一组检测优质高产奶山羊的引物组、测定方法和奶山羊的培育方法

    公开(公告)号:CN114214424A

    公开(公告)日:2022-03-22

    申请号:CN202111476770.X

    申请日:2021-12-06

    Abstract: 本发明提供了一组检测优质高产奶山羊的引物组、测定方法和奶山羊的培育方法,涉及新品种选育技术领域。本发明所述引物组,以CDC14A基因的AA型和/或RBPJL基因的TT型作为高产奶基因型,利用所述引物组可以早期筛选出具有高产奶特性的奶山羊。本发明还提供了所述引物组在培育高产奶奶山羊新品种中的应用,以含有CDC14A基因的AA型和/或RBPJL基因的TT型的阿尔卑斯奶山羊为原始父本,以含有CDC14A基因的AA型和/或RBPJL基因的TT型的本地地方品种关中奶山羊为原始母本,每代均经过高产基因型检测,依次通过二元杂交、级进杂交和横交固定,得到奶山羊新品种。所述奶山羊新品种具有双亲优点。

    一种miR-181b靶基因筛选的方法

    公开(公告)号:CN108531544A

    公开(公告)日:2018-09-14

    申请号:CN201810193262.2

    申请日:2018-03-09

    CPC classification number: C12Q1/66 C12Q1/6851 G01N33/68

    Abstract: 本发明公开了一种筛选miR-181b靶基因的方法,该方法以山羊卵巢组织cDNA为模板,在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下,利用引物RUNX1在PCR条件下进行扩增,得到确定的PCR产物为RUNX1基因3'UTR区的序列;然后构建双荧光素酶报告系统,检测荧光素酶活性,初步鉴定miR-181b的靶基因;采用RT-qPCR法检测miR-181b对RUNX1基因在mRNA水平的影响;采用Western blot法检测miR-181b对RUNX1基因在蛋白水平的影响。明确了RUNX1 3'UTR区存在与miR-181b的结合位点,利用现代分子生物技术验证了miR-181b与靶基因RUNX1的靶向调控关系,miR-181b可以抑制RUNX1基因在mRNA和蛋白水平上的表达,进一步确认了RUNX1是miR-181b的目标靶基因。为进一步研究miR-181b对奶山羊乳卵巢发育和产羔性能的影响奠定了基础。

    一种miR-574-5p靶基因筛选的方法

    公开(公告)号:CN108300761A

    公开(公告)日:2018-07-20

    申请号:CN201810193251.4

    申请日:2018-03-09

    Abstract: 本发明公开了一种筛选miR-574-5p靶基因的方法,该方法以山羊基因组DNA序列为模板,在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下,利用MAP3K9引物在PCR条件下进行扩增MAP3K9基因3'UTR区;构建双荧光素酶报告系统,检测荧光素酶活性,结果显示,miR-574-5p降低了荧光素酶的活性,初步确定MAP3K9为miR-574-5p的靶基因;采用RT-qPCR和Western blot方法验证miR-574-5p对MAP3K9基因在mRNA和蛋白水平表达的影响。结果显示:miR-574-5p可以抑制MAP3K9基因在mRNA和蛋白水平上的表达,进一步确定miR-574-5p可与MAP3K93'UTR结合,MAP3K9是miR-574-5p的靶基因,为进一步研究miR-574-5p对奶山羊乳腺发育和泌乳功能的影响奠定了基础。

    利用核仁磷酸蛋白基因选择山羊生长性状的分子标记方法

    公开(公告)号:CN107287301A

    公开(公告)日:2017-10-24

    申请号:CN201710501338.9

    申请日:2017-06-27

    Abstract: 本发明公开了一种利用核仁磷酸蛋白基因选择山羊生长性状的分子标记方法,该方法以山羊基因组DNA序列为模板,在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下,利用4对引物在PCR条件下进行扩增Nucleophosmin(NPM)基因5'UTR区和外显子1,根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1-P4的PCR扩增产物,发现引物P3扩增位点存在18bp的碱基缺失,然后对引物P3的扩增产物进行基因分型和基因频率分析,以及与关中奶山羊和波尔山羊的生长性状之间进行关联分析;结果表明:Nucleophosmin基因外显子1由引物P3检测的SNPs位点可用作山羊产生长性状选择的分子标记。

    利用核仁磷酸蛋白基因选择山羊生长性状的分子标记方法

    公开(公告)号:CN107287301B

    公开(公告)日:2020-08-04

    申请号:CN201710501338.9

    申请日:2017-06-27

    Abstract: 本发明公开了一种利用核仁磷酸蛋白基因选择山羊生长性状的分子标记方法,该方法以山羊基因组DNA序列为模板,在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下,利用4对引物在PCR条件下进行扩增Nucleophosmin(NPM)基因5'UTR区和外显子1,根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1‑P4的PCR扩增产物,发现引物P3扩增位点存在18bp的碱基缺失,然后对引物P3的扩增产物进行基因分型和基因频率分析,以及与关中奶山羊和波尔山羊的生长性状之间进行关联分析;结果表明:Nucleophosmin基因外显子1由引物P3检测的SNPs位点可用作山羊产生长性状选择的分子标记。

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