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公开(公告)号：CN113310956A
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202110545912.7
申请日：2021-05-19
Applicant: 江苏大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明涉及一种特异性检测体系的食品中四环素检测方法。属于食品安全检测技术领域，步骤一，通过热分解法制备上转换内核；步骤二，通过热分解法在合成的上转换内核上包覆外壳，合成上转换核壳结构；步骤三，将步骤二所得的上转换核壳材料经超声酸处理去除表面油酸基团，暴露铕离子，制备四环素识别探针；步骤四，合成羧基化的磁性纳米材料；步骤五，上转换探针与不同浓度四环素孵育后加入磁性纳米材料，经外界磁场分离后，测定上清液荧光强度，建立四环素含量检测标准曲线；步骤六，检测样本中的四环素含量。本发明具有较宽的检测范围和较低的检测限，具有良好应用前景。
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公开(公告)号：CN112129732A
公开(公告)日：2020-12-25
申请号：CN202010811099.9
申请日：2020-08-13
Applicant: 江苏大学
IPC: G01N21/64 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种基于上转换磁分离的快速检测蜡样芽孢杆菌的方法，合成稀土元素掺杂的上转换荧光纳米颗粒；对上转换荧光纳米颗粒表面进行氨基修饰，采用水热法合成具有氨基基团的四氧化三铁纳米颗粒；合成目标菌体的适配体以及与该目标菌体的适配体碱基互补配对的cDNA核酸单链；采用戊二醛交联法完成cDNA核酸单链在水溶性上转换荧光纳米颗粒表面的再修饰，得到上转换荧光探针；采用戊二醛交联法完成目标菌体的适配体单链在氨基化四氧化三铁纳米颗粒的表面修饰，得到磁性纳米材料捕捉探针；将上转换荧光探针和磁性纳米材料捕捉探针混合得到检测探针，制备待测样品的检测体系，测得加入待测样品后的荧光值，得到待测样品中的实际目标细菌的数量。
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公开(公告)号：CN110241182A
公开(公告)日：2019-09-17
申请号：CN201910375397.5
申请日：2019-05-07
Applicant: 江苏大学
IPC: C12Q1/6823 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种猝灭荧光RNA标志物合成方法及应用于食源性致病菌检测的方法，采用一步溶剂热法合成带有氨基修饰的上转换纳米颗粒，将特定的RNA与猝灭剂结合合成RNA荧光标志物，采用戊二醛交联法将RNA荧光标志物与带有氨基修饰的上转换纳米颗粒连接在一起得到猝灭荧光RNA标志物；并将猝灭荧光RNA标志物应用于食源性致病菌的检测，核酸酶Cas13a对痕量致病菌细胞中的特定核酸靶标进行精确切割，并利用该酶的附带切割效应，剪切猝灭荧光RNA标志物，释放可被检测的荧光；采集荧光光谱数据，构建荧光强度变化值与不同量食源性致病菌核酸靶标的定量检测模型，实现食源性致病菌核酸的纳米荧光痕量检测。
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公开(公告)号：CN114058721B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202111371889.0
申请日：2021-11-18
Applicant: 江苏大学
Abstract: 本发明公开了一种上转换荧光识别探针的制备方法及其产品和应用，涉及食品安全检测技术领域；该制备方法包括以下步骤：使用水合稀土氯化物、1‑十八碳烯、油酸、NaOH和氟化铵等制备UCNPs‑OA，再对UCNPs‑OA进行改性，得到水溶性UCNPs‑COOH；根据致病菌种类选择特异性基因，设计纳米探针ssDNA，并对其进行氨基修饰，获得氨基功能化的DNA纳米探针；将水溶性UCNPs‑COOH与氨基化的DNA纳米探针通过缩合反应连接，获得所述上转换荧光识别探针。本发明结合了UCNPs稳定的发光特性、DNA纳米探针的特异性精准识别功能以及GOQDs优异的荧光猝灭性能，提高了检测的灵敏度和特异性。
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公开(公告)号：CN112129732B
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202010811099.9
申请日：2020-08-13
Applicant: 江苏大学
IPC: G01N21/64 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种基于上转换磁分离的快速检测蜡样芽孢杆菌的方法，合成稀土元素掺杂的上转换荧光纳米颗粒；对上转换荧光纳米颗粒表面进行氨基修饰，采用水热法合成具有氨基基团的四氧化三铁纳米颗粒；合成目标菌体的适配体以及与该目标菌体的适配体碱基互补配对的cDNA核酸单链；采用戊二醛交联法完成cDNA核酸单链在水溶性上转换荧光纳米颗粒表面的再修饰，得到上转换荧光探针；采用戊二醛交联法完成目标菌体的适配体单链在氨基化四氧化三铁纳米颗粒的表面修饰，得到磁性纳米材料捕捉探针；将上转换荧光探针和磁性纳米材料捕捉探针混合得到检测探针，制备待测样品的检测体系，测得加入待测样品后的荧光值，得到待测样品中的实际目标细菌的数量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112831580B
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202110166903.7
申请日：2021-02-04
Applicant: 江苏大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于病原诊断技术领域，具体涉及一种用于检测副溶血性弧菌DNA的反应体系、试剂盒及其应用。本发明利用SHERLOCK技术建立了一种快速检测致病性副溶血性弧菌的检测方法，该方法可检测副溶血性弧菌的tlh基因、tdh基因、trh基因和toxR基因四种致病基因，特异性强，灵敏度高，并且操作简便快捷，结果读取准确迅速，克服了现有检测方法检测时间过长且灵敏度不够高的问题。
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公开(公告)号：CN112697761B
公开(公告)日：2023-02-17
申请号：CN202110012473.3
申请日：2021-01-06
Applicant: 江苏大学
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明涉及一种基于上转换、BHQ3特异性体系的牛奶中卡那霉素含量检测方法，属于食品安全检测技术领域，以六水氯化钇、六水氯化镱、六水氯化铒、聚乙烯亚胺、氯化钠和氟化铵的乙二醇混合液为原料，制备上转换荧光纳米材料；通过戊二醛交联法将上转换材料与卡那霉素适配体连接起来；与卡那霉素适配体互补链‑BHQ3溶液混合孵育，得到特异性检测体系；加入卡那霉素溶液后，测定检测溶液的荧光强度信号特征值为纵坐标，以卡那霉素浓度为横坐标，建立卡那霉素检测标准曲线，实现待测牛奶中卡那霉素含量的测定；本发明通过构建稳态特异性卡那霉素荧光检测体系，实现牛奶中卡那霉素的高灵敏、特异性检测，具有较宽的线性检测范围和较低的检测限。
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公开(公告)号：CN114058721A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111371889.0
申请日：2021-11-18
Applicant: 江苏大学
Abstract: 本发明公开了一种上转换荧光识别探针的制备方法及其产品和应用，涉及食品安全检测技术领域；该制备方法包括以下步骤：使用水合稀土氯化物、1‑十八碳烯、油酸、NaOH和氟化铵等制备UCNPs‑OA，再对UCNPs‑OA进行改性，得到水溶性UCNPs‑COOH；根据致病菌种类选择特异性基因，设计纳米探针ssDNA，并对其进行氨基修饰，获得氨基功能化的DNA纳米探针；将水溶性UCNPs‑COOH与氨基化的DNA纳米探针通过缩合反应连接，获得所述上转换荧光识别探针。本发明结合了UCNPs稳定的发光特性、DNA纳米探针的特异性精准识别功能以及GOQDs优异的荧光猝灭性能，提高了检测的灵敏度和特异性。
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公开(公告)号：CN111378722A
公开(公告)日：2020-07-07
申请号：CN201911063921.1
申请日：2019-11-04
Applicant: 江苏大学
IPC: C12Q1/6816 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR-Cas12g的特异性核酸片段纳米荧光痕量快速检测方法：以生物样品中特异性核酸片段为研究对象，制备生物样品的核酸靶标、猝灭荧光探针、Cas12g三元复合体；将Cas12g三元复合体、核酸靶标、猝灭荧光探针、背景RNA和RNA酶抑制剂混合在核酸酶缓冲液中孵育，当Cas12g三元复合体与核酸靶标识别匹配后，不仅剪切核酸靶标，且附带非特异性反式剪切猝灭荧光探针，进而获取可被检测的荧光；通过采集荧光光谱数据，构建上转换纳米荧光强度变化值与不同浓度的核酸靶标的定量检测模型，实现生物样品中核酸靶标的纳米荧光痕量快速检测。本发明能够适用于生物样品中特异性核酸片段快速、特异、灵敏的检测方法。
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公开(公告)号：CN111041049A
公开(公告)日：2020-04-21
申请号：CN201911343995.0
申请日：2019-12-24
Applicant: 江苏大学
Abstract: 本发明公开了一种基于近红外光控的CRISPR-Cas13a系统制备方法及其应用，根据目的基因mRNA的序列设计合成crRNA，将其和纯化的Cas13a蛋白形成Cas13a-crRNA复合物，通过光敏分子将Cas13a-crRNA复合物与上转换纳米材料连接在一起获得UCNPs-Cas13a；再用PEI涂覆UCNPs-Cas13a得到UCNPs-Cas13a@PEI；所制备的UCNPs-Cas13a@PEI附着在真核生物细胞表面并进入细胞，利用UCNPs-Cas13a@PEI的PEI促进内体逃逸；在NIR激光照射下Cas13a-crRNA被释放，在目的基因mRNA上寻找与crRNA间隔序列对应的互补序列，crRNA与目的基因mRNA匹配以激活Cas13a的HEPN催化位点剪切mRNA，进而抑制真核生物目的基因表达。
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