公开(公告)号：CN106148380A

公开(公告)日：2016-11-23

申请号：CN201510199070.9

申请日：2015-04-24

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 檀建新 ,  李志辉 ,  张莹莹 ,  申培立 ,  张蕴哲 ,  任蓓蕾 ,  亢春雨 ,  于宏伟 ,  卢海强 ,  马雯 ,  张伟 ,  陈中义

IPC: C12N15/75 ,  C12N15/64 ,  C12N1/21 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了属于生物技术领域的一种高效穿梭表达载体及其构建方法与应用。本发明是在E. coli-B. subtilis穿梭载体pHT315的基础上构建的，通过将枯草芽孢杆菌Bs168的木糖启动子序列与来自E. coli表达载体pET21b的T7表达区序列融合，构建了一个高效穿梭表达载体pHTL，以gfp，gus和lipa为报告基因，检测载体的表达能力和遗传稳定性；同时，将来自纳豆芽孢杆菌的碱性蛋白酶信号肽序列代替载体pHTL上的T7肽编码区，构建成高效分泌型穿梭表达载体pHTZ，以gus，tgl1和lipa为报告基因，检测载体的表达能力。两种载体均可以正确表达相应蛋白并具有生物学活性，具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN106148380B

公开(公告)日：2019-04-09

申请号：CN201510199070.9

申请日：2015-04-24

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 檀建新 ,  李志辉 ,  张莹莹 ,  申培立 ,  张蕴哲 ,  任蓓蕾 ,  亢春雨 ,  于宏伟 ,  卢海强 ,  马雯 ,  张伟 ,  陈中义

IPC: C12N15/75 ,  C12N15/64 ,  C12N1/21 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了属于生物技术领域的一种高效穿梭表达载体及其构建方法与应用。本发明是在E.coli‑B.subtilis穿梭载体pHT315的基础上构建的，通过将枯草芽孢杆菌Bs168的木糖启动子序列与来自E.coli表达载体pET21b的T7表达区序列融合，构建了一个高效穿梭表达载体pHTL，以gfp，gus和lipa为报告基因，检测载体的表达能力和遗传稳定性；同时，将来自纳豆芽孢杆菌的碱性蛋白酶信号肽序列代替载体pHTL上的T7肽编码区，构建成高效分泌型穿梭表达载体pHTZ，以gus，tgl1和lipa为报告基因，检测载体的表达能力。两种载体均可以正确表达相应蛋白并具有生物学活性，具有广泛的应用前景。