-
公开(公告)号：CN109880851B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201910244538.X
申请日：2019-03-28
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种用于富集CRISPR/Cas9介导的同源重组修复细胞的筛选报告载体及筛选方法。筛选报告载体包括通用sgRNA表达盒、Cas9表达盒、抗性基因表达盒以及抗性基因同源重组修复模板，筛选报告载体自身可以通过抗性基因序列同源重组修复而使细胞产生抗性。所述的筛选报告载体与用于细胞基因组HDR编辑的打靶载体及供体载体组成共转染系统，可应用于高效富集发生点编辑、片段插入和片段删除的HDR阳性细胞克隆，并且可广泛应用于哺乳动物的多种细胞，显著提高了HDR编辑细胞的筛选效率，同时无需对细胞基因组的无关位置再引入双链断裂与DNA整合，为推动精准基因编辑的研究和应用提供有效途径。
-
公开(公告)号：CN107760707A
公开(公告)日：2018-03-06
申请号：CN201710381327.1
申请日：2017-05-25
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了增强基因表达的自激活Gal4/UAS系统表达盒的建立，通过优化UAS数目及GAL4激活/结合域类型，找到一种增强效果较好的表达盒，由自身强启动子CMV启动，借助Gal4/UAS系统使转录和翻译效率提高，从而产生自动激活、级联放大的效果；在转染后第5-10天维持较高的增强效果，第8天表达活性最高，说明表达盒增强基因表达的稳定性；在专门生产重组蛋白的CHO细胞中，增强效果大概是9倍。与现有基因表达盒相比，结构简单、增强效果显著，为基因治疗的非病毒转染途径和重组蛋白生产中增强目的基因表达提供了一种途径和新方法。
-
公开(公告)号：CN106755049A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611020358.6
申请日：2016-11-14
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种基于人工核酸酶的可视化细胞修复效率报告系统及其建立方法，包括由插入有目的基因靶位点的报告基因I表达盒、完整的报告基因II表达盒以及报告基因I的截短序列构建的双荧光报告系统表达载体，本发明所述基于人工核酸酶的可视化细胞修复效率报告系统利用并模拟真核细胞内的不同修复机制对报告系统中的相应的荧光表达盒进行修复，可通过流式细胞仪对双荧光报告系统表达载体两种报告基因的表达进行量化，在载体水平一次性报告检测真核细胞中某一确定基因位点HR、SSA和NHEJ的修复效率。
-
公开(公告)号：CN103695327B
公开(公告)日：2016-04-13
申请号：CN201310647359.3
申请日：2013-12-02
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种口服重组酵母及其介导的靶向肠道DC呈递shRNA的应用，以酵母菌株作为宿主细胞，宿主细胞中转染有shRNA干扰载体，该shRNA干扰载体上设有启动子-shRNA-miR30的元件排列。该口服重组酵母能够穿过活体生物的胃肠道环境，靶向肠道DC细胞传递shRNA新方法，该方法可以有效的解决现有技术中向DC呈递时存在的弊端，能够广泛应用于基因治疗。
-
公开(公告)号：CN102367450A
公开(公告)日：2012-03-07
申请号：CN201110193102.6
申请日：2011-07-11
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明是一种由PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体、其构建方法及其应用，属于基因工程技术领域。所述载体为PB-rtTA-NIT-STP，是通过下述方法构建：LoxP-SV40P nco-IRES-tk-PolyA-LoxP基因表达盒的构建；将基因表达盒的扩增片段与PXL-Bccll连接，构建基本转基因载体PB-NIT；含有目的基因SV40T和p 53的转基因载体PB-NIT-STP的构建；含有Tet结合域rtTA的筛选载体PB-rtTA-NIT-STP的构建。本发明构建的转基因载体具有有效提高转基因效率、便于筛选的优点。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116726156A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310275151.7
申请日：2023-03-20
Applicant: 西北农林科技大学 , 山西大禹生物工程股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种口服酵母介导的产气荚膜梭菌α毒素重组DNA疫苗，通过重组酿酒酵母靶向递送携带plc基因定点突变片段或截短后的C‑末端结构域片段的表达载体，随着该表达载体在树突状细胞内激活相应片段的转录和翻译，并由宿主机制呈递抗原，宿主机体的黏膜免疫反应激活，从而通过相应的中和抗体对产气荚膜梭菌引起的感染进行预防。
-
公开(公告)号：CN116515904A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310388217.3
申请日：2023-04-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N5/10 , C12N15/12 , C12N9/22 , C12N15/113 , G01N21/64 , G01N15/14 , C12Q1/02
Abstract: 本发明公开了一种红绿光切换式交通信号灯基因编辑阳性报告富集系统。构建了新型的红绿光“切换式”报告载体以及相应的验证用CRISPR/Cas系统的表达载体。通过CRISPR/Cas系统同时打靶基因组、报告载体，利用SSA修复机制对报告载体中的双荧光报告基因及抗性基因一体化表达盒进行修复。该报告富集系统可以简单、快速检测被转染细胞中的核酸酶活性，并高效富集基因编辑阳性细胞。
-
公开(公告)号：CN106011171B
公开(公告)日：2019-10-11
申请号：CN201610333062.3
申请日：2016-05-18
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85
Abstract: 本发明主要属于基因编辑技术领域，具体涉及一种基因无缝编辑方法。该方法构建靶向CCR5和eGFP的CRISPR/Cas9表达载体CCR5.CRISPR/Cas9和eGFP.CRISPR/Cas9，并构建供体CCR5‑Donor载体；随后通过两次转染，利用CRISPR‑Cas9系统及细胞内的HR和SSA修复机制，通过细胞的嘌呤霉素和更昔洛韦正负向筛选，完成无缝编辑。
-
公开(公告)号：CN105861552B
公开(公告)日：2019-10-11
申请号：CN201610261461.3
申请日：2016-04-25
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明主要属于高等生物体基因组编辑技术领域，具体涉及一种T7 RNA聚合酶介导的CRISPR/Cas9基因编辑系统的构建方法。所述方法基于T7 RNA聚合酶和T7启动子的高度特异性识别原理，首先构建T7启动子‑sgRNA，将T7启动子‑sgRNA、Cas9表达质粒以及T7 RNA聚合酶表达质粒共同转入细胞，T7 RNA聚合酶催化T7启动子启动sgRNA的转录，从而引导Cas9在靶位点处，进行切割，完成基因编辑过程。本发明所述方法利用T7启动子表达sgRNA，简化了CRISPR/Cas9系统的设计步骤，使得更多的人能够快速简便使用CRISPR/Cas9这一基因编辑工具研究感兴趣的基因位点。
-
公开(公告)号：CN109880851A
公开(公告)日：2019-06-14
申请号：CN201910244538.X
申请日：2019-03-28
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/90 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种用于富集CRISPR/Cas9介导的同源重组修复细胞的筛选报告载体及筛选方法。筛选报告载体包括通用sgRNA表达盒、Cas9表达盒、抗性基因表达盒以及抗性基因同源重组修复模板，筛选报告载体自身可以通过抗性基因序列同源重组修复而使细胞产生抗性。所述的筛选报告载体与用于细胞基因组HDR编辑的打靶载体及供体载体组成共转染系统，可应用于高效富集发生点编辑、片段插入和片段删除的HDR阳性细胞克隆，并且可广泛应用于哺乳动物的多种细胞，显著提高了HDR编辑细胞的筛选效率，同时无需对细胞基因组的无关位置再引入双链断裂与DNA整合，为推动精准基因编辑的研究和应用提供有效途径。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
31
records
(took 0.03 seconds)
