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公开(公告)号：CN109880851B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201910244538.X
申请日：2019-03-28
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种用于富集CRISPR/Cas9介导的同源重组修复细胞的筛选报告载体及筛选方法。筛选报告载体包括通用sgRNA表达盒、Cas9表达盒、抗性基因表达盒以及抗性基因同源重组修复模板，筛选报告载体自身可以通过抗性基因序列同源重组修复而使细胞产生抗性。所述的筛选报告载体与用于细胞基因组HDR编辑的打靶载体及供体载体组成共转染系统，可应用于高效富集发生点编辑、片段插入和片段删除的HDR阳性细胞克隆，并且可广泛应用于哺乳动物的多种细胞，显著提高了HDR编辑细胞的筛选效率，同时无需对细胞基因组的无关位置再引入双链断裂与DNA整合，为推动精准基因编辑的研究和应用提供有效途径。
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公开(公告)号：CN107760707A
公开(公告)日：2018-03-06
申请号：CN201710381327.1
申请日：2017-05-25
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了增强基因表达的自激活Gal4/UAS系统表达盒的建立，通过优化UAS数目及GAL4激活/结合域类型，找到一种增强效果较好的表达盒，由自身强启动子CMV启动，借助Gal4/UAS系统使转录和翻译效率提高，从而产生自动激活、级联放大的效果；在转染后第5-10天维持较高的增强效果，第8天表达活性最高，说明表达盒增强基因表达的稳定性；在专门生产重组蛋白的CHO细胞中，增强效果大概是9倍。与现有基因表达盒相比，结构简单、增强效果显著，为基因治疗的非病毒转染途径和重组蛋白生产中增强目的基因表达提供了一种途径和新方法。
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公开(公告)号：CN106755049A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611020358.6
申请日：2016-11-14
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种基于人工核酸酶的可视化细胞修复效率报告系统及其建立方法，包括由插入有目的基因靶位点的报告基因I表达盒、完整的报告基因II表达盒以及报告基因I的截短序列构建的双荧光报告系统表达载体，本发明所述基于人工核酸酶的可视化细胞修复效率报告系统利用并模拟真核细胞内的不同修复机制对报告系统中的相应的荧光表达盒进行修复，可通过流式细胞仪对双荧光报告系统表达载体两种报告基因的表达进行量化，在载体水平一次性报告检测真核细胞中某一确定基因位点HR、SSA和NHEJ的修复效率。
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公开(公告)号：CN103695327B
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201310647359.3
申请日：2013-12-02
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种口服重组酵母及其介导的靶向肠道DC呈递shRNA的应用，以酵母菌株作为宿主细胞，宿主细胞中转染有shRNA干扰载体，该shRNA干扰载体上设有启动子-shRNA-miR30的元件排列。该口服重组酵母能够穿过活体生物的胃肠道环境，靶向肠道DC细胞传递shRNA新方法，该方法可以有效的解决现有技术中向DC呈递时存在的弊端，能够广泛应用于基因治疗。
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公开(公告)号：CN102367450A
公开(公告)日：2012-03-07
申请号：CN201110193102.6
申请日：2011-07-11
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明是一种由PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体、其构建方法及其应用，属于基因工程技术领域。所述载体为PB-rtTA-NIT-STP，是通过下述方法构建：LoxP-SV40P nco-IRES-tk-PolyA-LoxP基因表达盒的构建；将基因表达盒的扩增片段与PXL-Bccll连接，构建基本转基因载体PB-NIT；含有目的基因SV40T和p 53的转基因载体PB-NIT-STP的构建；含有Tet结合域rtTA的筛选载体PB-rtTA-NIT-STP的构建。本发明构建的转基因载体具有有效提高转基因效率、便于筛选的优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119614632A
公开(公告)日：2025-03-14
申请号：CN202411627205.2
申请日：2024-11-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/55 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种优化的NlovFz2‑ωRNA编辑系统，通过对NlovFz2蛋白及ωRNA骨架的改造，获得最优NlovFz2系统enNlovFz2，在相比于亲本NlovFz2系统显著提升编辑效率基础上，通过将NlovFz2突变蛋白与T5核酸外切酶融合，获得编辑效率更高的enNlovFz2‑T5系统。本发明对于推进基因编辑技术在功能机制研究和临床治疗方面的广泛应用具有重要意义和价值。
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公开(公告)号：CN116716198A
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202310729111.5
申请日：2023-06-19
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种防治柱状黄杆菌感染的口服重组酵母菌株及其制备方法和应用，以酵母菌株作为DNA疫苗载体，在酵母细胞中转化柱状黄杆菌GldJ基因重组表达载体，并通过向鱼类肠道细胞靶向递送GldJ基因，在鱼类肠道细胞中表达出相应的重组GldJ蛋白，该重组GldJ蛋白可以激活全身免疫反应，从而实现对柱状黄杆菌感染引起的鱼烂鳃病的防治。
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公开(公告)号：CN115792227A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211563162.7
申请日：2022-12-07
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: G01N33/569 , C12N5/0775
Abstract: 本发明具体涉及一种绒山羊毛囊干细胞的鉴定、分离和培养方法。技术方案为：使用CD34+和/或ITGβ1+和/或KRT15+作为毛囊干细胞的标记基因。本发明首次提出了一种可准确分离、鉴定绒山羊毛囊干细胞的方法。在分离上，本发明联合使用酶消化法和机械分离法共同获得细胞，并提供了一种可专用于培养绒山羊毛囊干细胞的培养基，以快速获得所需细胞。在鉴定上，本发明首次联合使用了几种新的标记基因，可快速、准确鉴定所需细胞。
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公开(公告)号：CN112370525A
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN202011262351.1
申请日：2020-11-12
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种用于瘦素免疫调节的口服重组酵母菌株，以酵母菌株作为宿主细胞，宿主细胞中转染有ob基因重组表达载体，通过向哺乳动物肠道DC细胞靶向递送ob基因重组表达载体，在DC细胞中表达出相应的重组瘦素蛋白，重组瘦素蛋白通过DC细胞呈递，使黏膜免疫系统产生瘦素抗体，并通过免疫反应降低血液中的瘦素水平，实现对机体高瘦素导致的瘦素不敏感的肥胖的治疗。
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公开(公告)号：CN111876422A
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN202010778704.7
申请日：2020-08-05
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种可用于富集CRISPR/Cas9介导的精确NHEJ修复细胞的筛选报告系统，包括精确NHEJ修复筛选报告载体以及与该筛选报告载体共转染于目标编辑细胞的细胞基因组长片段打靶载体，精确NHEJ修复筛选报告载体包括筛选报告基因表达盒及两个sgRNA表达盒，所述筛选报告基因表达盒的转录区包括用于插入在药物筛选基因序列选定隔断位置的双sgRNA靶位点构建序列，双sgRNA靶位点分别以两个sgRNA表达盒转录的sgRNA作为打靶筛选报告基因表达盒的导引序列。本发明的筛选报告系统通过共转染并进行药物筛选，可以高效的富集目的基因长片段精确删除的阳性细胞克隆。
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