一种苯丙氨酸脱氢酶突变体及其在合成L-非天然氨基酸中的应用

    公开(公告)号:CN117844773B

    公开(公告)日:2024-11-15

    申请号:CN202410213255.X

    申请日:2024-02-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种苯丙氨酸脱氢酶突变体及其在合成L‑非天然氨基酸中的应用,属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明提供的苯丙氨酸脱氢酶突变体能够不对称还原胺化α‑酮酸底物2‑(萘‑1‑基)‑2‑氧代乙酸、2‑(萘‑2‑基)‑2‑氧代乙酸、3‑(萘‑1‑基)‑2‑氧代丙酸、3‑(萘‑2‑基)‑2‑氧代丙酸,其中四突变体V329G/S176G/L326M/T144I能够高效合成(S)‑2‑氨基‑2‑(萘‑1‑基)乙酸,在反应时间10h时转化率可达99.84%,反应条件温和,对环境友好,操作简便,易于工业放大。因此,本发明的苯丙氨酸脱氢酶突变体具有很好的工业应用开发前景。

    一种还原胺化酶在不对称合成手性胺中的应用

    公开(公告)号:CN116837042A

    公开(公告)日:2023-10-03

    申请号:CN202310860050.6

    申请日:2023-07-13

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种还原胺化酶在不对称合成手性胺中的应用,属于酶工程技术领域。本发明还原胺化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,来源于Streptomycesviridochromogenes。本发明应用的方法是以β‑酮酯类化合物为底物,以还原胺化酶为催化剂催化生成手性胺N‑取代β‑氨基酯,得到的产物光学纯度高(ee值达99%以上),反应条件温和,低能耗,环境友好,副反应少,仅需一步还原胺化即可完成,且操作简单,易于工业放大。因此,本发明所述还原胺化酶在不对称合成手性胺方面具有很好的工业应用开发前景。

    一种4-羟基苯乙酮单加氧酶的应用

    公开(公告)号:CN115141814B

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202210741075.X

    申请日:2022-06-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种4‑羟基苯乙酮单加氧酶的应用,本发明针对已经报道的4‑羟基苯乙酮单加氧酶的对芳香酮、底物硫醚的低催化活性、产物ee值低等问题,提供了另外一种新的4‑羟基苯乙酮单加氧酶,该酶对芳香酮和硫醚底物表现出的高活性,并对硫醚有的高立体选择性,能够直接有效解决目前单加氧酶所存在的问题。在以不同取代基的硫醚衍生物为底物制备S‑亚砜时,大部分转化率可达95%以上,得率可达95%。为工业化生产光学活性亚砜提供了一种新的思路和方法。

    一种4-羟基苯乙酮单加氧酶的应用

    公开(公告)号:CN115141814A

    公开(公告)日:2022-10-04

    申请号:CN202210741075.X

    申请日:2022-06-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种4‑羟基苯乙酮单加氧酶的应用,本发明针对已经报道的4‑羟基苯乙酮单加氧酶的对芳香酮、底物硫醚的低催化活性、产物ee值低等问题,提供了另外一种新的4‑羟基苯乙酮单加氧酶,该酶对芳香酮和硫醚底物表现出的高活性,并对硫醚有的高立体选择性,能够直接有效解决目前单加氧酶所存在的问题。在以不同取代基的硫醚衍生物为底物制备S‑亚砜时,大部分转化率可达95%以上,得率可达95%。为工业化生产光学活性亚砜提供了一种新的思路和方法。

    一种醇脱氢酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN114277007A

    公开(公告)日:2022-04-05

    申请号:CN202111679191.5

    申请日:2021-12-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种醇脱氢酶突变体及其应用,所述突变体是将氨基酸序列为SEQ ID No.2醇脱氢酶的第214位谷氨酸、第215位苏氨酸和第237位丝氨酸进行突变;或将氨基酸序列为SEQ ID No.2醇脱氢酶的第161位苯丙氨酸、第196位丝氨酸、第214位谷氨酸进行突变。本发明的醇脱氢酶突变体具有优良的催化活性和立体选择性,可高效催化制备一系列R‑和S‑构型的具有对位取代基的手性双芳基醇;将本发明醇脱氢酶突变体与葡萄糖脱氢酶或甲酸脱氢酶进行偶联,可用于多种抗组胺药物手性双芳基醇中间体的合成;本发明的醇脱氢酶不对称催化还原制备双芳基手性醇的方法具有操作简便、底物浓度高、反应完全、产品纯度高的优势,具有很强的工业应用前景。

    一种醇脱氢酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN112481226A

    公开(公告)日:2021-03-12

    申请号:CN202011352223.6

    申请日:2020-11-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种醇脱氢酶突变体及其应用,属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的醇脱氢酶突变体酶活高,对有机溶剂耐受性好,有效解决了目前醇脱氢酶在工业化条件下由于对有机溶剂耐受性不好而造成的失活问题。因此,本发明的醇脱氢酶突变体在提高溶剂耐受性的同时,还能保持着底物转化率达到99.9%的效果,在生产如(S)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇、(R)‑(4‑氯苯基)‑(吡啶‑2‑基)‑甲醇等的手性双芳基醇中具有极高的应用前景。

    一种利用环糊精葡萄糖基转移酶高产染料木素糖基化衍生物的方法

    公开(公告)号:CN106755215B

    公开(公告)日:2020-06-09

    申请号:CN201710014956.0

    申请日:2017-01-09

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用环糊精葡萄糖基转移酶高产染料木素糖基化衍生物的方法,属于酶工程领域。本发明分别对环糊精葡萄糖基转移酶催化染料木素糖基化反应体系中的糖基供体种类,染料木素溶剂种类,底物浓度及配比,酶的浓度,以及反应温度、pH和时间进行了优化。分别以可溶性淀粉和染料木素作为糖基化供体和受体,以环糊精葡萄糖基转移酶作为催化剂,在最适反应条件下,糖基化染料木素产物的产量达到最大化,特别是对于主产物(Glc)2‑genistein,其产量较优化前提高了近1.5倍。

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