公开(公告)号：CN113817704B

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202111235303.8

申请日：2021-10-22

Applicant: 江南大学

Inventor： 韩瑞枝 ,  姜钰琳 ,  樊朝悦 ,  易灵凤 ,  倪晔

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/60 ,  C12P19/18 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种有机溶剂耐受性提高的环糊精葡萄糖基转移酶及其制备方法，属于酶工程和基因工程技术领域。本发明构建了两个有机溶剂(二甲基亚砜和乙醇)耐受性提高的环糊精葡萄糖基转移酶突变体。以染料木素为例，将这两个突变体运用在对染料木素的糖基化反应，结果显示，T599H/N600S/Y601G和T599D/N600D/Y601H产生的长链糖基化产物特异性明显优于野生型WT，分别是野生型的2.1倍及2.5倍。本发明获得了两个有机溶剂耐受性提高的环糊精糖基转移酶突变体，促进了糖基转移酶有机反应体系中的酶促效率，有助于拓展CGTase的工业应用范围，具有极大的应用前景。

公开(公告)号：CN116144622A

公开(公告)日：2023-05-23

申请号：CN202211071304.8

申请日：2022-09-01

Applicant: 江南大学

Inventor： 韩瑞枝 ,  姜钰琳 ,  樊朝悦 ,  倪晔

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12P19/60

Abstract: 本发明公开了一种溶剂耐受性提高的环糊精葡萄糖基转移酶及其制备，属于酶工程和基因工程技术领域。本发明构建了四个有机溶剂耐受性提高的环糊精葡萄糖基转移酶突变体。其中，对DMSO和甲醇耐受性最好的突变体为G539I/R146F/D147N，较WT分别提高了1.6和1.7倍；对乙醇耐受性最好的突变体为R146F，较WT提高了1.4倍；对丙酮耐受性最好的突变体为G539I/R146F，较WT提高了1.5倍。本发明有助于拓展糖基转移酶在有机反应体系中的应用，提高CGTase对天然疏水底物的酶促效率，具有极大的应用前景。

公开(公告)号：CN113817704A

公开(公告)日：2021-12-21

申请号：CN202111235303.8

申请日：2021-10-22

Applicant: 江南大学

Inventor： 韩瑞枝 ,  姜钰琳 ,  樊朝悦 ,  易灵凤 ,  倪晔

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/60 ,  C12P19/18 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种有机溶剂耐受性提高的环糊精葡萄糖基转移酶及其制备方法，属于酶工程和基因工程技术领域。本发明构建了两个有机溶剂(二甲基亚砜和乙醇)耐受性提高的环糊精葡萄糖基转移酶突变体。以染料木素为例，将这两个突变体运用在对染料木素的糖基化反应，结果显示，T599H/N600S/Y601G和T599D/N600D/Y601H产生的长链糖基化产物特异性明显优于野生型WT，分别是野生型的2.1倍及2.5倍。本发明获得了两个有机溶剂耐受性提高的环糊精糖基转移酶突变体，促进了糖基转移酶有机反应体系中的酶促效率，有助于拓展CGTase的工业应用范围，具有极大的应用前景。