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公开(公告)号：CN102367450A
公开(公告)日：2012-03-07
申请号：CN201110193102.6
申请日：2011-07-11
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明是一种由PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体、其构建方法及其应用，属于基因工程技术领域。所述载体为PB-rtTA-NIT-STP，是通过下述方法构建：LoxP-SV40P nco-IRES-tk-PolyA-LoxP基因表达盒的构建；将基因表达盒的扩增片段与PXL-Bccll连接，构建基本转基因载体PB-NIT；含有目的基因SV40T和p 53的转基因载体PB-NIT-STP的构建；含有Tet结合域rtTA的筛选载体PB-rtTA-NIT-STP的构建。本发明构建的转基因载体具有有效提高转基因效率、便于筛选的优点。
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公开(公告)号：CN104031853A
公开(公告)日：2014-09-10
申请号：CN201310429660.7
申请日：2013-09-22
Applicant: 西北农林科技大学 , 陕西省畜牧技术推广总站
Inventor： 张智英 , 张志强 , 辛颖 , 安宁 , 张涛 , 白义春 , 邵斯旻 , 张建峰 , 任充华 , 李铎 , 张龙 , 闫强 , 林娟 , 徐华荣 , 李欣憶 , 刘中天 , 梁明福
Abstract: 本发明公开了一种可用于大规模生产的MSTN酵母菌种的构建方法，该方法步骤为：KanMX4基因片段的扩增和pBlue-KanMX4载体的构建；酵母基因同源臂的插入；pBlue-kan-NTS2-5’3'-MSTN整合载体的构建；将MSTN载体整合入酵母基因组；抗性基因KanMX4的敲除。本发明构建了不含有筛选基因的Myostatin整合型酵母菌株，该菌种可以在富集型培养基中生产，安全可靠成本低，不会造成目的基因丢失，适合于大规模生产重组酵母，采用本发明大规模生产的酵母菌株直接饲喂动物，可在动物体内产生高水平MSTN特异性抗体，解除其抑制作用，促进肌肉生长，这对动物生产具有重要意义。
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公开(公告)号：CN103146735A
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201210580350.0
申请日：2012-12-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明TALE重复单元四聚体库的构建方法、TALEN表达载体的构建方法及其应用，属于基因工程技术领域。所述四聚体库的构建包括构建TALE单个重复单元、构建TALE单体质粒以及在T4DNA连接酶缓冲液中加入TALE单体质粒，同时加入BsaI内切酶和T4DNA Ligase进行酶切-连接反应得到TALE重复单元四聚体库的过程。TALEN表达载体是基于TALE重复单元四聚体库构建所得。本发明具有通过PCR扩增和酶切-连接过程就可以构建TALE重复序列四聚体质粒库以及基于四聚体质粒库构建得到TALEN表达载体，减少了成本的投入、减化了构建方法的优点。
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公开(公告)号：CN102206631A
公开(公告)日：2011-10-05
申请号：CN201110054992.2
申请日：2011-03-08
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明一种开源方式筛选靶向结合人DYRK1A基因靶位点的锌指蛋白的方法，属于基因工程技术领域。该方法包括：(1)3个锌指蛋白库的构建；(2)报告载体和报告菌株的构建；(3)有效锌指库的筛选；(4)有效锌指库的连接、组装；(5)利用细菌双杂交原理筛选出具有较高特异性和亲和力的三锌指蛋白。本发明所述的方法具有获得的锌指蛋白特异性和亲和性较高，组装的锌指核酸酶有更高的效率的优点。
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