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公开(公告)号:CN108531466B
公开(公告)日:2020-08-04
申请号:CN201810299543.6
申请日:2018-04-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种产物特异性提高的环糊精葡萄糖基转移酶及制备方法,属于遗传工程和酶工程领域。本发明通过对P.macerans strain JFB05‑01(CCTCC NO:M208063)的CGTase的156位的丙氨酸(Ala)分别替换为赖氨酸(Lys)、谷氨酰胺(Gln)和缬氨酸(Val),使染料木素糖基化效率分别提高了23%、44%和32%。这些突变酶比野生型CGTase更利于催化生产糖基化染料木素。
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公开(公告)号:CN108531466A
公开(公告)日:2018-09-14
申请号:CN201810299543.6
申请日:2018-04-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶及其制备方法,属于遗传工程和酶工程领域。本发明通过对P.macerans strain JFB05-01(CCTCC NO:M208063)的CGTase的156位的丙氨酸(Ala)分别替换为赖氨酸(Lys)、谷氨酰胺(Gln)和缬氨酸(Val),使染料木素糖基化效率分别提高了23%、44%和32%。这些突变酶比野生型CGTase更利于催化生产糖基化染料木素。
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公开(公告)号:CN110656077A
公开(公告)日:2020-01-07
申请号:CN201911080357.4
申请日:2019-11-07
Applicant: 江南大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
Abstract: 本发明公开了一种生产蔗糖磷酸化酶的方法及其应用,属于生物技术领域。本发明提供了一种生产蔗糖磷酸化酶的方法,利用此方法生产蔗糖磷酸化酶的产量高且产得的蔗糖磷酸化酶比酶活高;利用此方法,将本发明的重组大肠杆菌在含有L-阿拉伯糖、四环素以及IPTG的发酵培养基中诱导表达12h,即可使细胞破碎液上清液中蔗糖磷酸化酶的酶活高达32.43U/mL,且使产得的蔗糖磷酸化酶的比酶活高达18.5U/mg。
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公开(公告)号:CN111394328B
公开(公告)日:2022-02-15
申请号:CN202010299605.0
申请日:2020-04-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种产物特异性提高的环糊精葡萄糖基转移酶及制备方法,属于遗传工程和酶工程领域。本发明提供了3个染料木素糖基化效率高的环糊精葡萄糖基转移酶突变体L174P、L174Y和L174D,相比于野生型环糊精葡萄糖基转移酶,它们利用麦芽糊精为糖基供体生产糖基化染料木素时,长链糖基化染料木素合成产量分别提高了0.7、1.2和1.8倍,更利于糖基化染料木素的工业化生产。
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公开(公告)号:CN110656077B
公开(公告)日:2021-10-08
申请号:CN201911080357.4
申请日:2019-11-07
Applicant: 江南大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
Abstract: 本发明公开了一种生产蔗糖磷酸化酶的方法及其应用,属于生物技术领域。本发明提供了一种生产蔗糖磷酸化酶的方法,利用此方法生产蔗糖磷酸化酶的产量高且产得的蔗糖磷酸化酶比酶活高;利用此方法,将本发明的重组大肠杆菌在含有L‑阿拉伯糖、四环素以及IPTG的发酵培养基中诱导表达12h,即可使细胞破碎液上清液中蔗糖磷酸化酶的酶活高达32.43U/mL,且使产得的蔗糖磷酸化酶的比酶活高达18.5U/mg。
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公开(公告)号:CN111394328A
公开(公告)日:2020-07-10
申请号:CN202010299605.0
申请日:2020-04-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种产物特异性提高的环糊精葡萄糖基转移酶及制备方法,属于遗传工程和酶工程领域。本发明提供了3个染料木素糖基化效率高的环糊精葡萄糖基转移酶突变体L174P、L174Y和L174D,相比于野生型环糊精葡萄糖基转移酶,它们利用麦芽糊精为糖基供体生产糖基化染料木素时,长链糖基化染料木素合成产量分别提高了0.7、1.2和1.8倍,更利于糖基化染料木素的工业化生产。
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公开(公告)号:CN109486782B
公开(公告)日:2020-06-09
申请号:CN201811415908.3
申请日:2018-11-26
Applicant: 江南大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
Abstract: 本发明公开了一种分子伴侣共表达提高蔗糖磷酸化酶表达效率的方法,属于生物工程与酶工程技术领域。本发明通过将重组质粒pET‑20b‑SPase与pGro7共表达,使得pGro7表达的分子伴侣蛋白能够有效减少包涵体的形成,促进SPase可溶性表达水平和活力的提高。通过优化表达条件及使用分子伴侣共表达系统,SPase的胞内酶活达到了24.33U/mL,比酶活达到了6.58U/mg。
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公开(公告)号:CN108486080B
公开(公告)日:2020-06-09
申请号:CN201810303894.X
申请日:2018-04-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶及其制备方法,属于遗传工程和酶工程领域。本发明通过对P.macerans strain JFB05‑01(CCTCC NO:M208063)的CGTase的156位的丙氨酸(Ala)分别替换为赖氨酸(Lys)、谷氨酰胺(Gln)和缬氨酸(Val),使染料木素糖基化效率分别提高了23%、44%和32%。这些突变酶比野生型CGTase更利于催化生产糖基化染料木素。
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公开(公告)号:CN109486782A
公开(公告)日:2019-03-19
申请号:CN201811415908.3
申请日:2018-11-26
Applicant: 江南大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
Abstract: 本发明公开了一种分子伴侣共表达提高蔗糖磷酸化酶表达效率的方法,属于生物工程与酶工程技术领域。本发明通过将重组质粒pET-20b-SPase与pGro7共表达,使得pGro7表达的分子伴侣蛋白能够有效减少包涵体的形成,促进SPase可溶性表达水平和活力的提高。通过优化表达条件及使用分子伴侣共表达系统,SPase的胞内酶活达到了24.33U/mL,比酶活达到了6.58U/mg。
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公开(公告)号:CN108486080A
公开(公告)日:2018-09-04
申请号:CN201810303894.X
申请日:2018-04-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种环糊精葡萄糖基转移酶及其制备方法,属于遗传工程和酶工程领域。本发明通过对P.macerans strain JFB05-01(CCTCC NO:M208063)的CGTase的156位的丙氨酸(Ala)分别替换为赖氨酸(Lys)、谷氨酰胺(Gln)和缬氨酸(Val),使染料木素糖基化效率分别提高了23%、44%和32%。这些突变酶比野生型CGTase更利于催化生产糖基化染料木素。
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