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公开(公告)号：CN113817704B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202111235303.8
申请日：2021-10-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种有机溶剂耐受性提高的环糊精葡萄糖基转移酶及其制备方法，属于酶工程和基因工程技术领域。本发明构建了两个有机溶剂(二甲基亚砜和乙醇)耐受性提高的环糊精葡萄糖基转移酶突变体。以染料木素为例，将这两个突变体运用在对染料木素的糖基化反应，结果显示，T599H/N600S/Y601G和T599D/N600D/Y601H产生的长链糖基化产物特异性明显优于野生型WT，分别是野生型的2.1倍及2.5倍。本发明获得了两个有机溶剂耐受性提高的环糊精糖基转移酶突变体，促进了糖基转移酶有机反应体系中的酶促效率，有助于拓展CGTase的工业应用范围，具有极大的应用前景。
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公开(公告)号：CN116121321A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211090337.7
申请日：2022-09-07
Applicant: 江南大学
IPC: C12P19/24 , C12P19/02 , C12N9/90 , C12N9/16 , C12N9/10 , C12N9/12 , C12N1/21 , C12N15/70 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种添加Co2+提高多酶催化生产D‑阿洛酮糖产率的方法，属于生物技术的领域。本发明提供一种多酶催化生产D‑阿洛酮糖的方法，所述方法为，向含有蔗糖、ATP的反应体系中添加Bifidobacterium adolescentis来源的蔗糖磷酸化酶、Clostridium acetobutylicum来源的果糖激酶、Clostridium thermocellum来源的D‑阿洛酮糖‑6‑磷酸磷酸酶、Pantoea sp来源的D‑阿洛酮糖‑6‑磷酸‑3‑差向异构酶，同时，向反应体系中添加金属离子溶液后，进行反应生产D‑阿洛酮糖。本发明以廉价的蔗糖为底物合成一种重要的低热量功能性稀有糖D‑阿洛酮糖，并通过实验证明添加钴离子可使D‑阿洛酮糖的产率达到原来的五倍。
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公开(公告)号：CN110804597B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201911084700.2
申请日：2019-11-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明CGTase突变体对长链糖基化染料木素的产物特异性高；利用本发明的CGTase突变体A156V/L174P、A156V/L174P/A166Y、A156V/L174P/A166V、A156V/L174P/A166G和A156V/L174P/A166K分别以麦芽糊精作为糖基供体，以染料木素作为糖基受体生产长链糖基化染料木素的产量较利用野生型环糊精葡萄糖基转移酶以麦芽糊精作为糖基供体，以染料木素作为糖基受体生产长链糖基化染料木素的产量分别提高了62.5％、165％、112.5％、112.5％和59.4％。
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公开(公告)号：CN112481226A
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN202011352223.6
申请日：2020-11-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的醇脱氢酶突变体酶活高，对有机溶剂耐受性好，有效解决了目前醇脱氢酶在工业化条件下由于对有机溶剂耐受性不好而造成的失活问题。因此，本发明的醇脱氢酶突变体在提高溶剂耐受性的同时，还能保持着底物转化率达到99.9％的效果，在生产如(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇、(R)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇等的手性双芳基醇中具有极高的应用前景。
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公开(公告)号：CN106755215B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201710014956.0
申请日：2017-01-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用环糊精葡萄糖基转移酶高产染料木素糖基化衍生物的方法，属于酶工程领域。本发明分别对环糊精葡萄糖基转移酶催化染料木素糖基化反应体系中的糖基供体种类，染料木素溶剂种类，底物浓度及配比，酶的浓度，以及反应温度、pH和时间进行了优化。分别以可溶性淀粉和染料木素作为糖基化供体和受体，以环糊精葡萄糖基转移酶作为催化剂，在最适反应条件下，糖基化染料木素产物的产量达到最大化，特别是对于主产物(Glc)2‑genistein，其产量较优化前提高了近1.5倍。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110714035A
公开(公告)日：2020-01-21
申请号：CN201911120263.5
申请日：2019-11-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种级联反应制备D-脂肪族氨基酸的方法。本发明以氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的D-N-氨甲酰水解酶作为催化剂，在海因酶过程级联反应中制备D-脂肪族氨基酸。本发明提供了一种D-N-氨甲酰水解酶可作为催化剂应用于海因酶过程制备光学纯D-脂肪族氨基酸，其可溶性好，催化效率高(转化率>99.9％)、立体选择性强(e.e.>99.9％)、适用的反应条件温和、环境友好。本发明的D-N-氨甲酰水解酶催化效果佳，底物适用性广，具有很好的应用开发前景。
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公开(公告)号：CN108531466A
公开(公告)日：2018-09-14
申请号：CN201810299543.6
申请日：2018-04-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶及其制备方法，属于遗传工程和酶工程领域。本发明通过对P.macerans strain JFB05-01(CCTCC NO:M208063)的CGTase的156位的丙氨酸(Ala)分别替换为赖氨酸(Lys)、谷氨酰胺(Gln)和缬氨酸(Val)，使染料木素糖基化效率分别提高了23％、44％和32％。这些突变酶比野生型CGTase更利于催化生产糖基化染料木素。
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公开(公告)号：CN104004724B
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201410271721.6
申请日：2012-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种麦芽糊精底物特异性提高的环糊精糖基转移酶及其制备方法，属于遗传工程和酶工程领域。本发明通过对P.macerans strain JFB05?01(CCTCC NO:M208063)的CGTase的195位的酪氨酸(Tyr)替换为丝氨酸(Ser),260位的酪氨酸(Tyr)替换为精氨酸(Arg),265位的谷氨酰胺(Gln)替换为赖氨酸(Lys)，使AA?2G产量分别提高了23％，44％和40％。对以上突变株组合突变，获得双突变体Y195S/Y260R,Y195S/Q265K和Y260R/Q265K以及三点突变体Y195S/Y260R/Q265K。它们利用麦芽糊精为糖基供体生产AA?2G产量分别提高了57％，49％，55％和59％。这些突变株比野生型CGTase更利于利用麦芽糊精为糖基供体生产AA?2G。
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公开(公告)号：CN102965353A
公开(公告)日：2013-03-13
申请号：CN201210527870.5
申请日：2012-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种麦芽糖底物特异性提高的环糊精糖基转移酶及其制备方法，属于遗传工程和酶工程领域。本发明通过对P.macerans strain JFB05-01(CCTCC NO:M208063)的CGTase的47位的赖氨酸（Lys）分别替换为苯丙氨酸（Phe）、酪氨酸（Tyr）和脯氨酸（Pro），使AA-2G产量分别提高了17.1%，22.1%和32.9%。这些突变株比野生型CGTase更利于利用麦芽糖为糖基供体生产AA-2G，具有重要的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN116083505A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202211386529.2
申请日：2022-11-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种三酶级联法生产D‑塔格糖的方法，属于生物技术的领域。本发明的方法以果糖为底物，在含有金属离子和ATP的反应体系中，利用来源于Clostridium acetobutylicm的果糖激酶FRK，来源于Caldilinea aerophila DSM 14535的D‑塔格糖6‑磷酸4‑差向异构酶GatZ和来源于Methanothermobacter marburgensis的D‑塔格糖‑6‑磷酸磷酸酶MmPase进行反应生产D‑塔格糖。并通过优化温度、金属离子类型及浓度使得D‑塔格糖的产率达到原来的2.7～9倍。
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