法验证miR-101-3P对PTGS2基因在mRNA和蛋白水平表达的影响。结果显示：miR-101-3P可以抑制PTGS2基因在mRNA和蛋白水平上的表达，进一步确定miR-101-3P可与PTGS23'UTR结合，PTGS2是miR-101-3P的目标靶基因。